公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

细胞外信号调节蛋白激酶/钙激活中性蛋白酶快速通路参与介导17-β雌二醇诱导的人乳腺癌细胞增殖被引量：8: 2011年; 目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)/钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)快速(非基因组)信号通路参与介导17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)诱导人乳腺癌MCF-7细胞的增殖。方法:用E2处理MCF-7细胞,需要时以ERK1/2阻断剂PD98059或CANP特异性抑制剂calpeptin预处理MCF-7细胞,应用MTT法检测MCF-7细胞的增殖改变,FCM法检测细胞周期变化,Western印迹法检测细胞总ERK、p-ERK和CANP小亚基Capn4蛋白的表达水平。结果:10-8mol/LE2作用24h可使MCF-7细胞显著增殖(P<0.01),G0/G1期细胞减少,G1/S期转换加速;Calpeptin可显著抑制E2诱导的MCF-7细胞增殖效应(P<0.01),G0/G1期细胞增多,细胞延缓进入S期。E2可快速(10min)诱导MCF-7细胞p-ERK表达上调并持续16h(P<0.01),但对总ERK表达水平无明显影响,PD98059对E2诱导的MCF-7细胞ERK磷酸化具有显著抑制作用(P<0.01)。E2可快速(10min)刺激MCF-7细胞Capn4蛋白表达上调(P<0.01),PD98059或Calpeptin对E2诱导的Capn4蛋白表达均有显著抑制作用(P<0.01)。结论:E2可通过ERK/CANP快速信号通路诱导乳腺癌细胞增殖。; 曹洋王旭东丁姗姗陈腾祥杨莉; 关键词：雌二醇细胞外信号调节激酶体外研究

钙激活中性蛋白酶介导雌激素增强MCF-7乳腺癌细胞的存活力被引量：2: 2013年; 目的探讨雌激素(E2)对MCF-7乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶1(CANP-1)基因表达和CANP蛋白酶活性的影响、以及CANP活性在E2增强细胞存活力中的作用。方法以MCF-7乳腺癌细胞为研究模型、采用RT-PCR法检测mRNA表达、蛋白印迹法观察CANP特异性底物FAK蛋白剪切、血清饥饿诱导细胞死亡、锥虫蓝染色及细胞计数法检测细胞存活力。结果 E2(10 nmol/L)可明显刺激乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调,CANP抑制剂则可显著抑制E2诱导CANP-1基因上调;在无血清培养条件下,E2激活CANP活性及增加细胞存活力(14.3±4.9%,P<0.05),而CANP抑制剂可显著抑制E2诱导CANP激活以及细胞存活力增强(19.2±3.9%,P<0.05)。结论 E2刺激MCF-7乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调并增强CANP活性,后者可能参与介导血清饥饿时E2增强MCF-7细胞的存活力。; 刘晓红王筑婷李阳杨莉雷霆雯王旭东; 关键词：雌激素钙激活中性蛋白酶细胞存活乳腺癌细胞

FAK在雌激素诱导MCF-10A乳腺上皮细胞转化中的表达及其意义被引量：1: 2013年; 目的观察17-β雌二醇(E2)诱导雌激素受体(ER)阴性乳腺上皮细胞MCF-10A转化及伴随的局部黏着斑激酶(FAK)表达变化,探讨FAK在细胞转化中的生物标记意义。方法以ER阴性MCF-10A细胞为研究模型,E2连续刺激模型细胞5周(共传11代)建立转化细胞模型,采用蛋白印迹法检测蛋白表达变化、软琼脂集落形成实验检测非贴壁依赖集落形成、伤口愈合实验检测细胞迁移及细胞胎盼蓝染色计数观察细胞生长。结果 E2连续刺激MCF-10A细胞5周后,细胞生长速度明显增快、接触抑制性消失,细胞迁移显著增快,同时在软琼脂基质中形成集落。在E2诱导细胞转化早期即出现FAK蛋白表达增强及蛋白剪切,但乳腺癌标记分子周期蛋白E表达无明显变化。结论 E2诱导ER阴性MCF-10A乳腺上皮细胞转化中始终伴随FAK表达变化,提示FAK可能成为预测ER阴性乳腺细胞转化的早期生物标记物。; 杨莉李阳朱筑霞王旭东; 关键词：黏着斑激酶乳腺上皮细胞细胞转化

雌二醇通过钙离子/钙激活中性蛋白酶通路诱导乳腺癌细胞迁移及FAK蛋白剪切被引量：6: 2012年; 目的观察雌二醇(E2)诱导MCF-7乳腺癌细胞迁移和局部黏着斑激酶(FAK)蛋白剪切及钙离子(Ca2+)/钙激活中性蛋白酶(CANP)通路在E2效应中的介导作用,探讨E2诱导细胞迁移的信号机制。方法以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为体外研究模型;采用蛋白印迹法分析细胞FAK的蛋白剪切效应;通过伤口愈合实验观察细胞迁移;采用CANP抑制剂(Calpeptin)或胞内钙螯合剂(BAPTA)预处理细胞,观察其对E2诱导细胞迁移及FAK蛋白剪切的影响。结果 E2可明显诱导MCF-7细胞迁移同时FAK出现蛋白剪切,此效应可被Calpeptin或BAPTA预处理显著抑制;E2还可诱导CANP1自身蛋白剪切,也可被Calpeptin或BAPTA显著削弱或阻断。结论 E2可通过细胞内Ca2+/CANP信号通路诱导乳腺癌细胞迁移及FAK蛋白剪切,后者可能在E2诱导的细胞迁移效应中起重要作用。; 武春兰李阳刘晓红侯建美朱筑霞杨莉王旭东; 关键词：雌激素乳腺癌钙离子细胞迁移

钙蛋白酶在乳腺上皮转化细胞对雌激素刺激反应中的作用被引量：5: 2013年; 目的探讨经雌激素(E2)转化的MCF-10A乳腺上皮细胞对E2刺激的敏感性及细胞内钙蛋白酶(CANP)在E2效应中的介导作用,以深入了解E2的信号传导机制。方法以E2转化的MCF-10A乳腺上皮细胞为研究模型、用E2(50 nmol/L)刺激细胞,以蛋白印迹法观察蛋白分子质量变化,以CANP特异性底物局部黏着激酶(FAK)蛋白剪切作为CANP激活的指标,伤口愈合实验观察细胞迁移变化,CANP抑制剂预处理观察CANP在E2效应中的作用。结果转化细胞CANP活性明显高于非转化细胞,表现为前者出现FAK明显蛋白剪切,而后者FAK主要为野生型(125 ku),同时转化细胞迁移明显增强(P<0.01)。E2(10 nmol/L)刺激转化细胞可进一步促进FAK蛋白剪切和细胞迁移(P<0.01),而非转化细胞对E2刺激不敏感。CANP抑制剂-1(ALLN)可有效阻断E2刺激转化细胞FAK蛋白剪切及细胞迁移(P<0.01)。结论转化细胞对E2刺激的敏感性增加,其机制可能与胞内CANP活性增强有关,提示在转化细胞存在活跃的E2-CANP-FAK信号活动。; 杨莉朱筑霞刘晓红胡晓霞王红梅王旭东; 关键词：17Β-雌二醇细胞转化乳腺上皮细胞

利用生物素-链亲和素系统筛选重症急性胰腺炎肝损伤大鼠HMGB1启动子结合蛋白被引量：1: 2014年; 目的:筛选重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肝损伤大鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)的启动子结合蛋白.方法:牛黄胆酸钠胆胰管逆行注射法制备SAP大鼠模型,与对照组同时处死,取肝组织提取细胞核蛋白,PCR扩增末端带生物素标记的HMGB1启动子探针,将核蛋白与HMGB1探针孵育,然后用链亲和素磁珠分离HMGB1启动子-蛋白复合物,分别用0.25 mol/L和1 mol/L NaCl洗脱探针上结合的蛋白,用SDS-PAGE电泳分离样本蛋白,SilverQuest银染试剂染色,比较SAP组和对照组的差异条带并做质谱鉴定.结果:对照组和SAP组共有14条差异条带,质谱鉴定这些差异条带得到H2A、H2B、H3、H4、S100A9转录相关蛋白.结论:该研究筛选到一些SAP肝损伤特异性的HMGB1启动子结合蛋白,对于下一步研究HMGB1在SAP肝损伤过程中的转录调控机制具有重要意义.; 杨莉张仕荣王红梅周晓东; 关键词：重症急性胰腺炎启动子

基于HMGB1在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义的分析: 2013年; 目的分析RCCC的HMGB1表达及其临床意义。方法运用二步免疫法,当DAB开始显色后,进行复染以及脱水,完成脱水之后,即可以进行封片。要保证检测结果的准确性,则应保证每1例患者的标本具有五张切片;在染色的过程中,阴性对照为PBS,阳性对照为已知切片。结果Ⅱ期患者以及Ⅰ期患者的HMGB1阳性水平明显低于Ⅳ期患者以及Ⅲ期患者,P<0.05。结论在估计RCCC患者预后状态以及病情恶变程度时,可以将HMGB1作为分子指标;以便能够正确评估患者预后状况,或者是选择正确的治疗方案,从而有效改善患者病情。; 杨莉张仕荣; 关键词：肾透明细胞癌 HMGB1

全选清除导出

共1页<1>

杨莉

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

杨莉

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈