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刘晔: 作品数：126 被引量：289H指数：8; 供职机构：吉林大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学语言文字更多>>

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我国狂犬病预防和控制建议被引量：33: 2012年; 1狂犬病及流行概况狂犬病（Rabies）是一种由狂犬病病毒（Rabiesvirus，RABV）感染引起的高度致死性脑脊髓炎^[1]。所有种类的温血动物，不分年龄大小，均对狂犬病易感。犬的狂犬病俗称疯狗病（MadDogDisease），能使患病犬的中枢神经系统兴奋，发作时往往表现攻击行为，咬伤人或其他种类动物个体，造成犬群或犬科野生动物狂犬病的外溢，从而导致人、家畜（如牛、马、羊、猪、驴、鹿、水牛等）和其他温血动物（如猫、狐、黄鼬、鼬獾、猪獾、狼、浣熊、臭鼬、鼠等）的感染^[2-3]。; 扈荣良张守峰刘晔; 关键词：狂犬病病毒中枢神经系统兴奋野生动物脑脊髓炎

广东省猪圆环病毒2型基因的克隆与序列分析被引量：3: 2016年; 根据Gen Bank已发表的猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）全基因组序列,设计1对特异性引物,对广东省不同地区规模化猪场采集的临床诊断为断奶仔猪多系统消耗综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）的组织病料进行了PCV2基因克隆和序列分析。结果表明,采集的PMWS病料均可扩增出PCV2完整基因序列,与Gen Bank已发表的PCV2参考毒株序列核苷酸同源性达93.7%-99.8%,亲缘关系密切。其中10个PCV2基因全长1767 bp,属于PCV2b亚型,1个PCV2基因全长1768 bp,属于PCV2a亚型。; 严妍宫婷张守峰赵敬慧刘晔王颖张菲张锦霞扈荣良; 关键词：猪圆环病毒2型基因分析流行毒株

牛乳铁蛋白肽转基因小鼠的构建被引量：1: 2013年; 目的:探讨牛乳铁蛋白肽在转基因鼠乳汁中的表达及其抑菌活性。方法:将实验室构建并保存的包含山羊β-酪蛋白基因启动子和牛乳铁蛋白肽基因的乳腺特异表达载体PI-bcp-LfcinB,用Xho I和Nru I双酶切,得到含有全部表达盒的显微注射DNA片段,采用常规显微注射技术获得转基因小鼠。并通过对泌乳期转基因雌鼠乳腺组织的RT-PCR检测,确定了牛乳铁蛋白肽在mRNA水平的表达,同时利用琼脂板扩散法检测了转基因鼠乳汁中表达产物的抑菌活性。结果:获得了牛乳铁蛋白肽转基因小鼠,且转基因小鼠乳汁中能够表达具有抑菌活性的牛乳铁蛋白肽。结论:通过转基因动物乳腺可以获得具有生物活性的牛乳铁蛋白肽,为进一步研究抗菌肽转基因牛、培育抗乳房炎奶牛新品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。; 张锦霞范志强刘晔张守峰杨洋王颖张菲扈荣良; 关键词：显微注射转基因鼠

表达Irkut病毒糖蛋白的重组复制缺陷型人5型腺病毒的构建与小鼠免疫试验: 2015年; 本研究利用复制缺陷型人5型腺病毒载体,表达了我国蝙蝠狂犬病毒分离株IRKV-THChina12的G基因,并将重组病毒命名为rAd5-IRKV-G。Western blot和间接免疫荧光试验证明,IRKV-THChina12的G基因在重组腺病毒感染的293AD细胞中得到表达。将rAd5-IRKV-G对小鼠分别进行腹腔和肌肉免疫,同时设立wt-rAd5对照,结果显示两种免疫方式均能诱导小鼠产生抗IRKV中和抗体,且rAd5-IRKV-G组与wt-rAd5组差异显著(P≤0.05),腹腔免疫组与肌肉免疫组无显著差异(P>0.05)。结果表明,Irkut病毒糖蛋白可以作为疫苗抗原,而且构建的重组腺病毒具有较好的免疫原性。; 王玉莹陈奇刘晔扈荣良张乐萃; 关键词：狂犬病毒 G基因腺病毒免疫

从流行毒株的系统发生看中国目前狂犬病流行的主要特征被引量：8: 2012年; 以2006~2012年本实验室狂犬病病毒分离株核蛋白基因完整核苷酸序列和GenBank收录的主要数据为基础,通过构建系统发生树和比对病毒分离株相互间的同源性,对中国狂犬病流行特征进行分析。结果显示,目前涉及中国17个狂犬病主要流行省区的62个狂犬病病毒代表流行株,均为基因1型,但在系统发生树上可分为i、ii、iii、iv、v共5个基因群,群内同源性91.4%~99.9%,群间同源性84.5%~90.1%。其中,i、ii群占国内新分离株的绝大多数,为2个主要流行基因群。i群遍布各主要流行省区,主要为来源于犬的分离株。ii群主要分布于南方省区,迄今分离到的多个鼬獾狂犬病病毒株在系统发生上也属于ii群。iii群仅见于广西壮族自治区、云南省两地,与东南亚国家狂犬病分离株同源性高达97.7%。iv群的地区分布不规律,在中国东北、中原、东南和西部地区均有零星报道,分离株较少。v群近年来仅偶见于内蒙东北部及黑龙江省与俄接壤地区,与俄罗斯远东及韩国流行株同源性高达98.5%。综上,中国狂犬病流行以犬间传播为主,野生动物狂犬病的流行日益严重,东北和西南地区存在境外狂犬病传入。犬等动物种群免疫覆盖率低应是狂犬病持续传播的主因。; 张守峰刘晔赵敬慧张菲陈奇王颖张锦霞扈荣良; 关键词：狂犬病流行病学

青光眼术后应用爱丽滴眼液的临床疗效观察: 目的:研究青光眼术后应用爱丽滴眼液的临床疗效。方法:在本实验中,选取青光眼患者60人共114只眼,按手术方法分成小梁切除术A组（60只眼）及周边虹膜切除术B组（54只眼）,A组随机分成A1组（30只眼）及A2组（30只眼...; 刘晔; 关键词：青光眼爱丽滴眼液泪膜; 文献传递

利用IX蛋白展示狂犬病病毒保护性抗原的犬II型腺病毒活载体重组疫苗: 一种利用IX蛋白展示狂犬病病毒保护性抗原的犬II型腺病毒活载体重组疫苗，涉及利用犬II型腺病毒不同结构蛋白的特性，分别展示狂犬病病毒保护性抗原或抗原表位的重组疫苗，在其结构蛋白基因的疏水性位点利用IX蛋白插入狂犬病病毒保...; 扈荣良张守峰刘晔李忠

我国狂犬病流行毒株JX08-45适应细胞培养后的生物学特性: 2012年; 目的鉴定我国狂犬病流行毒株JX08-45适应细胞培养后(命名为JX08-45CC株)的生物学特性。方法通过全基因组序列分析比对、小鼠脑内和外周攻毒试验和免疫原性试验,分别对JX08-45CC株的基因组特点、毒力和免疫原性进行鉴定。结果 JX08-45CC株的基因组序列与JX08-45株比对,共出现16个核苷酸突变点和7个氨基酸突变点,其中6个氨基酸变异发生在G蛋白(333位精氨酸未改变)编码区,L蛋白仅有1个氨基酸突变;在G蛋白氨基酸变异中,4个突变序列在其他细胞适应毒株CVS-11、CTN-1、Nishigahara、SAG2、Flury-LEP和SRV9中也普遍存在。JX08-45CC株培养滴度≥107TCID50/ml时,脑内接种小鼠的致死率为100%,滴度为102～106TCID50/ml时,脑内接种小鼠的致死率为20%～80%;滴度为105～108TCID50/ml时,外周肌肉接种小鼠,致死率为10%～70%;脑内和外周攻毒小鼠的潜伏期均为7～9 d,并于发病后24～48 h死亡。JX08-45CC株与狂犬病病毒CVS-11、ERA、SRV9和Flury-LEP株的中和抗体滴度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论已对JX08-45CC株的基因组序列、毒力和免疫原性等生物学特性进行了鉴定,为开发具有我国自主知识产权的兽用狂犬病灭活疫苗候选株奠定了基础。; 刘晔房丽君赵敬慧张守峰张菲扈荣良; 关键词：狂犬病病毒细胞培养突变生物学特性

狂犬病病毒糖蛋白在毕赤酵母GS115中的表达及产物特性研究: 2014年; 本试验旨在利用毕赤酵母系统表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(GP)基因,并对重组蛋白进行反应原性研究。构建重组表达质粒pPiczαA-G,线性化后电转入酵母GS115中,经平板初筛及PCR鉴定正确后命名为pPiczαA-G-GS115。重组菌经1.0%甲醇诱导表达,对目的蛋白进行双抗体夹心ELISA检测、SDS-PAGE电泳、Western blot分析。结果表明,ELISA检测诱导72 h重组蛋白表达量最高;SDS-PAGE分析显示目的蛋白相对分子量约为65 kD,与理论值相符。Western blot结果表明,重组蛋白可与RV阳性血清发生特异性反应。本试验为进一步研制狂犬病病毒ELISA抗体诊断试剂盒奠定基础。; 刘国强连海袁颖烁王玉莹张守峰刘晔张乐萃扈荣良; 关键词：狂犬病病毒糖蛋白毕赤酵母反应原性

狂犬病毒中和线性表位重组犬腺病毒2型载体的构建被引量：2: 2008年; 本试验成功构建了表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区3个中和线性表位的重组犬腺病毒2型两个重组质粒。引用相关文献已报道的狂犬病病毒糖蛋白膜外区的3个中和线性表位基因,通过有柔性氨基酸将其3个表位基因相连。将重叠延伸PCR获得3个串联表位基因片段克隆入含犬腺病毒2型YCA18株纤突头部HI环的中间载体pBluescript II KS(+)中,然后用SalⅠ和PacⅠ将中间载体中含3个串联表位的纤突部分回收,克隆至缺失纤突部分的犬腺病毒2型全基因组重组质粒pPloyII-CAV-2及pPloyII-CAV-2-CGS中。经鉴定成功获得在犬腺病毒2型纤突头部HI环处插有狂犬病毒3个串联表位的两个重组质粒,分别命名为pPoly II-CAV-2-RG和pPoly II-CAV-2-CGS-RG。经软件对犬腺病毒2型纤突蛋白的构象分析表明,在其HI环插入外源抗原表位基因不影响其免疫原性。本试验为进一步研制多抗原表位展示性重组疫苗、新型狂犬病疫苗奠定基础。; 徐慧娟王晓虎李忠刘晔张守峰王颖袁子国徐振波扈荣良; 关键词：狂犬病毒糖蛋白

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