李凡
- 作品数：6 被引量：69H指数：4
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：四川省科技计划项目国家科技支撑计划国家民委科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- A群牛轮状病毒的分子生物学研究进展被引量：11
- 2017年
- 牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)是犊牛腹泻的重要病原之一,了解病毒的分子结构和功能以及遗传进化,对该病毒的检测方法和防控具有重要意义。论文对近年来在A群BRV的重要结构蛋白和非结构蛋白的分子特征和功能的研究进展做一综述。
- 李凡周芳岳华汤承
- 关键词：牛轮状病毒分子特征遗传进化
- 一起肉鸡滑液囊支原体病的诊断
- 2020年
- 1发病情况2018年11月27日,四川彭山某存栏量为2000羽的三黄品种肉鸡场,70日龄左右部分鸡的腿关节陆续出现异常,主要表现为跗关节、爪垫、龙骨滑液囊肿胀、皮下组织增厚,有的鸡跗关节周围长出大小不一的水泡,导致鸡不能正常站立和行走,至90日龄,发病率达12%,但死亡率较低。主诉:该鸡场未免疫滑液囊支原体疫苗。曾怀疑是由大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌等细菌,以及鸡病毒性关节炎病毒引起的关节炎,用抗菌素治疗发病鸡,虽有轻微好转,但陆续有新的病例出现。
- 陈云霞张焕容李凡
- 关键词：跗关节肉鸡场抗菌素治疗滑液囊支原体鸡病毒性关节炎病毒
- 牦牛轮状病毒VP6基因序列分析及RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：34
- 2016年
- 轮状病毒(rotavirus,RV)VP6基因是RV的主要分子检测靶点,但该基因的点突变会影响RV的分子检测。本试验的目的是在研究牦牛RVVP6基因遗传变异的基础上,建立检测牦牛RV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。采用Prime 5.0设计引物,从30个牦牛腹泻样本中扩增得到14个位于931—1 338bp牦牛RVVP6基因片段。序列分析结果发现,与牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)相比,牦牛RVVP6基因在931—1 110bp间出现多处点突变,而在1 100—1 338bp之间序列高度保守。据此设计检测引物,成功建立了检测牦牛RV的RTPCR方法,具有良好的特异性和稳定性,只扩增出牦牛RV及BRV的特异片段,对其他无关病原无扩增;检测下限为0.45pg·μL^(-1),灵敏性较好。所建立方法对牦牛RV的检出率明显优于现有检测BRV的RT-PCR方法,为牦牛RV病的诊断和流行病学调查提供了可靠的方法;对BRV的检出也与其他方法具有很好的符合率,也可以用于BRV的检测。对234份犊牦牛腹泻粪便样本的RV检出率:西藏为60.00%(36/60)、青海为95.00%(57/60);四川为85.19%(46/54);云南为90.00%(54/60),证明牦牛RV感染是当前导致犊牦牛腹泻的重要原因。
- 周芳岳华张斌李凡陈曦汤承
- 关键词：牦牛轮状病毒VP6基因点突变
- 基于恒温隔绝式荧光PCR技术现场检测牛轮状病毒方法的建立及应用被引量：16
- 2017年
- 轮状病毒(rotavirus,RV)是犊牛腹泻的重要病因,笔者旨在建立基于恒温隔绝PCR(insulated isothermal PCR,iiPCR)技术现场检测牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的方法。根据BRV和牦牛RVVP6基因序列,设计合成引物和探针,通过优化反应体系,配合商品化PetNAD核酸萃取试剂盒,建立了检测BRV和牦牛RV的iiPCR方法。结果显示该方法只能检出BRV和牦牛RV,不能检出牛冠状病毒、牛星状病毒、牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛大肠杆菌、牛沙门菌、牛艾美尔球虫、牛瑞氏隐孢子虫等无关病原;检测下限为96.6copies·μL-1,重复性好;对30份牛腹泻样本和30份牦牛腹泻样本的检测结果表明,本方法对BRV的检出率是33.33%,对牦牛RV的检出率为73.33%,与文献报道的检测BRV和牦牛RV的方法的符合率分别为100%;对2016年四川阿坝藏羌自治州14个牧场的88份犊牦牛腹泻样本RV的检测结果显示RV核酸阳性检出率为98.86%。本研究建立的BRV iiPCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,既可用于BRV检测,又可用于牦牛RV的检测;从核酸提取到报告检测结果仅需1h,操作方便,可现场使用,为BRV的现场快速诊断提供有力的工具。
- 李凡岳华邱莞思张斌黄建德汤承
- 关键词：牦牛轮状病毒VP6基因
- 一起犊牦牛腹泻病的病原学诊断被引量：2
- 2017年
- 四川省若尔盖县某养殖户的犊牦牛出现以腹泻为主要特征的疾病,传播迅速,发病率为100%,为弄清病因,我们采集了6份腹泻样本,分别用Trizol法和酚氯仿法提取腹泻粪便的总RNA和DNA,再用牦牛轮状病毒(RV)、牛冠状病毒(Bco V)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、沙门氏菌(Salmonella)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)特异的PCR方法进行病原检测,结果得出这5种病原的检出数分别为6、0、6、0、5,可见该地区犊牦牛腹泻主要由RV、BVDV和ETEC混合感染引起。
- 李凡阿继严州陈天祥张斌汤承
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒
- 川西地区鸡滑液囊支原体分离株的部分生物学特性及其VlhA基因遗传进化分析被引量：13
- 2020年
- 为了解鸡滑液囊支原体(MS)在川西地区的感染情况,本研究采集15个肉鸡场疑似MS感染的病鸡咽拭子、跗关节和胸部滑液囊样本共75份,对经PCR检测为阳性的样本进行MS分离,并对分离株的主要生物学特性进行研究,以及对分离株的VlhA基因进行遗传进化分析。结果显示,75份样本MS PCR阳性检出率为41.33%(31/75),11个鸡场感染该病,场阳性率为73.33%(11/15);但仅从其中3个鸡场分离到9株MS,分离株菌落与菌体形态与已知MS培养特性相符,各分离株培养浓度为10~4CCU/mL^10~6CCU/mL,分离株以5×10~5CCU接种7日龄SPF鸡胚,鸡胚于接种后7 d^9 d死亡,且分离回收到接种菌株;9株MS分离株VlhA基因的同源性为86.1%~99.9%,与参考株同源性为86.2%~95.4%,其中分离自同一鸡场的7株MS VlhA基因同源性为96.4%~99.9%;分离株VlhA基因遗传进化分析显示,其中分离自两个不同鸡场的两株MS与国内流行株的亲缘关系最近,而分离自另一鸡场的7株MS与中东地区分离的3株MS亲缘关系较近,表明MS在川西地区肉鸡场呈高感染率,MS VlhA基因变异较大。本研究为川西地区MS的进一步研究提供了基础材料和科学依据。
- 李凡张焕容陈云霞
- 关键词：鸡滑液囊支原体
