崔宁
- 作品数:6 被引量:4H指数:1
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur三基因缺失弱毒株的构建及生物学特性研究被引量:1
- 2014年
- 为进一步致弱胸膜肺炎放线杆菌(APP)毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8ΔclpP/ΔapxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖负向筛选的方法,再将铁摄取调节基因fur缺失,构建了无抗生素标记的三基因缺失突变株S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur。生物学特性研究表明,该缺失株与野生株S8相比,体外生长速度未发生明显变化,但溶血能力显著下降,与亲本株相比,铁摄取利用轻微降低。致病力试验结果表明,仔猪经气管接种该缺失株毒力显著低于野生型菌株,并且1×109cfu/mL剂量对猪不产生明显的呼吸道症状和肺部病变,表明该缺失株高度安全,可以作为APP基因缺失弱毒活疫苗的候选株。
- 周泷谢芳刘娇崔宁李艳玲牛惠李刚张艳禾王春来
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌基因缺失致弱
- 副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选与鉴定
- 2014年
- 为筛选副猪嗜血杆菌(HPS)种特异性的基因,采用抑制消减杂交(SSH)技术,以HPS DNA为Tester,以猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA为Driver,通过2轮消减杂交和2次PCR扩增,将第2次PCR产物连接pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆后测序,经Southern Blot验证和BLAST分析,获得6个HPS特异基因片段。研究为建立副猪嗜血杆菌基因鉴别诊断方法及ELISA抗原靶标的鉴定奠定基础。
- 李继昌崔宁刘娇周泷张艳禾谢芳李刚牛惠王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌抑制消减杂交
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌'茵影'疫苗免疫效力评价
- 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的以肺出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变的高度接触性传染病,国内主要使用灭活疫苗预防和控制本病.本实验首先...
- 李刚崔宁周泷谢芳张艳禾王春来
- 关键词:猪传染性胸膜肺炎放线杆菌免疫效力评价
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析被引量:2
- 2013年
- 细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。
- 李艳玲李建军周泷崔宁刘娇张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌细胞毒性
- 副猪嗜血杆菌自转运三聚体VtaA1蛋白的表达及其免疫保护效力研究被引量:1
- 2014年
- 为鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)自转运三聚体VtaA1蛋白免疫保护效率,本研究以血清5型HPS株基因组为模板,通过PCR方法扩增VtaA1编码基因的N-端、C-端和中间区段,并将各基因片段克隆于表达载体pET-28a(+)中构建重组表达质粒pET-VtaA1N、pET-VtaA1C和pET-VtaA1M,将重组质粒分别转化到E.coli BL21(DE3)感受态中,在22℃和37℃条件下经IPTG诱导表达,目的蛋白均以包涵体形式存在。VtaA1M和VtaA1C用亲和层析纯化,但VtaA1N无法纯化。将纯化后的VtaA1M和VtaA1C分别免疫5周龄昆明小鼠并制备免疫血清,ELISA检测结果显示VtaA1M和VtaA1C血清效价分别在1∶105和1∶404以上,表明VtaA1M和VtaA1C具有良好的免疫原性。免疫的小鼠分别用HPS血清5型分离株攻毒,结果显示VtaA1M和VtaA1C免疫的小鼠对该强毒株的攻击均能够提供60%的保护,表明VtaA1M和VtaA1C可以作为亚单位疫苗的有效成分。
- 刘娇崔宁周泷牛慧张艳禾李刚谢芳唐月敏倪宏波王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌原核表达免疫保护
- 副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选及PCR诊断方法的建立
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, Hps)是革拉瑟氏病的致病菌,属于巴斯德菌科家族成员之一,可引发猪多发性浆膜炎和关节炎。常感染早期断奶仔猪,甚至能从健康猪的上呼吸道分离出。Hps常与其它病原菌发...
- 崔宁
- 关键词:副猪嗜血杆菌抑制消减杂交PCR检测
- 文献传递