刘田 作品数:3 被引量:4 H指数:1 供职机构: 华南农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省农科院院长基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
柔嫩艾美耳球虫的能量代谢特征的初步研究 本研究旨在分析柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的不同能量来源,探明E.tenella能量代谢特征.利用化学发光细胞活性检测试剂盒测定球虫子孢子ATP体外消耗规律.构建球虫子孢子饥饿模型,评价持续添加能量底... 廖申权 刘田 吴彩艳 李娟 林栩慧 戚南山 吕敏娜 张建騑 谢明权 李国清 孙铭飞关键词:柔嫩艾美耳球虫 能量代谢 ATP 柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的克隆、序列分析与原核表达 被引量:1 2014年 为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,G6-PI)的生化特性,本研究对其基因进行了克隆和原核表达。根据NCBI已公布的E.tenella Houghton株G6-PI的基因序列(GI:298161921)设计特异性引物,运用RT-PCR方法扩增EtG6-PI基因序列,并将其克隆到表达载体pColdI、pCold43a中,构建重组质粒pColdIEtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E.coli Rosetta(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,E.tenella G6-PI的ORF序列(1650 bp),编码550个氨基酸;重组菌pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI均能成功诱导表达,其中pCold43a-EtG6-PI表达部分可溶性蛋白,表达产物纯化后可用于酶生化特性分析。柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础。 刘田 廖申权 戚南山 吴彩艳 李娟 吕敏娜 李国清 孙铭飞关键词:柔嫩艾美耳球虫 葡萄糖-6-磷酸异构酶 克隆 原核表达 猫锡兰钩虫rDNA ITS1的扩增及分子鉴定 被引量:3 2013年 为了对从猫粪便样品中分离的钩虫虫卵进行种类鉴定,本研究提取该虫卵基因组DNA,根据核糖体内转录间区1(ITS1)的保守序列设计钩虫属引物,通过PCR扩增、克隆、测序、相关软件分析,建立系统进化树,从分子水平对其进行种类鉴定。结果表明扩增出404 bp DNA片段,测序结果显示该片段包括309 bp ITS1和95 bp的5.8S rDNA,与NCBI中登录的序列进行比对以及采用Clustal X和MEGA5.1软件分析确定该钩虫为锡兰钩虫。这是我国首次建立钩虫的分子鉴定方法,也是40年来再次发现猫源锡兰钩虫,为锡兰钩虫分子生物学和分子流行病学研究奠定了基础。 刘远佳 郑国超 刘田 任邵娜 李雅文 孟祥龙 Loutou H M 李国清关键词:RDNA