刘晓民 作品数:7 被引量:34 H指数:5 供职机构: 东北农业大学动物医学学院 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家科技支撑计划 黑龙江省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
黑龙江省部分奶牛场奶牛布氏杆菌病血清学调查 被引量:6 2010年 杨华 张玉杰 刘晓民 高明春 王君伟关键词:牛布氏杆菌病 奶牛场 血清学调查 人畜共患传染病 流产 减蛋综合征病毒五邻体基因的原核表达及其表达蛋白的部分活性分析 被引量:6 2010年 通过PCR方法扩增得到减蛋综合征病毒(EDSV)结构蛋白五邻体(Penton)基因,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)的多克隆位点,构建了原核表达载体pET-30a-Penton,将其转化到感受态细胞Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了54.0ku的融合蛋白。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备抗血清,通过血凝试验、Western-blot、血凝抑制试验、细胞中和试验进行分析,表明该融合蛋白不能引起鸡红细胞凝集,无血凝活性;可与EDSV阳性血清发生特异性反应,能够诱导机体产生中和抗体,具有良好的抗原性。 杨华 刘晓民 于志丹 马波 王君伟关键词:减蛋综合征病毒 原核表达 活性分析 3种奶牛布鲁氏菌病血清学检测方法的贝叶斯评估 被引量:6 2010年 在无"金标准"的情况下,为评估虎红平板凝集试验(RBT)、荧光偏振分析法(FPA)和间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)用于奶牛布鲁氏菌病的抗体检测能力,作者分别以RBT、FPA、I-ELISA3种方法对采自某奶牛场的血清样品进行检测,通过贝叶斯分析法对检测结果进行分析,研究3种方法检测奶牛布鲁氏菌血清抗体的敏感性(Se)和特异性(Sp)。结果显示,RBT、FPA、I-ELISA3种检测方法的敏感性(Se)分别为91.81%、95.92%和95.98%;特异性(Sp)分别为98.80%、86.54%和98.65%。本研究表明,3种血清学检测方法中以I-ELISA的检测能力最好。 刘晓民 杨华 高明春 李彦伟 王君伟关键词:布鲁氏菌病 间接酶联免疫吸附试验 贝叶斯分析 牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定及其PCR检测方法的建立 被引量:9 2012年 为分离鉴定牛源化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)并建立其PCR检测方法,本研究从某规模化奶牛场患牛肺组织中分离出两株细菌,根据其形态特征、培养特性及生化特性,结合16S rRNA分析确定分离菌为A.pyogenes。对小鼠致病性试验显示纯培养物对小鼠致死率较高,药敏试验表明分离菌仅对少数种类抗生素如头孢唑啉、氧氟沙星、阿奇霉素等敏感。本研究同时建立了快速检测A.pyogenes溶血素(PLO)基因的PCR方法,敏感性试验显示最低检出菌数为9.2×103cfu/mL,特异性试验表明与其他细菌如布鲁氏菌、大肠杆菌等无交叉反应,通过对已知临床样本检测评估显示该方法适用于临床感染样品的检测。 张明富 刘晓民 孟祥莉 徐凝 张文龙 王君伟关键词:化脓隐秘杆菌 PCR 牛源化脓隐秘杆菌cbpA基因的克隆及原核表达 被引量:1 2013年 为研究化脓隐秘杆菌(A.pyogenes)CbpA蛋白的反应原性,本研究以A.pyogenes Hlj1005株为模板采用PCR方法扩增cbpA基因,并构建重组表达质粒pET-cbpA,将其转化至大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE53)plysS中,经IPTG诱导,用SDS-PAGE及western blot检测目的蛋白的表达情况及其反应原性。SDS-PAGE分析表明获得了约120 ku的蛋白。Western blot检测表明,CbpA蛋白可以与A.pyogenes阳性血清发生特异性反应,表明其有良好的反应原性。 张明富 郭永丽 刘晓民 徐凝 张文龙 王君伟关键词:化脓隐秘杆菌 反应原性 牛源支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 被引量:5 2009年 从2008年黑龙江省某奶牛场犊牛中暴发的一种以呼吸道病变为主疾病的患病牛中分离出3株细菌,根据其形态特征、培养特性、生化特性等将分离菌鉴定为支气管败血波氏杆菌。对分离菌进行药敏试验、皮肤坏死试验及16 S rRNA基因的克隆和序列分析。结果显示,该菌对氟哌酸、丁胺卡那霉素、庆大霉素、氯霉素敏感,可导致豚鼠皮肤坏死;其16 S rRNA基因序列与GenBank中收录的标准菌株Bb RB50株(BX640449)同源性为100%。证实,引起该病的病原是支气管败血波氏杆菌。 刘晓民 杨华 张润祥 高明春 王君伟关键词:犊牛 支气管败血波氏杆菌 RRNA基因 奶牛布鲁菌病奶液抗体检测方法的初步应用 被引量:1 2011年 布鲁菌病(以下简称布病)目前在国内一些地区广泛流行,不但影响畜牧业的健康发展,也严重威胁人类健康。布鲁菌感染奶牛的主要症状是网状内皮系统和妊娠期细胞的炎症反应,通常会导致妊娠5至7个月的奶牛胎儿流产和死亡,伴随着流产,大量的布鲁菌会被排出,继而感染同群动物中的其他个体。 李彦伟 刘晓民 高明春 王倩 张文龙 王君伟关键词:布鲁菌 抗体检测方法 奶牛 炎症反应 妊娠期