杨文芳
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中日友好医院更多>>
- 发文基金：“首都临床特色应用研究”专项国家自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛋白聚糖异常代谢在关节炎损伤机制中的作用被引量：9
- 2015年
- 以关节损伤为主要病变特征的各种关节炎，可导致关节慢性持续性肿痛、关节僵硬及功能障碍，最常见的两种关节炎是骨关节炎（ osteoarthritis，OA ）和类风湿关节炎（ rheumatoid arthritis，RA ）。OA以关节软骨退行性病变为特点，主要的病理变化是软骨细胞功能减退，软骨基质的分解加速，软骨组织的磨耗，进而继发滑膜炎症和关节周边的骨质增生。RA 则是以慢性关节滑膜炎症为特征的全身自身免疫性疾病，在发病关节腔内有大量淋巴细胞和巨噬细胞浸润，主要的病理特征是关节滑膜及周围结缔组织异常增生，滑膜内大量新生血管和广泛慢性炎症性细胞浸润，滑膜组织表现为增生过度和凋亡受阻，产生基质金属蛋白酶（ matrix metalloproteinases，MMPs ），破坏关节内软骨和骨，同时成纤维细胞（ fibroblast-like synoviocytes， FLS ）增生，造成关节纤维化。由此可见，关节软骨的损伤是RA和OA的共同特征。
- 杨文芳周惠琼
- 关键词：蛋白聚糖类代谢关节炎骨关节炎
- 循环游离DNA在多发性肌炎和皮肌炎中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的:研究循环游离DNA(cfDNA)在多发性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)中的作用。方法:使用PicoGreen试剂盒检测61例PM/DM患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者和48例健康对照的血浆cfDNA浓度,并与患者的血清学指标做相关性分析。结果:cfDNA浓度在PM/DM组是247.1±61.09ng/ml,显著高于健康对照组(197.1±31.36ng/ml,P<0.01),显著低于SLE组(281.9±82.21ng/ml,P<0.01)。cfDNA与血沉和血清球蛋白呈显著正相关(P<0.01,P<0.05),与C3呈显著负相关(P<0.01)。结论:cfDNA可能与PM/DM疾病活动度相关。
- 张思功卢昕田小兰王艳杨文芳张学智王国春
- 关键词：多发性肌炎皮肌炎
- 外周血蛋白聚糖代谢片段检测水平与类风湿关节炎影像学进展Sharp评分的相关性被引量：6
- 2017年
- 目的探讨软骨细胞蛋白聚糖异常代谢与RA患者关节病变的相关性。方法本研究选取病程〈24个月的RA患者140例，对照组为健康人群100名及其他风湿病患者95例。采用竞争性ELISA法，通过针对蛋白聚糖代谢片段的单克隆抗体（5D4，7D4及BC-3）检测3组人群血清中的蛋白聚糖代谢片段并进行比较，同时记录RA患者人口学资料、临床及实验室指标；在入选及随诊1年时使用改良Sharp评分法评估患者的关节病变，以多元线性回归分析Sharp评分的影响因素，受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析蛋白聚糖检测对关节病变进展的预测价值。结果RA患者蛋白聚糖5D4及BC-3代谢片段明显高于健康对照组[5D4：RA患者（5．8±2．1）ng／μl，健康对照组（2．2±1．3）ng／μl；BC-3：RA患者（11．1±3．4）ng/μl，健康对照组（5．0±2．1）ng／μl，F值分别为38．65，24．07，P值均〈0．01]；抗CCP抗体阳性的RA患者的2种代谢片段水平明显高于阴性患者[5D4：抗CCP抗体阳性组（5．6±1．3）ng／μl，阴性组（4．4±1．1）g／μl，F=21．23，P〈0．01；BC-3：抗CCP抗体阳性组（12．2±3．9）ng／μl，阴性组（9．3±2．8）g／μl，F=27．14，P〈0．01]；随访1年RA患者Sharp评分的多因素分析结果显示：5D4代谢片段、BC-3代谢片段及抗CCP抗体阳性为Sharp评分进展的危险因素。联合检测血清两种代谢片段，ROC曲线评估它们对关节病变Sharp评分的预测性，结果显示敏感性56．5％，特异性84．2％，阳性预测值74．3％，阴性预测值70．6％，ROC曲线下面积为0．798。结论RA患者血清蛋白聚糖5D4及BC-3两种代谢片段与关节早期病变有一定的相关性，可进一步研究确定它们作为RA关节进展的预测价值。
- 周惠琼钱宏伟杨文芳孙晓萱张清李胜光吴东海
- 关键词：蛋白聚糖类代谢
- DNaseⅠ在多发性肌炎和皮肌炎中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的研究DNaseⅠ在多发性肌炎和皮肌炎发病机制中的作用。方法选择2011年12月至2012年10月在中日友好医院风湿免疫科住院患者中符合多发性肌炎(PM)/皮肌炎(DM)诊断标准的61例患者作为病例组。同期选择48例健康成年人作为对照组。辐射状酶扩散法测定血浆Ⅰ型脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ)活性,并与患者血清学指标进行相关性分析。在DNaseⅠ活性受损的患者血浆中添加外源性DNaseⅠ和微球菌核酸酶(MNase),进一步分析DNaseⅠ活性受损的原因。结果 DNaseⅠ活性在PM/DM组为(0.3353±0.1894)U/ml,显著低于健康对照组[(0.5441±0.2536)U/ml,P<0.0001]。36例DNaseⅠ活性显著受损的患者血浆中添加外源性重组DNaseⅠ后,11例患者的血浆不能明显恢复DNaseⅠ活性,而添加MNase后,患者血浆对底物dsDNA的降解完全恢复,说明这些患者血浆中存在DNaseⅠ的特异性抑制剂。相关性分析提示DNaseⅠ活性与血清球蛋白(r=0.366,P=0.005)和IgG(r=0.322,P=0.012)呈正相关。结论 PM/DM患者血浆DNaseⅠ活性显著低于健康对照;部分PM/DM患者血浆中存在DNaseⅠ的特异性抑制剂;DNaseⅠ的活性受损可能在PM/DM发病中起一定作用。
- 张思功卢昕田小兰陈芳王艳杨文芳张寅丽周航杨阚波袁凯王国春
- 关键词：多发性肌炎皮肌炎
- 竞争性ELISA法测定软骨细胞蛋白聚糖代谢片段的可行性分析被引量：1
- 2015年
- 目的 本研究探讨竞争性ELISA法测定软骨细胞蛋白聚糖代谢片段的可行性,为蛋白聚糖相关研究提供一个新的方法. 方法 利用单克隆抗体（Mab-5D4）通过竞争性ELISA法检测体外培养的兔关节软骨细胞蛋白聚糖的代谢片段,摸索最佳实验条件,计算本方法的板间差异和板内差异,同时通过DMMB分光光度法测定蛋白聚糖的代谢物糖胺聚糖（GAG）,并比较它们的相关性. 结果 竞争性ELISA法测定蛋白聚糖5D4片段方法的板间差异为10.38%,板内差异为3.91%,实验组培养上清液5D4片段的浓度明显高于对照组（328.22ng/ml vs 184.61ng/ml,t=5.67,P=0.001）. 与常规分光光度法测定蛋白聚糖的代谢物GAG有较好的相关性（r=0.453~0.579,P=0.001）. 结论 竞争性ELISA法测定蛋白聚糖代谢产物方法简便,重复性好,可应用于蛋白聚糖代谢的相关研究.
- 周惠琼张清叶彬孙晓萱杨文芳
- 关键词：蛋白聚糖ELISA软骨细胞
- 肌球蛋白结合蛋白C的表达和鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨优化原核表达方法以及用亲和层析的方法制备重组人快型肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC2)。方法:根据MYBPC2的序列设计一对引物,在上下游引物的5’端分别加上BamHI和HindⅢ酶切位点。以健康人骨骼肌cDNA为模版,扩增第284位至第579位氨基酸残基对应的碱基序列,经双酶切后插入pMalc-5e载体中,测序鉴定重组质粒的序列,将构建好的重组质粒转化大肠杆菌中,IPTG诱导重组蛋白MYBPC2-MBP的表达,亲和层析纯化重组蛋白,蛋白电泳法鉴定蛋白的分子量及纯度,测定蛋白浓度并估算蛋白纯化后得率。用商品化的抗MYBPC2抗体证实所表达蛋白序列的正确性。以纯化的蛋白免疫动物获得动物免疫血清,用Western Blot的方法鉴定此蛋白的免疫原性。结果:人MYBPC2蛋白表达载体构建成功,每升大肠杆菌菌液可生产纯化后的重组MYBPC2蛋白约30mg,Western Blot显示重组蛋白与其抗体及抗血清特异结合。结论:本方法可以高效制备生产人MYBPC2蛋白片段,具备良好的抗原特异性和免疫原性。
- 张寅丽舒晓明彭清林杨阚波周航张思功杨文芳赵千子卢昕王国春
- 关键词：蛋白表达免疫原性
- 风湿科住院患者25-0H-维生素D水平分析
- 杨文芳周航卢昕章璐周惠琼
- 血清骨代谢标记物对预测类风湿关节炎关节破坏的意义被引量：4
- 2014年
- 目的：探讨血清骨代谢标记物与RA患者关节破坏的相关性。方法选取140例住院RA患者，90例同期健康人作为研究对象。采用DEXA测定RA者腰椎（ L1～L4）及股骨上端骨密度值，根据T值分为正常骨量、低骨量、骨质疏松组3组；另根据双手X线结果显示关节破坏程度分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组；同时检测患者血清CTX、25（ OH） D、TRACP－5b、PTH、血钙、血磷、抗CCP抗体、RF、CRP、ESR。结果 RA组TRACP－5b、CTX水平明显高于健康对照组（Z＝－2．747，－4．809，P＜0．01），25（OH）D水平明显低于健康对照组（Z＝－6．152，P＜0．001）；TRACP－5b与病程、关节压痛个数、CTX呈正相关（r＝0．193， r＝0．189， r＝0．196，P＜0．05），随着疾病活动度的加重，TRACP－5b水平呈现递增趋势，且骨质疏松组TRACP－5b水平高于正常骨量组，但未达统计学差异；CTX与关节肿胀个数、25（OH）D呈正相关（r＝0．215， r＝0．192，P＜0．05），其水平在疾病重度活动组明显高于中低度组；X线Ⅰ期组患者与其他各组相比年龄较小，病程较短，关节破坏程度轻；Ⅰ期、Ⅱ期组骨质疏松患病率明显低于Ⅲ期、Ⅳ期组（ P＜0．05）；骨量丢失随年龄增长、病程的延长、疾病活动度的加重而增加。结论骨代谢标记物与RA患者关节破坏有一定的相关性，联合检测多种骨代谢标记物可望预测关节破坏的程度。
- 杨文芳周惠琼孙晓萱张寅丽张思功彭清林王国春
- 关键词：类风湿关节炎关节破坏
- 探讨血清抗酒石酸碱性磷酸酶-5b对类风湿关节炎患者关节破坏的意义
- 目的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性、对称性、多关节炎和关节外病变为主要临床表现的自身免疫性疾病,多发生于中老年女性,炎症持续存在可导致骨质疏松,引起关节破坏,并进行性加重导致残...
- 杨文芳周惠琼张寅丽张思功
