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排序方式：

猫锡兰钩虫rDNA ITS1的扩增及分子鉴定被引量：3: 2013年; 为了对从猫粪便样品中分离的钩虫虫卵进行种类鉴定,本研究提取该虫卵基因组DNA,根据核糖体内转录间区1(ITS1)的保守序列设计钩虫属引物,通过PCR扩增、克隆、测序、相关软件分析,建立系统进化树,从分子水平对其进行种类鉴定。结果表明扩增出404 bp DNA片段,测序结果显示该片段包括309 bp ITS1和95 bp的5.8S rDNA,与NCBI中登录的序列进行比对以及采用Clustal X和MEGA5.1软件分析确定该钩虫为锡兰钩虫。这是我国首次建立钩虫的分子鉴定方法,也是40年来再次发现猫源锡兰钩虫,为锡兰钩虫分子生物学和分子流行病学研究奠定了基础。; 刘远佳郑国超刘田任邵娜李雅文孟祥龙Loutou H M李国清; 关键词：RDNA

柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶的克隆与原核表达: 鸡球虫病是由艾美耳属(Eimeria)的一种或几种原虫寄生于鸡肠道黏膜细胞所引起的疾病,可造成巨大经济损失。鸡球虫病的控制手段主要依靠抗球虫药的使用,但抗药性问题的日益严重限制了现有抗球虫药物的广泛应用,迫使人们寻找新的...; 孟祥龙廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜李国清孙铭飞; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫酰基甘油酯酶的克隆与原核表达: 鸡球虫病是养鸡业中常见的一种肠道寄生性原虫病,严重威胁着养鸡业的发展。酯代谢是鸡球虫的三大代谢之一,酰基甘油酯酶(acylglycerol lipase,AGL)是酯代谢途径的关键酶,对鸡球虫的生存起着重要作用。本研究应...; 孟祥龙廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜李国清孙铭飞; 文献传递

犬源贾第虫EF1α基因的克隆及序列分析: 2012年; 以广州某宠物医院临床犬源贾第虫为研究对象,根据GenBank TM中登录的贾第虫EF1α基因序列(AF069575),设计1对引物EF/ER,采用PCR方法从贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对其进行序列测定及分析,旨在对广州犬源贾第虫进行分子鉴定。结果显示,该犬源贾第虫EF1α序列长为288bp,与预期目的片段一致,该序列构建的分子进化树表明该犬源贾第虫分离株为蓝氏贾第虫D型。说明EF1α适合做分子标记,可准确地对贾第虫进行基因分型,为贾第虫分子分类学及分子遗传学研究奠定了基础。; 李结王培园张萍刘远佳郭建超孟祥龙李国清; 关键词：克隆 PCR技术

猫源贾第虫16S rRNA与β-贾第素基因双位点的基因型鉴定被引量：2: 2012年; 为了对流浪猫粪便中分离的贾第虫滋养体进行基因型鉴定,提取虫体基因组DNA,以16SrRNA和β-贾第素基因为遗传标记,通过PCR扩增、克隆、测序、NCBI比对以及相关软件分析,建立系统进化树,确定了其基因型。结果显示,成功扩增出291bp的16SrRNA和511bp的β-贾第素基因片段,测定了2个基因片段的序列,并经NCBI比对以及DNAStar中MegAlign软件分析确定该株贾第虫为十二指肠贾第虫F型。本研究首次对我国猫源贾第虫进行了基因型鉴定,为猫源贾第虫分子生物学和分子流行病学研究奠定了基础。; 刘远佳张萍李结郭建超孟祥龙LOUTOU H M李国清; 关键词：基因型 16SRRNA基因

两株犬源贾第虫tpi基因的基因型分析被引量：2: 2011年; 采用巢式PCR鉴定广东两株犬源贾第虫(GD1和GD2)的基因型。运用碘液染色对犬粪便中贾第虫进行鉴定,提取DNA后经巢式PCR扩增tpi基因,扩增产物测序后用BLAST和DNAStar软件进行同源性和系统发育分析。结果表明,通过tpi基因分析,GD1与L02120的同源性为100%,种系发育树上位于同一分支;GD2与DQ220289的同源性为99.1%,种系发育树上两者在同一分支。广东犬源贾第虫GD1为人畜共患的A1型,GD2为犬的D型。; 张萍朱海波李结李金平刘远佳郭建超孟祥龙李国清; 关键词：贾第虫巢式PCR

柔嫩艾美耳球虫MAGL基因的克隆及表达被引量：2: 2013年; 酰基甘油酯酶(MAGL)是将酰基甘油分解为甘油和游离脂肪酸的丝氨酸水解酶家族成员之一,在酯代谢中起着关键酶的作用,是研制抗鸡球虫药物的重要靶标。本研究利用生物信息学技术预测拼接了柔嫩艾美耳球虫MAGL基因序列,以第二代裂殖子总RNA为模板,通过RTPCR技术获得Etmagl基因。将Etmagl与pCold-43a载体连接,构建pCold-43a-Etmagl重组载体,并在大肠杆菌BL21中获得可溶性蛋白,经亲和层析获得纯化的重组蛋白。结果显示,扩增的Etmagl序列ORF长1 752 bp,编码584个氨基酸,与预测序列相似度为99%,与弓形虫MAGL相似度好(55%);IPTG诱导后融合蛋白高效表达,大小约为114 ku,经免疫印迹鉴定为目的蛋白。本研究成功利用大肠埃希菌原核表达体系重组表达并纯化了柔嫩艾美耳球虫酰基甘油脂肪酶,为建立以MAGL为靶标的抗球虫药物筛选模型奠定了基础。; 孟祥龙廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜李娟孙铭飞李国清; 关键词：柔嫩艾美耳球虫纯化

犬源A型贾第虫real-time PCR检测方法的建立被引量：2: 2011年; 为建立贾第虫定性定量的检测方法,本研究针对犬源贾第虫16S rRNA基因片段设计一对引物,将构建的重组质粒作为阳性对照,建立了贾第虫DNA的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法。结果显示,特异性产物Tm值为94.20℃,最低可检测到3.39 copy/μL的阳性质粒,标准曲线的相关系数为0.99。与其他常见原虫隐孢子虫、球虫、弓形虫均不发生交叉反应,重复性变异系数小于3%。该检测方法具有较好的特异性和敏感性,为贾第虫病的临床检测和流行病学调查提供了新的技术手段。; 张萍刘远佳李结李金平孟祥龙郭建超李国清; 关键词：贾第虫实时荧光定量PCR

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孟祥龙