陈巍
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
- 供职机构：北京海淀妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎的巨噬细胞中Toll样受体4的表达被引量：3
- 2010年
- 目的探讨在内毒素诱导的Wistar大鼠葡萄膜炎中Toll样受体4（TLR4）阳性细胞与虹膜组织中巨噬细胞的动态变化和分布。方法实验研究。Wistar大鼠50只，用随机数字法随机分为5组，每组10只，分别为正常对照（0h）组、6h组、12h组、24h组及48h组。除0h组外其余各组均足垫部注射霍乱弧菌内毒素200μg，注射后于裂隙灯显微镜下观察双眼前节炎症反应变化。按实验分组于0．6、12、24、48h处死大鼠。取虹膜-睫状体及脉络膜组织。通过葡萄膜铺片免疫组织化学方法检测TLR4和巨噬细胞的标记CD163的表达。人工计数虹膜中TLR4^＋与CDl63^＋的细胞并计算细胞密度，计算圆形和多形性的CD163^＋细胞占所有CD163^＋细胞的百分比。进一步采用免疫荧光双标记检测TLR4和CD163共表达的情况。通过单因素方差分析分别对大鼠虹膜内阳性细胞密度以及圆形、多形性CD163^＋细胞的百分比进行统计学检验。结果正常大鼠虹膜睫状体组织不表达TLR4。6h组有2只大鼠虹膜内可见少量TLR4^＋细胞，12～48h组所有大鼠虹膜内TLR4^＋细胞明显增多（F=167．2，P〈0．001），虹膜内TLR4^＋细胞密度分别为（506．1±39．5）个／mm^2（12h组）、（492．3±54．5）＋／mm^2（24h组）及（663．8±150．2）个／mm^2（48h组）。在注射LPS后12—48h期间TLR4^＋细胞形态无明显变化。0—48h组大鼠虹膜内均有CD163^＋细胞，0h组圆形和多形性CD163^＋细胞百分比为13％，12～48h组其百分比约为80％，且圆形细胞主要位于虹膜基质层。免疫荧光双标记可见TLR4和CD163的共表达，TLR4位于细胞膜，CD163位于细胞质。5组大鼠脉络膜内均未见TLR4表达。结论内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎中虹膜内TLR4表达增高，部分虹膜固有巨噬细胞表达TLR4。TLR4可能在葡萄膜炎的发生发展中起一定作用。
- 陈巍胡小凤赵丽李上卢弘
- 关键词：脂多糖类葡萄膜炎TOLL样受体4
- 细胞因子在内毒素诱导的前葡萄膜炎小鼠房水和血清中的表达被引量：8
- 2010年
- 目的通过分析内毒素诱导的C3H/HeN小鼠的前葡萄膜炎模型中房水和血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的浓度,探讨急性前葡萄膜炎可能的发病机制。方法取180只C3H/HeN小鼠,分为对照组(n=30)和实验组(n=150),将霍乱弧菌内毒素(18001株,古典生物型,小川血清型)溶于无菌生理盐水中,终浓度为2×103g.L-1,实验组小鼠足底注射100μL制作内毒素诱导的前葡萄膜炎模型;对照组注射等量生理盐水。于诱导后4h、8h、16h、24h、48h断颈处死实验组小鼠(各30只),以10只小鼠为一单样本,微量进样器抽取前房水;眼球摘除后微量进样器于眼窝处取外周血。对照组于注射生理盐水后即刻处死小鼠,样本收集方法同实验组。微球流式技术检测小鼠房水及血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10、IFN-γ的浓度。结果所有实验组小鼠均成功诱导出急性前葡萄膜炎。在小鼠房水中,TNF-α于4h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.002);4h、8h、16h及24h时,在房水和血清内的浓度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。IL-1、IL-6在血清中均于16h达峰值,与对照组相比差异均有统计学(P=0.001、0.000);且诱导后各时间点在房水内的浓度均高于血清。IL-10在房水中于24h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.003),与相同时间点血清内的浓度相比差异亦有统计学意义(P=0.003)。IFN-γ于4h、24h在房水和血清中的表达差异有统计学意义(P=0.033、0.032)。各细胞因子在房水中的表达变化基本与炎症进程相符。结论细胞因子在眼内炎症发生过程中起着重要作用,网络调控将成为治疗方向。
- 许颖知卢弘陈巍杨培增李上王婧
- 关键词：前葡萄膜炎房水血清白细胞介素-1小鼠
- Toll样受体-4在内毒素诱导的葡萄膜炎中的表达及意义被引量：9
- 2008年
- 目的探讨Toll样受体-4(TLR4)在内毒素诱导的葡萄膜炎中的表达和意义。设计实验性研究。研究对象Wistar大鼠12只,随机分为模型组(n=6)和对照组(n=6)。方法模型组通过足底及腹腔注射霍乱弧菌内毒素诱导出葡萄膜炎,对照组注射磷酸盐缓冲液。注射后4h、10h、16h、24h裂隙灯观察眼前节反应。注射后24h通过免疫组化方法检测眼球冰冻切片及葡萄膜铺片中TLR4的表达。TLR4阳性判定标准:呈棕黄色颗粒定位于胞膜、胞浆。主要指标眼前节炎症反应程度、葡萄膜铺片中TLR4阳性表达的细胞数量。结果内毒素注射后4h虹膜血管扩张充血,16h前房可见纤维素渗出。模型组虹膜铺片内可见大量TLR4阳性表达细胞,位于虹膜基质层,对照组虹膜铺片内只见少量TLR4阳性表达细胞,模型组虹膜中阳性细胞数量高于对照组(P<0.05)。冰冻切片中虹膜内偶见少量TLR4表达。脉络膜和视网膜冰冻切片及铺片中均未见阳性细胞。结论内毒素诱导的葡萄膜炎中TLR4表达增高,提示TLR4可能在急性前葡萄膜炎的发生发展中具有一定作用。(眼科,2008,17:48-51)
- 卢弘陈巍赵丽
- 关键词：TOLL样受体-4葡萄膜炎动物模型
- HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者前房水细胞因子水平的研究被引量：1
- 2010年
- 目的通过分析HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者前房水中细胞因子的浓度,探讨急性前葡萄膜炎的发病机制。方法采用非随机对照临床观察型病例研究,选取2008年10月至2009年3月在我院眼科就诊的HLA-B27阳性前葡萄膜炎患者21例(21眼)为患病组,并选取同期住院行白内障手术的患者19例(19眼)为正常对照组。将所有入选病例通过酶联免疫技术测量前房水中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10的浓度,并进行组间比较。结果TNF-α在患病组患者前房水中的浓度平均为(29.1±13.9)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(19.8±7.2)pg.L-1,2组相比差异有统计学意义(P=0.011)。IFN-γ在患病组患者前房水中的浓度平均为(36.6±27.5)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(14.6±12.9)pg.L-1,2组相比差异有统计学意义(P=0.003)。白细胞介素-10在患病组患者前房水中的浓度平均为(2.4±2.7)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(3.3±3.9)pg.L-1,2组相比差异无统计学意义(P=0.400)。结论急性前葡萄膜炎患者前房水内TNF-α和IFN-γ的浓度明显升高,炎症病理过程是与Thl型细胞免疫应答所释放的炎症性细胞因子TNF-α、IFN-γ等密切相关。
- 杨硕卢弘陈巍
- 关键词：HLA-B27急性前葡萄膜炎干扰素-Γ白细胞介素-10
- HLA-B27相关前葡萄膜炎的研究进展被引量：2
- 2009年
- HLA-B27阳性前葡萄膜炎是前葡萄膜炎最常见的类型,患者多为青壮年,反复发作,常引起一些并发症,严重影响视力,并可伴有其他系统性疾病。但其发病机制目前仍不清楚,尚无特效的治疗方法。近年来,建立了一些前葡萄膜炎动物模型,如内毒素诱导的前葡萄膜炎和HLA-B27转基因动物模型,并进行了一系列的研究。一些新的治疗方法在临床及动物实验中也取得了很好的疗效。就HLA-B27相关前葡萄膜炎的发病机制、流行病学、动物模型及一些新的治疗方法进行综述。
- 胡小凤陈巍卢弘
- 关键词：HLA-B27前葡萄膜炎基因疗法转基因动物模型
- Toll样受体-4在葡萄膜炎中的表达和作用
- 2008年
- Toll样受体-4（TLR4）作为内毒素的识别受体在固有免疫与适应性免疫之间的桥梁作用越来越受到重视。葡萄膜炎发病中TLR4的作用不断被证实：TLR4基因突变的C3H／HeJ小鼠不能诱导出葡萄膜炎；正常人眼葡萄膜中有TLR4表达而且是有功能的；葡萄膜炎患者外周血中单核细胞TLR4功能下降。本文对TLR4在葡萄膜炎发病中的信号传导通路的进展及其在抗感染中的作用进行了综述。
- 卢弘陈巍张玮
- 关键词：TOLL样受体免疫应答葡萄膜炎
- TLR4-MyD88在大鼠急性前葡萄膜炎虹膜中的表达被引量：11
- 2010年
- 目的观察内毒素诱导的大鼠急性前葡萄膜炎(EIU)虹膜组织内Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)及核因子-κBp65(NF-κB p65)的表达。方法Wistar大鼠50只,随机分为5组,0、12、24、48、72h,每组10只,0h组为正常对照组,其余4组均足垫部注射霍乱弧菌内毒素脂多糖(LPS)200μg,建立EIU动物模型,每隔2h用裂隙灯观察大鼠眼前节炎症反应。通过铺片免疫组织化学染色,检测虹膜睫状体组织内TLR4、MyD88和NF-κBp65的表达,并对虹膜内TLR4+和MyD88+及NF-κBp65+细胞进行计数。结果注射后24～48h大鼠眼前段的炎症反应达到高峰,72h炎症反应逐渐缓解。组织病理学检查表明,虹膜睫状体组织的炎性细胞浸润在24～48h达到高峰,与临床反应结果相符。TLR4在模型鼠虹膜睫状体炎复合体中表达的免疫组织化学检测结果表明,0h组虹膜铺片内无阳性细胞,12h后可见细胞形态大多为类圆形的阳性细胞,48h达高峰,72h阳性细胞数开始减少,各组阳性细胞数总体差异有统计学意义(F=46.79,P<0.05)。MyD88和NF-κBp65的表达与TLR4的改变趋势相一致(F=54.37,P<0.05;F=85.32,P<0.05)。结论内毒素诱导的EIU虹膜内,TLR4及其下游信号传导分子的表达量发生改变,提示TLR4-MyD88依赖传导途径可能参与了EIU的发病。
- 李上卢弘胡小凤陈巍杨培增Aize Kijlstra许颖知王婧
- 关键词：葡萄膜炎MYD88P65
- 腹腔巨噬细胞核因子转位在小鼠内毒素诱导葡萄膜炎发病中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的观察野生型C3H/HeN小鼠和Toll样受体4(TLR4)基因缺陷型C3H/HeJ小鼠腹腔巨噬细胞在脂多糖(LPS)刺激下激活状态的差异,从体外途径探讨TLR4传导信号在前葡萄膜炎发病中的可能作用机制。设计实验研究。研究对象健康成年C3H/HeN和C3H/HeJ小鼠。方法常规提取两种小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,按处理因素不同随机分六组:C3H/HeN小鼠LPS组、正常对照组、抗TLR4单克隆抗体加LPS组、抗TLR4单克隆抗体组;C3H/HeJ小鼠LPS组、正常对照组。各组在不同处理后1h、3h、6h、12h、24h五个时间点通过免疫荧光组织化学染色进行观察。主要指标TLR4传导途径中关键分子TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)免疫荧光强度及表达位置差异。结果所有组TLR4均表达于细胞膜,MyD88表达于细胞质和细胞核。C3H/HeN小鼠LPS组和C3H/HeJ小鼠LPS组TLR4荧光强度比较,差异有统计学意义;余各组TLR4荧光强度两两比较,差异无统计学意义。C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞LPS组随LPS刺激时间的延长,各观察时间点MyD88荧光强度逐渐减弱,总体差异有统计学意义;余各组各时间点MyD88荧光强度无明显变化。C3H/HeN小鼠正常对照组、抗TLR4单克隆抗体组,C3H/HeJ小鼠正常对照组腹腔巨噬细胞各时间点NF-κB均表达于胞质,C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞LPS刺激1h后NF-κB表达于胞核,3h依旧表达于胞核,此后无法检测到NF-κB的表达。C3H/HeN小鼠抗TLR4单克隆抗体加LPS组、C3H/HeJ小鼠LPS组巨噬细胞经LPS刺激1h后NF-κB转移至胞膜,直至24h一直表达于胞膜。结论腹腔巨噬细胞TLR4传导途径中核因子的转位可能与前葡萄膜炎的发病有关,特异性阻断该途径或许为前葡萄膜炎的治疗提供新思路。
- 王婧胡小凤赵丽许卓再李上许颖知卢弘陈巍
- 关键词：TOLL样受体4核因子-ΚB巨噬细胞
