成炜
- 作品数：3 被引量：121H指数：3
- 供职机构：华中农业大学食品科学技术学院更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 沙门菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR检测被引量：55
- 2006年
- 根据沙门菌invA基因、大肠杆菌phoA基因和金黄色葡萄球菌nuc基因序列，设计3对特异性引物进行多重PCR并对反应条件进行优化。结果表明3对引物能特异地扩增出284bp、622bp、484bp的目的条带；最佳反应条件为沙门菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的引物浓度分别为40nmol／L、40nmol／L、80nmol／L，Mg^2＋浓度2．4mmol／L，dNTP浓度2001μmol／L，Taq DNA聚合酶1.5u，退火温度55．0℃-57．4℃之间；在此条件下多重PCR同时检测DNA的敏感性分别是10．2pg、10．2pg、102．0pg，检测时间4h。建立的多重PCR是一种敏感、特异、准确、快速的方法，为同时检测食品中沙门菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌奠定了基础。
- 许一平成炜邵彦春陈福生
- 关键词：多重PCR沙门菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌
- 多重PCR技术在食源性病原细菌检测中的应用被引量：33
- 2007年
- 食品中污染的病原细菌是引起食源性疾病的主要因素之一,快速检测食品中病原细菌是及时有效预防病原细菌传播及食物中毒的重要前提。多重PCR作为一种可同时检测多种病原细菌的方法应用日益广泛。本文介绍了多重PCR技术在食源性病原细菌检测中的应用现状及其多重PCR反应条件的优化,同时提出了存在的问题并对应用前景作了展望。
- 许一平成炜陈福生
- 关键词：多重PCR病原细菌
- 环介导等温扩增技术快速检测沙门菌被引量：36
- 2008年
- 环介导等温扩增(1oop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种在等温条件下高特异、高效、快速地扩增靶序列的DNA扩增新技术。以沙门菌(Salmonellaspp.)为研究对象,根据其特异性的invA基因,设计了一套特异性引物对该基因进行了LAMP,同时优化了其反应条件,建立了沙门菌的LAMP快速检测技术。结果表明,LAMP的最佳反应条件为外引物浓度5pmol/L、内引物浓度40pmol/L,Mg2+浓度6mmol/L,dNTP浓度0.8mmol/L,甜菜碱浓度0.8mmol/L,BstDNA聚合酶8U,反应温度63℃,反应时间1h。在此条件下,LAMP检测沙门菌DNA的敏感度达10fg/反应,且与其他常见的细菌无交叉反应。其对牛奶样品的检出量为102cfu/mL,适合于食品中污染沙门菌的快速检测。
- 朱胜梅吴佳佳徐驰屈炯成炜陈福生
- 关键词：LAMP沙门菌
