彭娟
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 供职机构：南方医科大学生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人巨细胞病毒部分抗原基因的克隆及表达被引量：3
- 2007年
- 目的克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)特异性强的抗原决定簇基因,制备特异性抗原。方法从感染HCMV的细胞上清液中提取病毒基因组DNA,用PCR扩增HCMVpp150(ppUL32)、gp52(UL44)、pp65(ppUL83)、ppUL80a蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA序列,将其克隆至pMD-18T载体并测序,然后克隆至表达载体pGEX-4T-1诱导表达,采用免疫印迹法(Western blotting)检测表达产物的抗原性。结果经序列测定各基因片段序列正确,并在pGEX-4T-1表达载体中得到了高效表达,表达的融合蛋白经Western blotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能够与HCMVIgM阳性血清发生特异性反应。结论通过基因工程技术可以有效地获取纯度较高、特异性强的HCMV抗原,为HCMV感染者的早期诊断提供检测用抗原。
- 姜永玮吴英松徐伟文陈跃瑜彭娟李明
- 关键词：人巨细胞病毒IGMPCR
- 降钙素原的克隆、表达及多抗制备被引量：2
- 2007年
- 目的合成降钙素原的全长基因,表达出降钙素原的融合蛋白并制备多抗,为降钙素原(PCT)的功能研究及单抗制备提供有力的实验基础。方法采用多引物人工一步合成基因技术合成降钙素原的全长基因,克隆至原核表达载体pGEX-4T-1表达出重组蛋白,将初步纯化的蛋白免疫小鼠制备多抗并进行Western blot鉴定。结果成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,Western blot证实所制备的PCT多抗可与所获得的融合蛋白和病人血清发生特异性反应。结论成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,为明确降钙素原来源和病理生理作用的研究奠定了基础,以及为制备其单克隆抗体提供实验材料。
- 陈跃瑜吴英松徐伟文王穗海姜永玮彭娟李明
- 关键词：降钙素原融合蛋白克隆
- 液体芯片技术定量测定人体血清CEA、AFP、NSE和tPSA被引量：5
- 2010年
- 目的应用液体芯片技术,联合定量测定人体血清癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和前列腺特异性抗原(tPSA),并对其临床应用进行评价。方法制备交联微球以及生物素标记抗体,利用双抗体夹心法对60个血清样本进行测定,并将其结果与化学发光免疫分析法(CLIA)作比较。结果同时检测CEA、AFP、tPSA、NSE的线性范围分别为0.078～200 ng/mL、0.030～30.3 ng/mL、0.007～7.5 ng/mL、0.146～75 ng/mL;最低检测限为26.0 pg/mL、19.7 pg/mL、4.9 pg/mL、73.2 pg/mL;批内精密度CV<9.0%,批间精密度CV<13.2%;检测结果与CLIA测值的相关系数r分别为0.986、0.979、0.964、0.958(P<0.001)。结论液体芯片技术是一种具有极大优势的新型检测技术。该技术打破传统测定技术每次只能测定一个指标的限制,并且具有高通量、高灵敏度、检测时间短、样本用量少等特点。
- 梁惠仪彭娟李明吴英松
- 关键词：液相芯片技术
- 液相芯片技术定量检测人血清CEA、AFP和NSE被引量：10
- 2007年
- 目的建立利用液相芯片技术定量检测人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和神经原特异性烯醇化酶(NSE)的反应模式,并对该方法各项指标进行评价。方法制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗夹心法检测临床血清标本。结果同时检测CEA、AFP和NSE时的线性范围分别为0.078～200ng/ml、0.025～25U/ml、0.146～75ng/ml,最低检测限分别为39.1pg/ml、0.016U/ml、0.073ng/ml,分析内精密度<10%,分析间精密度<15%。检测CEA、AFP、NSE的灵敏度分别为97.2%、100%、93.5%,特异度分别为96.4%、97.7%、97.0%,准确度分别为96.9%、98.4%、95.3%。检测结果与化学发光免疫分析法(CLIA)呈显著的等级相关关系,而且仅需1!l标本,3h就可以完成检测。结论液相芯片技术具有可联合检测多项指标、高通量、线性范围宽、灵敏度高、重复性好和节省样品和时间等优点,具有极大的临床应用潜力。
- 彭娟陈纬吴英松李妙艳李明
- 关键词：液相芯片
