聂培婷
- 作品数：6 被引量：27H指数：3
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 冷诱导RNA结合蛋白通过激活NF-κB信号通路影响H1N1甲型流感病毒的复制被引量：3
- 2016年
- 冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)是NF-κB和ERK信号通路的上游调控因子,而这两条信号通路是甲型流感病毒复制和机体起始免疫所必需的,为探讨CIRP对H1N1甲型流感病毒复制的影响及可能的分子机制,构建了CIRP过表达BHK-21细胞系(Cirp+BHK-21),用Western blot检测NF-кB和ERK1/2的磷酸化水平,研究CIRP对NF-кB和ERK1/2的调节作用;用Real-time RT-PCR检测H1N1甲型流感病毒感染后Cirp+BHK-21和对照细胞中病毒拷贝数的动态变化,以及在特异性阻断剂PDTC阻断NF-кB通路的Cirp+BHK-21细胞中病毒拷贝数的动态变化。Western blot检测结果显示:过表达CIRP显著促进了BHK-21细胞中NF-κB的磷酸化水平(P<0.05),而对ERK1/2的磷酸化水平无显著影响;病毒定量检测结果显示:过表达CIRP能显著促进H1N1甲型流感病毒的增殖,感染后3、9、15、21h病毒在Cirp+BHK-21细胞中的拷贝数分别为对照组的111%、103%、167%和235%(P<0.05);阻断NF-κB信号通路后病毒的拷贝数显著下降,在感染后3、9、15、21h分别为未阻断组的98%、42%、19%(P<0.05)和7%(P<0.05)。从本研究结果可见,CIRP可通过活化NF-κB信号通路促进H1N1甲型流感病毒的复制。
- 聂培婷汤承岳华
- 关键词：病毒复制NF-ΚBBHK-21细胞
- 基因C型鸭甲肝病毒VP1基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2012年
- 为原核表达基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白,本研究通过设计套式PCR引物,RT-PCR扩增DHAV-C VP1全基因,约为720 bp,将其亚克隆至pET-32a(+)载体中构建重组表达质粒pET-VP1。将其转化E.coli Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达了约47 ku的重组蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白可以与兔抗DHAV-C阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
- 皮晋魁聂培婷黄秋雪岳华张焕容
- 关键词：VP1基因原核表达
- 冷诱导RNA结合蛋白参与小鼠H1N1甲型流感病毒感染的应答被引量：2
- 2016年
- 冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)是哺乳动物间高度保守的多功能蛋白,但其在病毒感染中的作用尚不清楚,本研究旨在探讨CIRP对甲型流感病毒感染的应答。用H1N1甲型流感病毒PR-8株滴鼻接种成年BALB/c小鼠,分别于感染后24、48、72、96、120h随机处死3只,用荧光定量RT-PCR和免疫组化法分别检测小鼠心、肝、脾和肺中CIRP基因和蛋白质的表达水平。基因定量检测结果显示,感染小鼠各被检器官中Cirp mRNA的转录量显著升高;免疫组化试验结果显示,CIRP在感染小鼠心肌细胞、肺泡上皮细胞、肺支气管上皮细胞和脾淋巴细胞的细胞质中表达量均有不同程度的升高。综上可见,CIRP参与机体对H1N1甲型流感病毒感染的应答,由于CIRP对炎性因子产生过程具有显著的调节作用,其在流感病毒感染过程中的作用值得深入研究。
- 聂培婷汤承岳华
- 关键词：甲型流感病毒荧光定量RT-PCR免疫组化
- 冷诱导RNA结合蛋白在应激状态下对细胞的保护作用机制被引量：5
- 2013年
- 冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA-binding protein,CIRP)是目前哺乳动物中被广泛研究的冷应激蛋白之一。CIRP在脊椎动物间高度保守,在多种类型的细胞中均有表达,参与体内多种生物学过程。在应激条件下,CIRP从细胞核迁移到细胞质的应激颗粒中,通过与其特异靶基因结合,发挥一系列生物学效应,帮助细胞快速适应各种环境应激,尤其在温和低温、紫外线、缺氧等应激条件下,CIRP被诱导表达,通过与其特异靶基因结合、增加mRNA的稳定性、抗细胞凋亡等方式发挥细胞保护作用。文章重点对冷诱导RNA结合蛋白在应激状态下的细胞保护作用机制的研究进展进行综述。
- 唐佳佳汤承聂培婷岳华
- 关键词：抗应激细胞保护
- 鸭甲肝病毒基因A型和C型双重RT-PCR检测方法的建立被引量：12
- 2012年
- 为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A,DHAV-C)的双重RT-PCR方法,本实验根据GenBank中DHAV-A和DHAV-C全基因组序列,针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物,通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价,建立了检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法。该方法能够分别从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A(259 bp)和DHAV-C(194 bp)的特异片段,而不与其它被检的无关病原发生非特异反应;对DHAV-A和DHAV-C的最低检出限分别为4.98×104拷贝/μL、1.68×104拷贝/μL;对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分别为20%(14/70)、70%(49/70);随机抽取的DHAV-C PCR阳性样本的病毒分离结果与双重RT-PCR检测结果的符合率为100%(16/16)。本研究结果显示,建立的双重RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床DHAV的快速鉴别诊断。
- 黄秋雪汤承聂培婷岳华
- 关键词：双重RT-PCR
- H1N1甲型流感病毒在BHK21中的增殖规律被引量：3
- 2012年
- BHK21细胞是多种动物病毒的易感宿主,是病毒疫苗生产的常用基质,为了解H1N1甲型流感病毒在BHK21细胞中的增殖规律,本研究建立了定量检测甲型H1N1流感病毒M基因表达水平的SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR(RRT-PCR)方法,用于研究H1N1甲型流感病毒在BHK21细胞中的增殖规律.结果发现:用1MOI H1N1甲型流感病毒接种BHK21,细胞于感染后24 h开始出现细胞病变,36h细胞大量脱落和崩解;病毒定量检测结果显示,H1N1甲型流感病毒增殖迅速,于感染后6、12、24、36 h病毒滴度分别为1.77×106拷贝/mL、2.39×106拷贝/mL、6.58×105拷贝/mL、2.87×105拷贝/mL.研究结果证实本实验建立的RRT-PCR能用于H1N1甲型流感病毒的精确定量,病毒在BHK21细胞中的增殖规律为利用细胞毒生产疫苗提供了参考.
- 聂培婷汤承岳华
- 关键词：实时荧光RT-PCR病毒增殖
