赵静
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- GST-His双标签原核表达载体的构建及应用被引量：3
- 2009年
- 目的:在原有带有GST标签的pGEX-KG载体上添加His标签,构建双标签原核表达载体,以提高纯化后的融合蛋白的纯度。方法:双酶切pGEX-KG载体,将同样带有双酶切位点编码His标签的DNA序列酶切后与其连接、转化大肠杆菌DH5α、鉴定阳性克隆并测序,并将编码雌激素受体β(ERβ)的片段构建到该载体上,分别利用GST标签和His标签对ERβ蛋白进行2次纯化。结果:构建了GST-His双标签原核表达载体,将ERβ编码片段克隆入该载体中,在原核生物中得到表达;分别用GST和His抗体进行Western blot分析,均可检测到GST-His-ERβ融合蛋白的表达;利用此双标签载体纯化得到了纯度较高的ERβ蛋白。结论:GST-His双标签原核表达载体的构建对提高目的蛋白纯度具有重要意义。
- 赵静丁丽华仇玮祎牛畅陈力权甘纯玑叶棋浓
- 关键词：原核表达载体蛋白纯化雌激素受体Β
- METT11D1抗体的制备与鉴定
- 2009年
- 目的:制备METT11D1(methyltransferase 11 domaincontaining1.简称其为GA9)(GenBank:AK024512)的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:融合表达GST-GA9(1-228aa)和GST-GA9(229-456aa)蛋白,利用包涵体纯化蛋白方法纯化蛋白,常规免疫小鼠,制备多克隆抗体。利用转染带有FLAG标签的FLAG-GA9真核表达载体的293T细胞裂解物,Western blot检测抗体的特异性。结果:获得了GST-GA9(1-228aa)和GST-GA9(229-456aa)融合蛋白;利用这些融合蛋白得到的多克隆抗体可特异识别FLAG-GA9蛋白。结论:成功得到可特异识别GA9的多克隆抗体,为进一步研究GA9的功能奠定了坚实的基础。
- 赵静丁丽华甘纯玑李杰之叶棋浓
- 关键词：多克隆抗体
