张明富
- 作品数:4 被引量:19H指数:2
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 牛源化脓隐秘杆菌cbpA基因的克隆及原核表达被引量:1
- 2013年
- 为研究化脓隐秘杆菌(A.pyogenes)CbpA蛋白的反应原性,本研究以A.pyogenes Hlj1005株为模板采用PCR方法扩增cbpA基因,并构建重组表达质粒pET-cbpA,将其转化至大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE53)plysS中,经IPTG诱导,用SDS-PAGE及western blot检测目的蛋白的表达情况及其反应原性。SDS-PAGE分析表明获得了约120 ku的蛋白。Western blot检测表明,CbpA蛋白可以与A.pyogenes阳性血清发生特异性反应,表明其有良好的反应原性。
- 张明富郭永丽刘晓民徐凝张文龙王君伟
- 关键词:化脓隐秘杆菌反应原性
- 牛化脓隐秘杆菌的分离及其主要毒力基因的PCR鉴定被引量:9
- 2013年
- 从2009-2012年多个奶牛场送检的5份以奶牛化脓性炎症为特征的病料中分离出5株细菌,根据其革兰氏染色的形态特征、培养特性、生化特性以及16SrRNA基因序列的BLAST分析,确定分离菌为化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes),并对分离菌的主要毒力因子基因进行了PCR鉴定和动物试验。结果显示,5株分离菌的16SrRNA基因序列与GenBank中收录的11株牛源化脓隐秘杆菌16SrRNA基因序列的同源性为99%以上。HLJ-1005株分离菌基因组中缺失胶原结合蛋白(CbpA)基因,但包含溶血素(PLO)基因、神经氨酸酶H(NanH)基因和神经氨酸酶P(NanP)基因,且HLJ-1005株分离菌的致病力明显弱于其他4株分离菌。证实,化脓隐秘杆菌的致病力与cbpA基因和nanP基因的存在相关。
- 徐凝刘琰张明富张文龙王君伟
- 关键词:化脓隐秘杆菌RRNA基因毒力基因
- 牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定及其PCR检测方法的建立
- 化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogene)是一种形态呈杆状的革兰氏阳性菌,在动物机体免疫力低下时,能够条件性的引起多种动物的化脓性感染,特别是黏膜组织感染;继而继发多种疾病,如奶牛乳房炎、牛子宫炎、肾...
- 张明富
- 关键词:毒力因子
- 牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定及其PCR检测方法的建立被引量:9
- 2012年
- 为分离鉴定牛源化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)并建立其PCR检测方法,本研究从某规模化奶牛场患牛肺组织中分离出两株细菌,根据其形态特征、培养特性及生化特性,结合16S rRNA分析确定分离菌为A.pyogenes。对小鼠致病性试验显示纯培养物对小鼠致死率较高,药敏试验表明分离菌仅对少数种类抗生素如头孢唑啉、氧氟沙星、阿奇霉素等敏感。本研究同时建立了快速检测A.pyogenes溶血素(PLO)基因的PCR方法,敏感性试验显示最低检出菌数为9.2×103cfu/mL,特异性试验表明与其他细菌如布鲁氏菌、大肠杆菌等无交叉反应,通过对已知临床样本检测评估显示该方法适用于临床感染样品的检测。
- 张明富刘晓民孟祥莉徐凝张文龙王君伟
- 关键词:化脓隐秘杆菌PCR