毛珊珊
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:华南农业大学林学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省林业科技创新专项资金项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 松墨天牛包囊蛋白基因的克隆及表达特性分析被引量:4
- 2016年
- 松墨天牛Monochamus alternatus是危害马尾松树重大蛀干害虫,也是松材线虫的主要传播媒介昆虫,对我国松林资源构成严重威胁。用c DNA末端快速扩增(RACE)方法克隆了松墨天牛ERP基因(Mal ERP),Gen Bank登录号为KF357881.1。该基因含有一个长为864 bp的开放阅读框,编码287个氨基。同源性分析表明,Mal ERP与光肩星天牛Anoplophora glabripennis ERP的同源性最高,达到79%;与赤拟谷盗Tribolium castaneum的同源性为45%。实时荧光定量PCR分析显示,Ma ERP在松墨天牛3龄幼虫的脂肪体、马氏管、中肠、体壁、血淋巴和头部中均有表达,在脂肪体中的表达量最高;Ma ERP经溴氰菊酯、磷化铝、B t、印楝素、绿僵菌胁迫后,上调表达;但经阿维菌素胁迫后,下调表达。本研究为进一步研究Mal ERP基因在松墨天牛防御过程中的作用奠定基础,为探索松墨天牛免疫系统与分子毒理互作关系提供参考。
- 毛珊珊吴华俊林同
- 关键词:松墨天牛基因表达农药胁迫
- 同安钮夜蛾核型多角体病毒Opdi108基因的分子克隆和细胞定位(英文)被引量:1
- 2012年
- 【目的】同安钮夜蛾Ophiusa disjungens(鳞翅目,夜蛾科)是危害桉树的主要害虫之一。同安钮夜蛾核型多角体病毒(OpdiNPV)是从O.disjungens中分离到的新病毒。本研究主要目的是从分子水平上了解该病毒。【方法】对一条PstⅠ的酶切片段进行了克隆、测序和分析。【结果】在基因数据库中通过对碱基序列的比对,发现了一个Ac108的同源基因,命名为Opdi108(GenBank登录号为EU732666)。该基因的开放阅读框含有225对碱基,其编码蛋白与其他已知杆状病毒同源物有16%~37%的氨基酸序列一致性。在起始密码子ATG上游有一个晚期启动子TAAG。C末端含有His-tag的Opdi108基因在大肠杆菌中Escherichiacoli进行了表达,融合蛋白的分子量为28.7kDa。以荧光蛋白EGFP为标记物,构建了Opdi108与EGFP的重组体,利用Bac-to-Bac表达系统实现了与AcMNPV的重组,用该重组病毒vEGFP-Opdi108感染斜纹夜蛾Trichoplusiani细胞。感染24和72h后分别用共聚荧光显微镜观察,发现Opdi108定位在细胞质内。【结论】本研究从分子生物学角度研究OpdiNPV,为进一步利用该病毒防治包括同安钮夜蛾在内的害虫,以及构建重组杀虫剂等奠定基础。
- 常润磊刘莉韦春梅郎国俊许雯毛珊珊林同
- 关键词:核型多角体病毒细胞定位