扈荣良
- 作品数：364 被引量：920H指数：13
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 犬瘟热病毒疫苗株H蛋白基因片段的克隆与表达及表达产物抗原性的初步鉴定被引量：2
- 2008年
- 根据发表的犬瘟热病毒(CDV)参考株Ondetstepoort的序列设计一对引物,以CDV感染的Vero细胞总RNA为模板,经RT-PCR扩增得到549bp DNA片段,将该片段以正确的阅读框架定向克隆于pGEX-4T-1中,然后将重组质粒转化宿主菌RosettaTM,在37℃、1.0mmol/L IPTG诱导下外源基因获得良好表达。经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白约46ku,与预期值一致。Western blot试验显示,CDV免疫的小鼠血清可特异的识别该重组蛋白,表明该重组蛋白具有一定的免疫原性。
- 王好钱爱东刘晔扈荣良
- 关键词：犬瘟热病毒H基因WESTEMBLOT
- 我国的蜱媒传染病
- 近20年来世界上已发现30余种新病原,其中包括多种虫媒病毒(arbovirus)。虫媒病毒已严重危害世界公共卫生安全,引起人畜患病或死亡,造成巨大经济损失。目前发现100余种虫媒病毒可引起人畜疾病,我国仅证实有4种,即乙...
- 刘全扈荣良
- 关键词：传染病
- 文献传递
- 动物抗病毒感染基因工程育种研究进展被引量：3
- 1994年
- 动物抗病毒感染基因工程育种研究进展殷震，扈荣良（长春农牧大学兽医研究所长春１３００１２）动物传染病，尤其是动物病毒性传染病，严重威胁畜禽健康。一些很早发现的传染病迄今未能有效控制。随着集约化饲养和养殖条件的改变，近年来又相继发生和流行一些新的传染病。...
- 殷震扈荣良
- 关键词：动物抗病毒基因育种
- 组织型纤溶酶原激活剂缺失突变体基因转染细胞株
- 本发明是一种组织型纤溶酶原激活剂缺失突变体基因转染细胞株，它是以脂质体介导法将含有t-PA经G418及DMEM的双重选择后，获得其稳定表达细胞株CHO-dhfr<Sup>-</Sup>pCSRA(保藏号：CGMCC No...
- 王玉炯李敏扈荣良罗惠霞
- 文献传递
- 鲤鱼春季病毒出血症病毒G基因在昆虫细胞中的表达与鉴定
- 2012年
- 采用RT-PCR方法扩增鲤鱼春季病毒出血症病毒(SVCV)的糖蛋白(G)基因,将PCR产物插入到杆状病毒转移载体pFastBac 1中,获得重组转移载体pFastBac 1-G,将其转化入含有Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,经3种抗性和蓝白斑筛选,获得含有G基因的重组穿梭质粒rBacmid-G。在脂质体转染试剂的介导下,将rBacmid-G转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。提取重组杆状病毒基因组,用M13引物PCR鉴定。对重组杆状病毒感染的sf9细胞,通过电镜观察、SDS-PAGE、Western blotting进行检测,结果表明,重组蛋白在sf9细胞中获得正确表达,相对分子质量约58 000,与鼠抗SVCV阳性血清具有良好的反应原性。本试验为研究鲤鱼春季病毒出血症病毒G蛋白的生物学活性和亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 李月红付云红陈奇王永志扈荣良
- 关键词：G基因杆状病毒表达
- 犬2型腺病毒E1转化细胞系的特性研究被引量：1
- 2003年
- 对筛选到的一株CAV-2 E1转化细胞(DK/E1)进行了初步的特性研究。以DK细胞为对照,观察到转化细胞的形态与DK细胞有明显区别,细胞变长,易聚集生长。通过测定DK及DK/E1细胞分别在2％、5％和10％牛血清培养基中的生长曲线,结果发现DK/E1细胞的生长速度比DK细胞快。用蚀斑和TCID50测定了病毒在DK和DK/E1细胞上的病毒滴度,结果表明DK/E1细胞产生的病毒蚀斑比DK细胞的大,TCID50测得的病毒滴度比DK细胞产生的病毒滴度高。CAV-2全基因组DNA对DK/E1细胞和DK细胞的转染试验结果表明,5μg和10μg的CAV-2DNA转染的DK/E1细胞,分别在转染后第14天和第11天均出现了典型的腺病毒细胞病变,而相同量CAV-2 DNA转染的DK细胞未出现病变,说明DK/E1细胞有助于CAV-2 DNA的复制和病毒粒子的包装。在DK/E1细胞内的重组试验表明,DK/E1细胞也有利于重组病毒的产生。以上转化特性在DK/E1细胞传至80代时仍保持不变,说明本试验获得了一株CAV-2 E1基因的转化细胞系。
- 邱薇夏咸柱范泉水扈荣良王雷高玉伟孙阳尹惠琼李刚山
- 关键词：犬2型腺病毒病毒载体转染
- 精原干细胞体内转染途径建立转基因小鼠的可行性研究被引量：9
- 1997年
- 目前,生产转基因动物的难度很大,成功率很低,这是因为制备转基因动物的主要方法是向受精卵原核中注射DNA。这种方法有其弱点,首先作为外源基因受体细胞的受精卵数量有限;其次外源基因的整合和表达的筛选工作不能在细胞水平上进行,只能在子代动物出生后,即在个体水平上进行选择,这就增加了工作量,而且周期长,成功率低,成本大,在大动物上实施起来尤其困难。这就要求我们找到一种更为有效而又简捷的转基因动物的制备方法。
- 赖良学张学明安靓岳军明扈荣良殷震
- 关键词：精原干细胞转基因动物体内转染外源基因小鼠曲细精管
- 反转录病毒体内转染精原干细胞介导的转基因方法
- 本发明涉及一种转基因方法，尤其是涉及以重组反转录病毒为介导体内转染精原干细胞的转基因方法。将目的基因克隆到反转录病毒载体，转化PA317细胞，收集并浓缩由阳性细胞克隆产生的重组病毒，将重组病毒注射到幼龄小鼠的曲细精管内，...
- 扈荣良张守峰王凤阳
- 文献传递
- 人组织型纤溶酶原激活剂c-DNA乳腺定位表达载体的构建及其在兔乳腺中的表达被引量：2
- 1997年
- 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种用于治疗血栓性心血管疾病的特效药物,它能激活血纤维蛋白酶原,后者使血块溶解,所以这种药物的开发为社会普遍重视。t-PA在人体血液中的含量极低,很难从天然材料中提取。如果应用转基因技术,将人t-PA基因转入动物体内,使其在乳腺中高效表达,从乳汁中提取大量的t-PA,将具有可观的经济效益和社会效益。 转基因动物建立的前提条件是构建乳腺定位高效表达载体。为此,我们先将本所保存的t-
- 赖良学王凯付殿国黄伟民岳军明李银聚扈荣良殷震
- 关键词：人组织型纤溶转基因动物
- 半定量检测狂犬病病毒含量的双抗体夹心直接ELISA方法的研究被引量：1
- 2011年
- 为了实现在狂犬病疫苗生产中抗原含量的快速测定,试验以狂犬病高免血清为包被抗原,捕获抗体为针对病毒核蛋白的酶标单克隆抗体,标准品为经细胞半数感染量(TCID50)准确定量的病毒液,建立一种能够定量检测狂犬病病毒的双抗体夹心直接ELISA方法。结果表明:试剂盒的最低检测限为1.0×106 TCID50/mL,线性检测范围为1.0×106～1.0×109 TCID50/mL,标准曲线的平均批内变异系数为4.9%,平均批间变异系数为6.1%。
- 李金秋扈荣良任文陟刘颖
- 关键词：狂犬病病毒抗原检测
