- 人era基因的克隆测序及表达被引量：7
- 2000年
- 目的 克隆人的 era基因 (简称 Hera)并利用大肠杆菌进行表达 .方法 PCR扩增 Hera基因 ,测序正确后克隆入大肠杆菌融合表达载体 p GEX- 4T3,受控于 Ptac启动子 ,重组质粒 p GEX- Hera以大肠杆菌 DH5α为宿主菌 ,用 IPTG进行诱导表达 .结果 克隆了 Hera基因 ,测序正确 ;含重组质粒p GEX- Hera的菌体诱导后在 SDS- PAGE上出现一条新生蛋白带 ,相对分子质量为 6 5 ku,占菌体总蛋白的 2 3% .结论 成功扩增、克隆 Hera基因 。
- 吴元明张俊杰纪宗玲刘惠萍陈南春陈苏民
- 关键词：ERA基因基因克隆大肠杆菌
- 人Era蛋白在大肠杆菌中的高效表达及其纯化被引量：5
- 2001年
- 目的 在大肠杆菌中对人的 era基因 (简称 hera)进行表达、纯化 .方法 PCR扩增 hera基因 ,测序正确后克隆入大肠杆菌融合表达载体 p RSET- C,重组质粒 p RSETC-hera以大肠杆菌 BL2 1(DE3)为宿主菌 ,用 IPTG进行诱导表达 .然后利用亲和层析的方法对表达蛋白进行纯化 .结果 克隆了 hera基因 ,测序正确 ;利用 p RSET- C载体在大肠杆菌中融合表达了全长 hera- c DNA基因 ,表达量占细菌总蛋白的 5 9.6 % .融合蛋白在菌体内主要以包涵体形式存在 ,在变性条件下用 Ni- NTA亲和色谱柱纯化此融合蛋白 ,其纯度达到了 98.0 % .结论 利用基因重组技术在大肠杆菌中高表达了 hera基因 .
- 吴元明陈苏民陈南春纪宗玲刘惠萍张俊杰
- 关键词：基因表达蛋白纯化纯化
