李上
- 作品数：11 被引量：27H指数：4
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- LPS-TOLL样受体-4在急性前葡萄膜炎发病机制中的研究进展被引量：4
- 2009年
- 急性前葡萄膜炎,特别是与HLA-B27相关的急性前葡萄膜炎是常见的非感染性葡萄膜炎。临床和实验已证明一些G-细菌如克雷白杆菌、沙门菌、志贺菌和耶尔森菌可能诱发此类葡萄膜炎。G-细菌细胞壁的脂多糖是第一个被发现的Toll样受体-4(Toll-like receptor4,TLR-4)的外源性配体,TLR-4是人Toll样受体蛋白,属于I型跨膜蛋白,是细菌脂多糖介导的信号跨膜转导的主要受体,对于天然免疫系统识别病原微生物有至关重要的作用。近些年随着眼科学的发展,对其在人眼免疫学方面的研究逐渐增多,本文着重综述了TLR-4的在眼部的转导路径及其在急性前葡萄膜炎中研究进展。
- 李上卢弘
- 关键词：脂多糖TOLL样受体-4急性前葡萄膜炎
- CD14,MyD88和NF-kB在内毒素诱导的葡萄膜炎虹膜组织中表达
- 李上卢弘
- 白内障术中突发高眼压的应急处理措施被引量：2
- 2010年
- 目的探讨白内障超声乳化术、小切口白内障非超声乳化术中突发高眼压应急处理措施。方法选取白内障超声乳化术、小切口白内障非超声乳化术术中突发高眼压患者共35例(35眼),采用睫状体扁平部玻璃体水囊抽吸术或前部玻璃体切割术等应急措施,比较术前与应急处理后视力、眼压、前房深度及处理后并发症情况。结果32眼(91.4%)应急处理后最佳矫正视力高于术前。术前平均眼压为(18.37±2.13)mmHg(1kPa=7.5mmHg),应急处理后平均眼压为(17.40±1.89)mmHg,二者比较差异有统计学意义(P=0.02);术前平均前房深度为(2.93±0.50)mm,应急处理后平均前房深度(3.13±0.56)mm,二者比较差异有统计学意义(P=0.04)。应急处理后并发症包括玻璃体少量积血1眼,脉络膜脱离1眼,视网膜出血2眼,未发现高眼压、浅前房等。结论睫状体扁平部玻璃体水囊抽吸术或前部玻璃体切割术是控制白内障术中突发高眼压的积极有效的措施。
- 李月华卢弘张孝生律学彦许卓再李上
- 关键词：白内障瞳孔阻滞高眼压
- TLR4传导途径在葡萄膜炎发病机制中的基础研究
- 卢弘李上许颖知王菁胡小凤陈巍
- TLR4-MyD88在大鼠急性前葡萄膜炎虹膜中的表达被引量：11
- 2010年
- 目的观察内毒素诱导的大鼠急性前葡萄膜炎(EIU)虹膜组织内Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)及核因子-κBp65(NF-κB p65)的表达。方法Wistar大鼠50只,随机分为5组,0、12、24、48、72h,每组10只,0h组为正常对照组,其余4组均足垫部注射霍乱弧菌内毒素脂多糖(LPS)200μg,建立EIU动物模型,每隔2h用裂隙灯观察大鼠眼前节炎症反应。通过铺片免疫组织化学染色,检测虹膜睫状体组织内TLR4、MyD88和NF-κBp65的表达,并对虹膜内TLR4+和MyD88+及NF-κBp65+细胞进行计数。结果注射后24～48h大鼠眼前段的炎症反应达到高峰,72h炎症反应逐渐缓解。组织病理学检查表明,虹膜睫状体组织的炎性细胞浸润在24～48h达到高峰,与临床反应结果相符。TLR4在模型鼠虹膜睫状体炎复合体中表达的免疫组织化学检测结果表明,0h组虹膜铺片内无阳性细胞,12h后可见细胞形态大多为类圆形的阳性细胞,48h达高峰,72h阳性细胞数开始减少,各组阳性细胞数总体差异有统计学意义(F=46.79,P<0.05)。MyD88和NF-κBp65的表达与TLR4的改变趋势相一致(F=54.37,P<0.05;F=85.32,P<0.05)。结论内毒素诱导的EIU虹膜内,TLR4及其下游信号传导分子的表达量发生改变,提示TLR4-MyD88依赖传导途径可能参与了EIU的发病。
- 李上卢弘胡小凤陈巍杨培增Aize Kijlstra许颖知王婧
- 关键词：葡萄膜炎MYD88P65
- 腹腔巨噬细胞核因子转位在小鼠内毒素诱导葡萄膜炎发病中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的观察野生型C3H/HeN小鼠和Toll样受体4(TLR4)基因缺陷型C3H/HeJ小鼠腹腔巨噬细胞在脂多糖(LPS)刺激下激活状态的差异,从体外途径探讨TLR4传导信号在前葡萄膜炎发病中的可能作用机制。设计实验研究。研究对象健康成年C3H/HeN和C3H/HeJ小鼠。方法常规提取两种小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,按处理因素不同随机分六组:C3H/HeN小鼠LPS组、正常对照组、抗TLR4单克隆抗体加LPS组、抗TLR4单克隆抗体组;C3H/HeJ小鼠LPS组、正常对照组。各组在不同处理后1h、3h、6h、12h、24h五个时间点通过免疫荧光组织化学染色进行观察。主要指标TLR4传导途径中关键分子TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)免疫荧光强度及表达位置差异。结果所有组TLR4均表达于细胞膜,MyD88表达于细胞质和细胞核。C3H/HeN小鼠LPS组和C3H/HeJ小鼠LPS组TLR4荧光强度比较,差异有统计学意义;余各组TLR4荧光强度两两比较,差异无统计学意义。C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞LPS组随LPS刺激时间的延长,各观察时间点MyD88荧光强度逐渐减弱,总体差异有统计学意义;余各组各时间点MyD88荧光强度无明显变化。C3H/HeN小鼠正常对照组、抗TLR4单克隆抗体组,C3H/HeJ小鼠正常对照组腹腔巨噬细胞各时间点NF-κB均表达于胞质,C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞LPS刺激1h后NF-κB表达于胞核,3h依旧表达于胞核,此后无法检测到NF-κB的表达。C3H/HeN小鼠抗TLR4单克隆抗体加LPS组、C3H/HeJ小鼠LPS组巨噬细胞经LPS刺激1h后NF-κB转移至胞膜,直至24h一直表达于胞膜。结论腹腔巨噬细胞TLR4传导途径中核因子的转位可能与前葡萄膜炎的发病有关,特异性阻断该途径或许为前葡萄膜炎的治疗提供新思路。
- 王婧胡小凤赵丽许卓再李上许颖知卢弘陈巍
- 关键词：TOLL样受体4核因子-ΚB巨噬细胞
- TLR-4和CD14在急性前葡萄膜炎小鼠虹膜中的表达被引量：6
- 2010年
- 目的观察内毒素诱导的小鼠急性前葡萄膜炎模型中虹膜Toll样受体-4(Toll-like receptor-4,TLR-4)和CD14的表达。方法C3H/HeN(野生型)和C3H/HeJ(TLR-4基因缺陷型)小鼠足底注射霍乱弧菌内毒素,建立急性前葡萄膜炎动物模型,注射后每隔2h用裂隙灯进行眼前节观察,并做组织病理学检查。用Western blotting及免疫组织化学法检测小鼠虹膜中TLR-4及CD14蛋白的表达。结果C3H/HeN小鼠在内毒素注射后4～6h,小鼠结膜囊内出现大量白色分泌物,12～18h瞳孔区偶见白色渗出,22～24h可见虹膜后粘连及渗出物,36～48h前房内未见炎症消退;C3H/HeJ小鼠未见眼前节炎症反应。通过Western boltting发现正常C3H/HeN小鼠虹膜内有TLR-4蛋白的表达,注射内毒素24h后TLR-4的表达量显著增高,与12h相比差异有显著统计学意义(P=0.009)。免疫组织化学显示在内毒素诱导后24h,TLR-4与CD14在急性前葡萄膜炎模型虹膜组织中大量表达,而在C3H/HeJ小鼠中未见TLR-4蛋白的表达。结论TLR-4在内毒素诱导的C3H/HeJ(TLR-4基因缺陷)小鼠中未见表达,而在C3H/HeN(野生型)急性前葡萄膜炎动物模型虹膜组织中大量表达,TLR-4可能在急性前葡萄膜炎发病环节中发挥着重要作用。
- 李上卢弘陈巍胡小风杨培增Kijlstra A
- 关键词：TOLL样受体-4CD14急性前葡萄膜炎
- 内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎的巨噬细胞中Toll样受体4的表达被引量：3
- 2010年
- 目的探讨在内毒素诱导的Wistar大鼠葡萄膜炎中Toll样受体4（TLR4）阳性细胞与虹膜组织中巨噬细胞的动态变化和分布。方法实验研究。Wistar大鼠50只，用随机数字法随机分为5组，每组10只，分别为正常对照（0h）组、6h组、12h组、24h组及48h组。除0h组外其余各组均足垫部注射霍乱弧菌内毒素200μg，注射后于裂隙灯显微镜下观察双眼前节炎症反应变化。按实验分组于0．6、12、24、48h处死大鼠。取虹膜-睫状体及脉络膜组织。通过葡萄膜铺片免疫组织化学方法检测TLR4和巨噬细胞的标记CD163的表达。人工计数虹膜中TLR4^＋与CDl63^＋的细胞并计算细胞密度，计算圆形和多形性的CD163^＋细胞占所有CD163^＋细胞的百分比。进一步采用免疫荧光双标记检测TLR4和CD163共表达的情况。通过单因素方差分析分别对大鼠虹膜内阳性细胞密度以及圆形、多形性CD163^＋细胞的百分比进行统计学检验。结果正常大鼠虹膜睫状体组织不表达TLR4。6h组有2只大鼠虹膜内可见少量TLR4^＋细胞，12～48h组所有大鼠虹膜内TLR4^＋细胞明显增多（F=167．2，P〈0．001），虹膜内TLR4^＋细胞密度分别为（506．1±39．5）个／mm^2（12h组）、（492．3±54．5）＋／mm^2（24h组）及（663．8±150．2）个／mm^2（48h组）。在注射LPS后12—48h期间TLR4^＋细胞形态无明显变化。0—48h组大鼠虹膜内均有CD163^＋细胞，0h组圆形和多形性CD163^＋细胞百分比为13％，12～48h组其百分比约为80％，且圆形细胞主要位于虹膜基质层。免疫荧光双标记可见TLR4和CD163的共表达，TLR4位于细胞膜，CD163位于细胞质。5组大鼠脉络膜内均未见TLR4表达。结论内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎中虹膜内TLR4表达增高，部分虹膜固有巨噬细胞表达TLR4。TLR4可能在葡萄膜炎的发生发展中起一定作用。
- 陈巍胡小凤赵丽李上卢弘
- 关键词：脂多糖类葡萄膜炎TOLL样受体4
- 细胞因子在内毒素诱导的前葡萄膜炎小鼠房水和血清中的表达被引量：8
- 2010年
- 目的通过分析内毒素诱导的C3H/HeN小鼠的前葡萄膜炎模型中房水和血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的浓度,探讨急性前葡萄膜炎可能的发病机制。方法取180只C3H/HeN小鼠,分为对照组(n=30)和实验组(n=150),将霍乱弧菌内毒素(18001株,古典生物型,小川血清型)溶于无菌生理盐水中,终浓度为2×103g.L-1,实验组小鼠足底注射100μL制作内毒素诱导的前葡萄膜炎模型;对照组注射等量生理盐水。于诱导后4h、8h、16h、24h、48h断颈处死实验组小鼠(各30只),以10只小鼠为一单样本,微量进样器抽取前房水;眼球摘除后微量进样器于眼窝处取外周血。对照组于注射生理盐水后即刻处死小鼠,样本收集方法同实验组。微球流式技术检测小鼠房水及血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10、IFN-γ的浓度。结果所有实验组小鼠均成功诱导出急性前葡萄膜炎。在小鼠房水中,TNF-α于4h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.002);4h、8h、16h及24h时,在房水和血清内的浓度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。IL-1、IL-6在血清中均于16h达峰值,与对照组相比差异均有统计学(P=0.001、0.000);且诱导后各时间点在房水内的浓度均高于血清。IL-10在房水中于24h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.003),与相同时间点血清内的浓度相比差异亦有统计学意义(P=0.003)。IFN-γ于4h、24h在房水和血清中的表达差异有统计学意义(P=0.033、0.032)。各细胞因子在房水中的表达变化基本与炎症进程相符。结论细胞因子在眼内炎症发生过程中起着重要作用,网络调控将成为治疗方向。
- 许颖知卢弘陈巍杨培增李上王婧
- 关键词：前葡萄膜炎房水血清白细胞介素-1小鼠
- TLR-4和CD14在急性前葡萄膜炎小鼠虹膜中的表达
- 李上
