徐乐乐
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 病毒调节宿主适应性免疫的分子机制被引量：2
- 2021年
- 在适应性免疫过程中,机体主要通过T细胞和B细胞特异性识别入侵的病毒并将其清除。正常情况下,产生的抗体有利于病毒清除,但有些病毒存在抗体依赖增强作用(ADE),亚中和浓度或非中和抗体反而促进病毒感染。自然杀伤(NK)细胞的记忆性和特异性,使其与适应性免疫的界限越来越模糊。病毒为了更好地在宿主细胞中生存,进化出多种可逃逸宿主适应性免疫系统的机制。本文对病毒调节的各种宿主适应性免疫反应和病毒的免疫逃逸机制进行总结,以期为进一步探究病毒与宿主适应性免疫的关系及相应疫病的防治和疫苗开发提供参考。
- 徐乐乐李洋李志伟马志倩肖书奇
- 关键词：病毒适应性免疫NK细胞
- DC-SIGN真核表达载体的构建及其稳定转染HeLa细胞系的建立被引量：2
- 2015年
- 为研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)与树突状细胞特异性粘附分子-3-结合非整合素分子(dendritic cell specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing non-integrin,DC-SIGN)的相互作用对NDV感染树突状细胞(dendritic cell,DC)的影响,本研究拟构建能够稳定表达DC-SIGN蛋白的细胞系,为研究DC-SIGN蛋白与病毒蛋白互作提供基础。以小鼠DCs提取的c DNA为模板,通过PCR方法获得DC-SIGN基因,连入真核表达载体,并命名为pcDNA-DCSIGN,利用LipofectamineTM 2000转染HeLa细胞,G418进行药物压力筛选,经RT-PCR和Western blot鉴定,获得了一株可以高效表达DC-SIGN蛋白的HeLa细胞,且经过多次传代后仍然可以稳定表达DC-SIGN,说明该细胞系构建成功。
- 王欣谭磊陆凤徐乐乐仇旭升宋翠萍孙英杰廖瑛茅翔詹媛王琰周恩民丁铲
- 关键词：新城疫病毒树突状细胞
- PRRS减毒活疫苗抗体消长规律及仔猪最佳首免日龄探究被引量：1
- 2021年
- 从山东省某规模化猪场随机选择5头健康母猪,在其分娩前35 d免疫1头份猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)减毒活疫苗。从5头母猪分娩的仔猪中随机选择30头,于0,4,7,10,16,21,28,35日龄时采集各仔猪前腔静脉血分离血清,测定PRRS抗体水平及抗体阳性率,以探究仔猪PRRS抗体消长情况。为探究仔猪接种PRRS疫苗的最佳首免日龄,选择175头健康仔猪,随机分为7组,每组25头,分别于0,7,14,21,28,35日龄时免疫PRRS减毒活疫苗,并于免疫后7,14,21,28,35 d时采集血清测定其PRRS抗体水平及抗体阳性率。结果显示,仔猪吮吸初乳后逐渐获得高水平的母源抗体,于4日龄时达到峰值且阳性率高达100%;7日龄及10日龄时,仔猪体内PRRS抗体仍处在峰值附近,且阳性率为100%;此后,PRRS抗体及阳性率逐渐降低,在28日龄时接近阴性,在35日龄时大部分转为阴性。不同日龄进行首免的各组仔猪中,0日龄免疫组在免疫后7 d即可产生高水平PRRS抗体,且阳性率达75%,之后PRRS抗体逐渐增高,且阳性率逐渐增至96%;4日龄免疫组除在免疫后7 d处于临界值(S/P=3.9)外,其余时间点PRRS抗体均呈阳性,但阳性率为70%~83%;7日龄免疫组与4日龄免疫组相似,除免疫后7 d处于较低值(S/P=0.26)外,其余各时间点PRRSV抗体均呈阳性;而14,21,28,35日龄免疫组仔猪在免疫后14 d之前PRRS抗体均为阴性,血清转化出现在14 d或21 d后,但阳性率较高。综上,妊娠母猪产前35 d免疫PRRS减毒活疫苗所产仔猪体内PRRS母源抗体均值在4日龄时达峰值,28日龄时衰减至接近阴性,而35日龄时大部分转为阴性;仔猪分娩当天(吮吸初乳前)或分娩后4~7 d进行PRRS减毒活疫苗免疫均能使仔猪迅速产生较高水平阳性抗体,且具有较长的免疫持续时间和PRRS抗体阳性率,是较为合理的免疫方案。
- 高胜李洋马志倩李志伟徐乐乐焦点冯英桐杜兴乾肖书奇
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免日龄
- 酸性硫酸钙对临床常见致病微生物的杀灭能力
- 2021年
- 【目的】研究消毒剂酸性硫酸钙(ACS)对微生物的杀灭效果,为用消毒剂防控人畜疫病提供基础数据和理论依据。【方法】将ACS与中和剂(3%卵磷脂、5%吐温-80的磷酸盐缓冲液)共孵育一段时间后,再分别加入大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)共培养一段时间,将与细菌的混合物涂布于营养琼脂平板,置于37℃生化培养箱培养18-24 h;将与病毒的混合物接种于细胞板,在37℃细胞培养箱内培养一定时间,评价中和剂的中和效果。其对照设置和评判标准如下:消毒剂+菌悬液或病毒悬液(第1组),(消毒剂+菌悬液或病毒悬液)+中和剂(第2组),(中和剂+消毒剂)+菌悬液或病毒悬液(第3组),(无菌硬水+菌悬液或病毒悬液)+中和剂(第4组),(无菌硬水+菌悬液或病毒悬液)+PBS(第5组),无菌硬水+PBS(第6组);细菌杀灭试验中和剂效果评价标准:第1组有极少量细菌生长或无菌生长,第2组有菌生长且明显少于第3、4、5组但多于第1组,第3、4、5组细菌数接近且与阳性对照组细菌数接近,第6组无菌生长,3次重复试验均符合上述条件,结果一致,判定所选中和剂及浓度合适;病毒灭活试验中和剂效果评价标准:第1组有极少量病毒生长或无病毒生长,第2组有病毒生长且明显少于第3、4、5组但多于第1组,第3、4、5组病毒生长与原接种量相近,第6组细胞正常生长,3次重复试验结果一致,判定所选中和剂及浓度合适。利用悬液定量杀菌法和测定病毒滴度的方法评价ACS对上述细菌和病毒的消灭效果,将ACS稀释200、300、400、500、600、700倍分别与上述细菌或病毒作用不同时间后加入中和剂进行中和,然后将细菌混合物涂布于营养琼脂平板,通过计算菌落数评价ACS杀灭细菌的效果,测定病毒混合物中病毒滴度评价ACS对病毒的杀灭效果。【结果】所选用的中和剂能够有效地中和ACS 200倍稀释液�
- 付霞丽郑紫方马志倩徐乐乐李志伟李洋肖书奇李爽
- 关键词：微生物中和剂杀灭效果
- PRRSV-VR2332减毒活疫苗不影响猪瘟疫苗和猪圆环病毒2型灭活疫苗诱导的抗体产生被引量：1
- 2021年
- 本研究拟评估仔猪接种猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗对猪圆环病毒病疫苗、猪瘟疫苗免疫的干扰情况,并分析不同免疫方式对仔猪生长性能的影响,以期为探究PRRSV减毒活疫苗与PCV2、CSF疫苗的联合免疫提供数据参考。本研究先以100头仔猪为研究对象,将其随机分为A、B、C、D 4组。其中A组仔猪免疫PRRSV减毒活疫苗7 d后免疫PCV2疫苗;B组仔猪同期分点注射PRRSV减毒活疫苗和PCV2疫苗;C组仔猪仅免疫PCV2疫苗;D组仔猪仅免疫PRRSV减毒活疫苗。另外再筛选100头仔猪,随机分为E、F、G、H 4组。E组仔猪于免疫PRRSV减毒活疫苗12 d后免疫CSF疫苗;F组仔猪同期分点注射PRRSV减毒活疫苗和CSF疫苗;G组仔猪仅免疫CSF疫苗;H组仔猪仅免疫PRRSV减毒活疫苗。免疫4周后,测定仔猪血清中相关抗体水平。同时,称量免疫前后各组仔猪的体重,计算不同免疫方案仔猪的平均日增重。结果表明:A~D组中,A组和B组仔猪在免疫4周后均产生了较高水平的PRRSV及PCV2抗体,且A组抗体水平略高于B组。C组仔猪仅产生了PCV2抗体,D组仔猪产生了较高水平的PRRSV抗体。E~H 4组中,E组和F组仔猪均产生了较高水平的PRRSV及CSFV抗体。G组仔猪仅产生了高水平的CSFV抗体,H组仔猪仅产生了高水平的PRRSV抗体。A、B、C、D 4组中B组仔猪的平均日增重最高;而E、F、G、H 4组中E组仔猪的平均日增重显著高于其他3组。PRRSV减毒活疫苗与PCV2疫苗或CSF疫苗同期分点免疫、免疫PRRSV减毒活疫苗一段时间后再免疫PCV2或CSF疫苗均能诱导仔猪产生高水平的抗体;在体液免疫方面,PRRSV减毒活疫苗免疫与否均未对另外二种疫苗表现出明显的干扰作用。在仔猪28日龄时同期分点免疫PRRSV减毒活疫苗与PCV2疫苗,12 d后再免疫CSF疫苗的免疫方案不仅能诱导仔猪产生高水平抗体,还可以使仔猪具备较高的平均日增重。
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- 关键词：猪圆环病毒疫苗猪瘟疫苗
