王红梅 作品数:4 被引量:12 H指数:3 供职机构: 贵阳医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省优秀科技教育人才省长资金项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
氟维司群对乳腺癌细胞迁移及局部黏着斑激酶的影响 被引量:3 2013年 背景与目的:雌激素(estrogen,E2)受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂氟维司群(fulvestrant或ICI182780,ICI)是治疗绝经后妇女乳腺癌的新型药物,而局部粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)与乳腺癌转移密切相关。本研究通过观察E2和ICI单独或联合作用对ER阳性乳腺癌细胞迁移及FAK表达的影响,探讨ICI对肿瘤细胞迁移的作用及其与FAK的关系。方法:采用E邸日性MCF-7乳腺癌细胞为研究模型,以E2(包括酒精,EtOH)和ICI单独或联合刺激细胞,采用蛋白质印迹法(Westernblot)检测蛋白表达及相对分子质量变化,伤口愈合实验检测细胞迁移变化。结果:E2(10nmol/L)和EtOH(0.3%)组均可明显刺激MCF-7细胞迁移(与DMSO组比较,分别增加51.5%和53.6%,P〈0.01),但E2+EtOH组对细胞迁移并无协同作用(与DMSO组比较,增加45.0%)。以ICI(10μmol/L)预处理细胞后再给予E2处理,与对照组比较,细胞迁移增加了(38.9±4.9)%(P〈0.01),与E2组比较减少了(8.32±3.21)%(P〈0.05);ICI单独作用可明显促进细胞迁移(与DMSO组比较,增加19.1%,P〈0.01)。对照组细胞FAK主要为125×10^3和110×10^3两种形式,E2刺激可诱导FAK(125×10^3)呈现时间依赖性蛋白剪切,生成相对分子质量为35×10^3-70×10^3的小分子片段,而ICI预处理可有效阻断E2诱导的p125FAK蛋白剪切反应。结论:ICI单独作用可明显刺激MCF-7乳腺癌细胞迁移,但ICI对E2诱导的MCF-7细胞迁移具有抑制作用,该抑制效应可能与ICI阻断FAK蛋白剪切有关。 刘晓红 李铮 朱筑霞 李阳 王红梅 朱翠萍 王旭东关键词:氟维司群 细胞迁移 雌激素 乳腺癌 钙蛋白酶在乳腺上皮转化细胞对雌激素刺激反应中的作用 被引量:5 2013年 目的探讨经雌激素(E2)转化的MCF-10A乳腺上皮细胞对E2刺激的敏感性及细胞内钙蛋白酶(CANP)在E2效应中的介导作用,以深入了解E2的信号传导机制。方法以E2转化的MCF-10A乳腺上皮细胞为研究模型、用E2(50 nmol/L)刺激细胞,以蛋白印迹法观察蛋白分子质量变化,以CANP特异性底物局部黏着激酶(FAK)蛋白剪切作为CANP激活的指标,伤口愈合实验观察细胞迁移变化,CANP抑制剂预处理观察CANP在E2效应中的作用。结果转化细胞CANP活性明显高于非转化细胞,表现为前者出现FAK明显蛋白剪切,而后者FAK主要为野生型(125 ku),同时转化细胞迁移明显增强(P<0.01)。E2(10 nmol/L)刺激转化细胞可进一步促进FAK蛋白剪切和细胞迁移(P<0.01),而非转化细胞对E2刺激不敏感。CANP抑制剂-1(ALLN)可有效阻断E2刺激转化细胞FAK蛋白剪切及细胞迁移(P<0.01)。结论转化细胞对E2刺激的敏感性增加,其机制可能与胞内CANP活性增强有关,提示在转化细胞存在活跃的E2-CANP-FAK信号活动。 杨莉 朱筑霞 刘晓红 胡晓霞 王红梅 王旭东关键词:17Β-雌二醇 细胞转化 乳腺上皮细胞 钙蛋白酶抑制EGF诱导雌激素受体阴性乳腺癌细胞体外增殖 被引量:3 2015年 目的观察钙蛋白酶对表皮生长因子(EGF)诱导的雌激素受体(ER)阴性乳腺癌细胞增殖的影响。方法体外培养人乳腺肿瘤系MDA-MB-231,经10 ng/m L EGF处理后,用蛋白印迹法检测FAK和CANP1蛋白表达。用CANP抑制剂Calpeptin(CALP)预处理对EGF上述效应的影响;通过集落形成实验检测乳腺癌细胞增殖能力。结果 EGF可诱导FAK蛋白表达上调及蛋白剪切反应(P<0.01),也可诱导CANP1自身蛋白剪切(P<0.05),上述效应可被CALP显著削弱或阻断(P<0.05);EGF还可诱导MDA-MB-231细胞集落形成(P<0.05),此效应也可被CALP预处理显著抑制(P<0.05)。结论 CANP可能成为抑制ER阴性乳腺癌细胞增殖的一个潜在药物作用靶点。 安静 朱筑霞 王红梅 李铮 何艳 陈华妹 王旭东关键词:表皮生长因子 钙蛋白酶 雌激素受体 细胞增殖 利用生物素-链亲和素系统筛选重症急性胰腺炎肝损伤大鼠HMGB1启动子结合蛋白 被引量:1 2014年 目的:筛选重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肝损伤大鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)的启动子结合蛋白.方法:牛黄胆酸钠胆胰管逆行注射法制备SAP大鼠模型,与对照组同时处死,取肝组织提取细胞核蛋白,PCR扩增末端带生物素标记的HMGB1启动子探针,将核蛋白与HMGB1探针孵育,然后用链亲和素磁珠分离HMGB1启动子-蛋白复合物,分别用0.25 mol/L和1 mol/L NaCl洗脱探针上结合的蛋白,用SDS-PAGE电泳分离样本蛋白,SilverQuest银染试剂染色,比较SAP组和对照组的差异条带并做质谱鉴定.结果:对照组和SAP组共有14条差异条带,质谱鉴定这些差异条带得到H2A、H2B、H3、H4、S100A9转录相关蛋白.结论:该研究筛选到一些SAP肝损伤特异性的HMGB1启动子结合蛋白,对于下一步研究HMGB1在SAP肝损伤过程中的转录调控机制具有重要意义. 杨莉 张仕荣 王红梅 周晓东关键词:重症急性胰腺炎 启动子