王婧
- 作品数：18 被引量：61H指数：6
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Toll样受体4对HLA-B27相关前葡萄膜炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子的影响被引量：1
- 2012年
- 目的通过对比正常人与HLA-B27相关前葡萄膜炎恢复期患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)受脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激及抗Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)抗体(HTA125)干预后分泌细胞因子的变化,探讨TLR4在HLA-B27相关前葡萄膜炎发病机制中的作用。方法选取HLA-B27阳性前葡萄膜炎恢复期患者10例,相同性别及年龄段的HLA-B27阴性正常人10例作为对照。抽取研究对象外周血分为以下5组体外培养PBMC:(1)正常人非LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的PBS进行培养;(2)正常人LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的LPS进行培养;(3)HLA-B27阳性患者非LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的PBS进行培养;(4)HLA-B27阳性患者LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的LPS进行培养;(5)HLA-B27阳性患者LPS+HTA125干预组:终浓度为5mg·L-1的HTA125预先干预PBMC 30 min后再加入1mg·L-1的LPS共同培养。分别于培养4h、8h、12h、24h后,利用ELISA法测定细胞培养上清液中的TNF-a、IL-10和(4)(5)组中IL-6的浓度。结果 LPS未刺激组,PBMC培养4h、8h、12h、24h后,HLA-B27阳性患者TNF-α浓度分别为(1329.46±155.09)ng·L-1、(1926.76±163.28)ng·L-1、(1424.61±141.63)ng·L-1、(526.98±112.29)ng·L-1,正常人分别为(562.83±106.45)ng·L-1、(839.57±73.98)ng·L-1、(559.60±88.48)ng·L-1、(200.81±51.39)ng·L-1,两组各时间点相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);HLA-B27阳性患者PBMC培养8h、12h、24h后,IL-10浓度分别为(145.51±26.91)ng·L-1、(259.16±32.71)ng·L-1、(435.98±134.54)ng·L-1,正常人分别为(63.57±17.28)ng·L-1、(123.21±15.73)ng·L-1、(247.82±32.10)ng·L-1,两组各时间点相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。LPS刺激后,正常人与HLA-B27阳性患者PBMC分泌TNF-α和IL-10水平在各时间点均比LPS刺激前明显升高,且HLA-B27阳性患者升高更明显。HLA-B27阳性患者PBMC在LPS刺激后与LPS+HTA125干预组相比,后者各时间点分泌TNF-α、
- 刘旭辉张孝生李中秋王婧张晓龙卢弘
- 关键词：脂多糖单个核细胞细胞因子TOLL样受体4
- 红芪多糖对HLA-B27相关前葡萄膜炎TNF-α和IL-10的影响被引量：8
- 2016年
- 目的探讨红芪多糖(HPS)对HLA-B27相关前葡萄膜炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的影响。方法选择10名处于急性炎症期的HLA-B27相关前葡萄膜炎患者,常规药物治疗4周,在炎症缓解期,抽取他们的外周血,经过分离和培养得到单个核细胞。将单个核细胞平均分为4组,分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、细菌脂多糖(LPS)、LPS+HPS、HPS处理各组单个核细胞,PBS处理组为对照组,LPS的终末浓度为1 mg·L-1,HPS的终末浓度为200 mg·L-1。在各组单个核细胞接受处理4 h、8 h、12 h、24 h后收集细胞培养上清液,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测其中TNF-α和IL-10的含量。结果患者单个核细胞受LPS处理后细胞培养上清液中各时点的TNF-α和IL-10含量均明显高于PBS处理组(P<0.05);HPS+LPS处理组细胞培养上清液中各时点的TNF-α含量以及前2个时点的IL-10含量高于LPS处理组(P<0.05);HPS处理组细胞培养上清液中的TNF-α和IL-10的含量与PBS处理组比较无明显差异(P>0.05)。结论 HLA-B27相关前葡萄膜炎炎症缓解期患者外周血单个核细胞进行的体外实验中,红芪多糖促进LPS刺激后的单个核细胞分泌TNF-α和IL-10,提示红芪多糖作为免疫调节剂参与炎症反应的过程。
- 许卓再于晋懿毛毳王婧余烁卢弘
- 关键词：红芪多糖外周血单个核细胞TNF-ΑIL-10
- 慢性阻塞性肺疾病对原发性高血压的影响及机制被引量：8
- 2008年
- 慢性阻塞性肺疾病（COPD）和原发性高血压均为常见病和多发病，但目前对于两者之间关系的研究较少。COPD患者伴发高血压不仅对COPD的治疗不利，而且血压也往往较难得到有效控制。现将COPD对原发性高血压的影响及机制综述如下。
- 王婧高明明
- 关键词：肺疾病慢性阻塞性高血压肾素-血管紧张素系统
- 大鼠的两种干细胞向光感受器细胞和视网膜色素上皮细胞分化的实验研究被引量：2
- 2016年
- 目的研究大鼠的骨髓间充质干细胞（MSCs）和脂肪干细胞（ADSCs）体外向光感受器细胞和RPE细胞分化的可能性,为临床治疗视网膜病变提供物质基础。方法经贴壁筛选法连续传代纯化细胞,流式细胞仪检测CD45、CD90、CD49d、CD106鉴定MSCs和ADSCs。用视网膜细胞提取液、EGF、牛磺酸和视黄酸分别诱导MSCs和ADSCs;流式细胞仪定量检测细胞的视紫红质、CK和S-100的表达,计算诱导效应。结果传代纯化MSCs和ADSCs,传1代至传5代,MSCs中CD45阳性率是1.8%-7.5%,CD90是83.8%-95.7%,CD49d是6.6%-24.8%,CD106是15.7%-32.2%;ADSCs中CD45阳性率是0.8%-9.3%,CD90是84.7%-94.8%,CD49d是16.8%-31.0%,CD106是8.3%-22.2%。MSCs和ADSCs均为CD45阴性和CD90阳性。各代MSCs和ADSCs比较,MSCs低表达CD49d,高表达CD106;而ADSCs高表达CD49d,低表达CD106。不同的诱导方法,MSCs的视紫红质的诱导效应是55.9%-70.0%,CK的诱导效应是49.5%-72.0%,S-100的诱导效应是25.4%-34.0%;ADSCs的视紫红质的诱导效应是19.6%-31.1%,CK的诱导效应是31.0%-79.3%,S-100的诱导效应是27.3%-50.7%。结论 MSCs和ADSCs均具有向光感受器细胞和RPE细胞分化的潜能,可能成为干细胞移植治疗的来源。
- 许卓再王婧毛毳余烁卢弘董方田
- 关键词：骨髓间充质干细胞脂肪干细胞分化光感受器细胞视网膜色素上皮细胞
- 红芪多糖干预内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎的机制被引量：7
- 2019年
- 目的探讨红芪多糖(hedysarum polybotrys saccharide,HPS)在内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎发病中的作用及对Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4)信号转导通路中关键分子肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)及TIR功能区接头蛋白诱导的干扰素β(TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-β,TRIF)表达的影响。方法选用SPF级健康成年Wistar大鼠40只,随机分为内毒素诱导的葡萄膜炎(endotoxin induced uveitis,EIU)模型组、HPS组、HPS+内毒素组、正常对照组(normal control,NC)组,每组10只。EIU模型组大鼠采用皮下注射1 mg·kg-1内毒素的方法建立大鼠急性前葡萄膜炎动物模型。HPS+内毒素组在内毒素注射前1 h给予腹腔注射HPS 400 mg·kg^-1。HPS组大鼠只注射HPS 400 mg·kg^-1。每2 h用裂隙灯观察大鼠眼前节炎症反应,注射后的0 h、6 h、12 h、18 h、24 h对各组眼部临床炎症反应进行评分。注射后24 h组织病理学检查炎症反应水平。RT-PCR检测核因子-κB、TRAF6及TRIF mRNA的表达。结果 NC组大鼠24 h内眼前节未见炎症反应。注射后24 h,EIU模型组可见虹膜血管扩张明显,瞳孔区大量白色渗出,HPS组仅可见虹膜血管扩张,未见其他眼部炎症反应,HPS+内毒素组大鼠可见虹膜血管扩张和瞳孔缘少量渗出。比较不同组间的大鼠眼部临床炎症反应评分可见,NC组与EIU模型组、HPS+内毒素组、HPS组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.001);EIU模型组与HPS+内毒素组、HPS组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05);HPS+内毒素组与HPS组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。RT-PCR结果显示,HPS可降低核因子-κB mRNA和TRAF6 mRNA的表达(P<0.001),HPS对TRIF的表达无明显影响(P=0.236)。结论 HPS可能通过抑制TRAF6核酸的表达缓解EIU的炎症反应,HPS对TRIF的表达无明显影响。
- 王婧刘新丽吴慧茹贾辉钰卢弘
- 关键词：红芪多糖肿瘤坏死因子受体相关因子6
- 人类白细胞抗原-B27相关性前葡萄膜炎患者差异基因的表达特征被引量：4
- 2013年
- 目的研究人类白细胞抗原（HLA）-B27相关性前葡萄膜炎患者外周血单核细胞炎症通路差异基因的表达特征。方法实验研究。抽取3例HLA-B27阳性前葡萄膜炎患者及2例健康对照者外周血，分离后获得的单核细胞经含霍乱弧菌的脂多糖刺激后提取RNA，使用基因表达谱芯片进行检测，实时荧光定量PCR验证芯片结果，并通过基因功能分析、KEGG数据库等生物信息分析技术对筛选出的差异表达的基因进行分析。结果HLA．B27阳性前葡萄膜炎患者的外周血单核细胞经脂多糖刺激后出现了1105个表达水平上调超过2倍的基因；而健康对照组只有25个。Geneontology聚类分析及信号转导通路分析结果显示，上调的基因主要参与蛋白转运、蛋白折叠，在炎症反应中起重要作用。脂多糖与Toll样受体4结合后激活了Toll样受体转导通路及霍乱弧菌感染相关通路，是位于整个炎症反应网络中较上游的转导通路。其中PIK3CA、PIK3CB、AKT3及MAPKl基因可能是炎症反应中较关键的基因。结论HLA-B27阳性前葡萄膜炎患者及健康对照者的外周血单核细胞经脂多糖刺激后差异表达的基因有显著的差异。Toll样受体转导通路在致病中起重要作用。
- 胡小凤卢弘王婧张孝生张晓龙刘旭辉许卓再胡俊敏卢清君
- 关键词：HLA-B27抗原脂多糖类TOLL样受体4
- 玻璃体注射康柏西普对新生血管性老年性黄斑变性患眼脉络膜厚度的短期影响
- 2023年
- 目的评估玻璃体注射康柏西普对新生血管性老年性黄斑变性患眼的眼压、视网膜厚度和脉络膜厚度的短期影响。设计前瞻性队列研究。研究对象收集2020年10月至2021年5月期间由同一医生行玻璃体注射0.05 ml康柏西普治疗的新生血管性老年性黄斑变性(nAMD)患者42例。方法所有受试者都进行一般眼科检查,使用IOL Master测量术前眼轴。观察术前1小时内、术后1小时、24小时,中心子区厚度(CFT)、视网膜神经纤维层(RNFL)厚度、中心凹下脉络膜厚度(SFCT)和旁中心凹脉络膜厚度(PFCT)的变化,并通过多元线性回归分析术前1小时内SFCT和PFCT的相关因素。主要指标CFT、RNFL厚度、SFCT、PFCT。结果注药前患者IOP为(15.8±3.6)mmHg,注药后1小时为(17.8±4.3)mmHg,注药后24小时为(13.8±2.6)mmHg,注药后IOP先显著升高后显著降低(F=5.43,P=0.006);注药前患者PFCT为(244.2±78.8)μm,注药后1小时为(197.3±84.1)μm,注药后24小时为(307.9±74.2)μm,注药后PFCT先显著降低后显著升高(F=3.48,P=0.04)。注药前、注药后1小时及注药后24小时,患者CFT(F=0.19,P=0.83)、RNFL(F=0.45,P=0.64)和SFCT(F=1.53,P=0.23)均无明显差异。SFCT[B(95%CI):-7.77(-12.25,-3.29),P=0.002]和PFCT[B(95%CI):-6.87(-10.51,-3.23),P=0.005]均与年龄负相关。结论玻璃体注射康柏西普对脉络膜厚度在短期内即有影响,可能导致短暂的脉络膜缺血,术后24小时即可恢复。
- 佘重阳焦剑王婧卢弘华文
- 关键词：脉络膜厚度
- 内毒素耐受对内毒素诱导的葡萄膜炎炎症程度及虹膜睫状体中PI3K/AKT 信号通路的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨低剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预处理对内毒素诱导葡萄膜炎(endotoxin induced uveitis,EIU)动物模型炎症程度的影响,并分析虹膜睫状体组织中PI3K/AKT表达水平的改变。设计实验研究。研究对象8-10周龄健康雄性Wistar大鼠90只。方法随机分为正常对照(normal control,NC)组、内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)组和内毒素诱导的葡萄膜炎(EIU)组,每组30只。通过皮下注射1 mg/kg LPS建立内毒素诱导的葡萄膜炎动物模型。ET组:EIU模型诱导之前连续5日腹腔注射0.1 mg/kg LPS诱导内毒素耐受。EIU组及NC组连续5日注射等体积生理盐水。第6天相同时间ET组及EIU组接受200μg LPS皮下注射,NC组接受等体积生理盐水注射。注射后24小时,在裂隙灯显微镜下进行临床评分。眼球摘除行HE染色组织病理学观察。ELISA测量房水TNF-α浓度,蛋白印迹法检测虹膜睫状体PI3K和AKT蛋白的表达。主要指标眼前节炎症反应评分,虹膜切片HE染色观察,房水TNF-α浓度及虹膜睫状体PI3K/AKT蛋白表达。结果临床评分ET组、EIU组、NC组分别为(1.65±0.49)、(6.65±0.59)、(0.20±0.41)分(χ~2=53.261,P=0.001);组织病理评分ET组、EIU组、NC组分别为(0.6±0.5)、(3.8±0.4)、(0.2±0.4)分(χ~2=46.137,P=0.001)。房水TNF-α浓度ET组、EIU组、NC组分别为(10.58±0.67)、(30.96±1.55)、(10.32±0.61)pg/ml(F=260.08,P=0.03)。蛋白印迹法显示虹膜睫状体组织中PI3K和AKT的蛋白水平ET组、EIU组、NC组分别为(0.197±0.019)、(0.539±0.017)、(0.453±0.014)(F=210.66,P=0.002)和(0.234±0.019)、(0.553±0.013)、(0.428±0.002)(F=275.35,P=0.001)。结论内毒素耐受可以降低大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎的炎症反应程度,下调虹膜睫状体组织中PI3K和AKT的表达,揭示内毒素耐受对EIU的保护机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。
- 王婧张楠余烁刘新丽卢弘
- 关键词：内毒素耐受PI3K/AKT
- 细胞因子在内毒素诱导的前葡萄膜炎小鼠房水和血清中的表达被引量：8
- 2010年
- 目的通过分析内毒素诱导的C3H/HeN小鼠的前葡萄膜炎模型中房水和血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的浓度,探讨急性前葡萄膜炎可能的发病机制。方法取180只C3H/HeN小鼠,分为对照组(n=30)和实验组(n=150),将霍乱弧菌内毒素(18001株,古典生物型,小川血清型)溶于无菌生理盐水中,终浓度为2×103g.L-1,实验组小鼠足底注射100μL制作内毒素诱导的前葡萄膜炎模型;对照组注射等量生理盐水。于诱导后4h、8h、16h、24h、48h断颈处死实验组小鼠(各30只),以10只小鼠为一单样本,微量进样器抽取前房水;眼球摘除后微量进样器于眼窝处取外周血。对照组于注射生理盐水后即刻处死小鼠,样本收集方法同实验组。微球流式技术检测小鼠房水及血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10、IFN-γ的浓度。结果所有实验组小鼠均成功诱导出急性前葡萄膜炎。在小鼠房水中,TNF-α于4h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.002);4h、8h、16h及24h时,在房水和血清内的浓度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。IL-1、IL-6在血清中均于16h达峰值,与对照组相比差异均有统计学(P=0.001、0.000);且诱导后各时间点在房水内的浓度均高于血清。IL-10在房水中于24h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.003),与相同时间点血清内的浓度相比差异亦有统计学意义(P=0.003)。IFN-γ于4h、24h在房水和血清中的表达差异有统计学意义(P=0.033、0.032)。各细胞因子在房水中的表达变化基本与炎症进程相符。结论细胞因子在眼内炎症发生过程中起着重要作用,网络调控将成为治疗方向。
- 许颖知卢弘陈巍杨培增李上王婧
- 关键词：前葡萄膜炎房水血清白细胞介素-1小鼠
- 大黄多糖对内毒素诱导急性前葡萄膜炎TLR4/NF-κB传导通路干预作用的实验研究被引量：8
- 2013年
- 目的通过观察大黄多糖对内毒素(LPS)诱导的急性前葡萄膜炎TLR4通路的影响,揭示大黄多糖对急性前葡萄膜炎TLR4通路的分子干预机制,为TLR4通路介导的炎症治疗提供新的思路和途径。设计实验研究。研究对象野生型Wistar大鼠、RAW264.7巨噬细胞系。方法野生型Wistar大鼠15只,随机分为3组,正常对照组、模型组(LPS组)、大黄多糖处理组,每组5只,大黄多糖处理组腹腔注射400 mg/kg大黄多糖,对照组和模型组注射等量PBS。各组腹腔注射2小时后模型组和大黄多糖处理组每只大鼠足底注射0.1 ml霍乱弧菌内毒素LPS,对照组注射等体积的PBS,24小时后裂隙灯下观察大鼠眼前节炎症反应并按炎症分级评分,RT-PCR观察大鼠虹膜TLR4表达的变化。RAW264.7巨噬细胞系进行体外培养,用大黄多糖、LPS分别刺激,通过Western blot、RT-PCR、ELISA、免疫荧光技术观察两者对巨噬细胞TLR4及相关分子的影响。主要指标大鼠眼前节炎症反应程度、巨噬细胞TLR4表达变化。结果裂隙灯下观察,LPS组相比于正常对照组虹膜充血严重,前房闪辉及瞳孔区纤维素渗出均较多;大黄多糖干预组大鼠仅轻度虹膜充血,瞳孔缘无明显渗出膜,瞳孔无缩小。RT-PCR示大黄多糖干预组TLR4 mRNA表达较LPS组明显降低。Western blot和RT-PCR结果显示大黄多糖在体外分别能引起巨噬细胞TLR4、髓样分化蛋白-88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)p65蛋白和mRNA表达量的增加;ELISA显示大黄多糖100μg/ml作用于Raw264.7细胞24小时后能引起上清液炎症因子IL-17,IL-10,TNF-α,INF-γ,IL-1β的表达增高;免疫荧光显示大黄多糖能引起培养细胞的激活、TLR4复合物及NF-κB p65表达。结论大黄多糖对内毒素诱导的大鼠急性前葡萄膜炎模型具有明显的抑制作用。体外实验显示大黄多糖同LPS一样,在体外具有激活巨噬细胞TLR4及其下游MyD88和NF-κB、调节细胞因子表达的作用。
- 张晓龙王婧许卓再李中秋卢弘
- 关键词：大黄多糖葡萄膜炎TOLL样受体
