张永武
- 作品数:4 被引量:8H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建及鉴定被引量:6
- 2016年
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了猪圆环病毒2型Cap蛋白,并对该蛋白的生物活性进行鉴定。PCR获得Cap基因并克隆入pFastBacTMⅠ载体质粒,重组质粒pFastBacⅠ-Cap转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒rBacmid-Cap。以脂质体法将重组杆粒转染对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒。电镜下可见典型的杆状病毒,SDS-PAGE显示,重组病毒表达的Cap蛋白约28ku,间接免疫荧光试验证明,Cap蛋白良好表达并具有免疫反应性,为猪圆环病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 张永武连海张锦霞张静远刘晔张守峰扈荣良
- 关键词:猪圆环病毒2型CAP蛋白杆状病毒表达系统
- 水貂出血性肺炎、多杀性巴氏杆菌病、肺炎克雷伯杆菌病三联灭活疫苗的制备及其质量评价研究被引量:1
- 2016年
- 为评价水貂出血性肺炎、多杀性巴氏杆菌病、肺炎克雷伯杆菌病三联灭活疫苗的质量,本研究对该三联灭活疫苗进行了疫苗的单剂量、单剂量重复和超剂量免疫的安全性试验,最小免疫剂量、免疫期等效力试验以及疫苗保存期试验。结果表明,该三联灭活疫苗对2月龄以上水貂安全,最小免疫保护剂量为0.5 m L(绿脓杆菌、多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯杆菌含量分别为3.0×10^9 cfu/m L、3.0×10^9 cfu/m L和2.5×10^9 cfu/m L),免疫剂量为1.0 m L/只时即可为水貂提供8个月的完全免疫保护,疫苗在2℃-8℃贮藏15个月仍保持原有的免疫保护效率。本研究研制的该三联灭活疫苗使用安全,对受试动物能够提供100%的免疫保护。本研究为水貂出血性肺炎、多杀性巴氏杆菌病和肺炎克雷伯杆菌病的预防和该三联灭活疫苗的正确使用提供了参考依据。
- 张永武刘晔张国军吴金高玉龙张菲张中洋张守峰扈荣良
- 关键词:三联灭活疫苗保存期
- 狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒中的表达及鉴定被引量:1
- 2016年
- 采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒BD06株的磷蛋白(P)基因片段,将其插入杆状病毒穿梭载体pFastBac 1获得的pFastBac 1-P重组质粒,转化E.coli DH10Bac成功构建出杆状病毒表达质粒Bacmid-P,用脂质体介导Bacmid-P转染Sf9细胞获得重组杆状病毒(AcMNPV-P)。经SDS-PAGE、Western blot和直接免疫荧光分析鉴定,BD06-P蛋白在杆状病毒中成功表达,且具有良好的反应原性,为进一步研究狂犬病病毒磷蛋白的结构和功能奠定了基础。
- 郑光来卢晓冉张永武张静远陈腾王东方严妍张守锋扈荣良
- 关键词:狂犬病病毒杆状病毒表达系统磷蛋白
- 水貂A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及免疫原性研究
- 2016年
- 从送检的疑似多杀性巴氏杆菌感染的水貂中分离到1株病原菌,经培养特性、形态观察、生化试验、PCR鉴定等,确定RC1108菌株为血清A型多杀性巴氏杆菌。水貂回归试验表明,该菌株毒力较强,最小致死剂量为2.5×10^8CFU。制备的灭活疫苗在含菌量为1.5×10^9 CFU/m L时,即可在免疫后第21天提供保护。表明,该分离菌株可以作为水貂血清A型多杀性巴氏杆菌疫苗的候选株。
- 张永武路舒越刘晔张国军吴金高玉龙张菲张中洋张守峰扈荣良
- 关键词:毒力免疫原性