牛慧
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌自转运三聚体VtaA1蛋白的表达及其免疫保护效力研究被引量：1
- 2014年
- 为鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)自转运三聚体VtaA1蛋白免疫保护效率,本研究以血清5型HPS株基因组为模板,通过PCR方法扩增VtaA1编码基因的N-端、C-端和中间区段,并将各基因片段克隆于表达载体pET-28a(+)中构建重组表达质粒pET-VtaA1N、pET-VtaA1C和pET-VtaA1M,将重组质粒分别转化到E.coli BL21(DE3)感受态中,在22℃和37℃条件下经IPTG诱导表达,目的蛋白均以包涵体形式存在。VtaA1M和VtaA1C用亲和层析纯化,但VtaA1N无法纯化。将纯化后的VtaA1M和VtaA1C分别免疫5周龄昆明小鼠并制备免疫血清,ELISA检测结果显示VtaA1M和VtaA1C血清效价分别在1∶105和1∶404以上,表明VtaA1M和VtaA1C具有良好的免疫原性。免疫的小鼠分别用HPS血清5型分离株攻毒,结果显示VtaA1M和VtaA1C免疫的小鼠对该强毒株的攻击均能够提供60%的保护,表明VtaA1M和VtaA1C可以作为亚单位疫苗的有效成分。
- 刘娇崔宁周泷牛慧张艳禾李刚谢芳唐月敏倪宏波王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌原核表达免疫保护
