刘晓红
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
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- 钙激活中性蛋白酶介导雌激素增强MCF-7乳腺癌细胞的存活力被引量：2
- 2013年
- 目的探讨雌激素(E2)对MCF-7乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶1(CANP-1)基因表达和CANP蛋白酶活性的影响、以及CANP活性在E2增强细胞存活力中的作用。方法以MCF-7乳腺癌细胞为研究模型、采用RT-PCR法检测mRNA表达、蛋白印迹法观察CANP特异性底物FAK蛋白剪切、血清饥饿诱导细胞死亡、锥虫蓝染色及细胞计数法检测细胞存活力。结果 E2(10 nmol/L)可明显刺激乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调,CANP抑制剂则可显著抑制E2诱导CANP-1基因上调;在无血清培养条件下,E2激活CANP活性及增加细胞存活力(14.3±4.9%,P<0.05),而CANP抑制剂可显著抑制E2诱导CANP激活以及细胞存活力增强(19.2±3.9%,P<0.05)。结论 E2刺激MCF-7乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调并增强CANP活性,后者可能参与介导血清饥饿时E2增强MCF-7细胞的存活力。
- 刘晓红王筑婷李阳杨莉雷霆雯王旭东
- 关键词：雌激素钙激活中性蛋白酶细胞存活乳腺癌细胞
- 氟维司群对乳腺癌细胞迁移及局部黏着斑激酶的影响被引量：3
- 2013年
- 背景与目的：雌激素（estrogen，E2）受体（estrogen receptor，ER）拮抗剂氟维司群（fulvestrant或ICI182780，ICI）是治疗绝经后妇女乳腺癌的新型药物，而局部粘着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）与乳腺癌转移密切相关。本研究通过观察E2和ICI单独或联合作用对ER阳性乳腺癌细胞迁移及FAK表达的影响，探讨ICI对肿瘤细胞迁移的作用及其与FAK的关系。方法：采用E邸日性MCF-7乳腺癌细胞为研究模型，以E2（包括酒精，EtOH）和ICI单独或联合刺激细胞，采用蛋白质印迹法（Westernblot）检测蛋白表达及相对分子质量变化，伤口愈合实验检测细胞迁移变化。结果：E2（10nmol／L）和EtOH（0．3％）组均可明显刺激MCF-7细胞迁移（与DMSO组比较，分别增加51．5％和53．6％，P〈0．01），但E2＋EtOH组对细胞迁移并无协同作用（与DMSO组比较，增加45．0％）。以ICI（10μmol／L）预处理细胞后再给予E2处理，与对照组比较，细胞迁移增加了（38．9±4．9）％（P〈0．01），与E2组比较减少了（8．32±3．21）％（P〈0．05）；ICI单独作用可明显促进细胞迁移（与DMSO组比较，增加19．1％，P〈0．01）。对照组细胞FAK主要为125×10^3和110×10^3两种形式，E2刺激可诱导FAK（125×10^3）呈现时间依赖性蛋白剪切，生成相对分子质量为35×10^3-70×10^3的小分子片段，而ICI预处理可有效阻断E2诱导的p125FAK蛋白剪切反应。结论：ICI单独作用可明显刺激MCF-7乳腺癌细胞迁移，但ICI对E2诱导的MCF-7细胞迁移具有抑制作用，该抑制效应可能与ICI阻断FAK蛋白剪切有关。
- 刘晓红李铮朱筑霞李阳王红梅朱翠萍王旭东
- 关键词：氟维司群细胞迁移雌激素乳腺癌
- 钙蛋白酶在乳腺上皮转化细胞对雌激素刺激反应中的作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨经雌激素(E2)转化的MCF-10A乳腺上皮细胞对E2刺激的敏感性及细胞内钙蛋白酶(CANP)在E2效应中的介导作用,以深入了解E2的信号传导机制。方法以E2转化的MCF-10A乳腺上皮细胞为研究模型、用E2(50 nmol/L)刺激细胞,以蛋白印迹法观察蛋白分子质量变化,以CANP特异性底物局部黏着激酶(FAK)蛋白剪切作为CANP激活的指标,伤口愈合实验观察细胞迁移变化,CANP抑制剂预处理观察CANP在E2效应中的作用。结果转化细胞CANP活性明显高于非转化细胞,表现为前者出现FAK明显蛋白剪切,而后者FAK主要为野生型(125 ku),同时转化细胞迁移明显增强(P<0.01)。E2(10 nmol/L)刺激转化细胞可进一步促进FAK蛋白剪切和细胞迁移(P<0.01),而非转化细胞对E2刺激不敏感。CANP抑制剂-1(ALLN)可有效阻断E2刺激转化细胞FAK蛋白剪切及细胞迁移(P<0.01)。结论转化细胞对E2刺激的敏感性增加,其机制可能与胞内CANP活性增强有关,提示在转化细胞存在活跃的E2-CANP-FAK信号活动。
- 杨莉朱筑霞刘晓红胡晓霞王红梅王旭东
- 关键词：17Β-雌二醇细胞转化乳腺上皮细胞
- 生理学试卷分析与评价被引量：2
- 2007年
- 刘晓红潘娅
- 关键词：生理学试卷区分度信度系数
- 雌二醇通过钙离子/钙激活中性蛋白酶通路诱导乳腺癌细胞迁移及FAK蛋白剪切被引量：6
- 2012年
- 目的观察雌二醇(E2)诱导MCF-7乳腺癌细胞迁移和局部黏着斑激酶(FAK)蛋白剪切及钙离子(Ca2+)/钙激活中性蛋白酶(CANP)通路在E2效应中的介导作用,探讨E2诱导细胞迁移的信号机制。方法以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为体外研究模型;采用蛋白印迹法分析细胞FAK的蛋白剪切效应;通过伤口愈合实验观察细胞迁移;采用CANP抑制剂(Calpeptin)或胞内钙螯合剂(BAPTA)预处理细胞,观察其对E2诱导细胞迁移及FAK蛋白剪切的影响。结果 E2可明显诱导MCF-7细胞迁移同时FAK出现蛋白剪切,此效应可被Calpeptin或BAPTA预处理显著抑制;E2还可诱导CANP1自身蛋白剪切,也可被Calpeptin或BAPTA显著削弱或阻断。结论 E2可通过细胞内Ca2+/CANP信号通路诱导乳腺癌细胞迁移及FAK蛋白剪切,后者可能在E2诱导的细胞迁移效应中起重要作用。
- 武春兰李阳刘晓红侯建美朱筑霞杨莉王旭东
- 关键词：雌激素乳腺癌钙离子细胞迁移
- 钙激活中性蛋白酶抑制剂对E2诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响及其意义被引量：3
- 2009年
- 目的观察钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)抑制剂对雌二醇(estradiol,E2)诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响,为探索乳腺癌治疗新药靶提供理论依据。方法以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞,RPM1-1640培养,E2处理;MTT法分析细胞增殖,观察E2诱导乳腺癌细胞增殖;CANP特异性抑制剂calpeptin(CAL)或E2受体选择性调节剂他莫西芬(Tamoxifen,TAM)预处理模型细胞,观察CAL或TAM对E2诱导的肿瘤细胞增殖效应的影响及其差异。结果(1)E2诱导MCF-7细胞增殖呈时间和剂量依赖性。E2发挥最大作用的浓度为10-8mol/L,最佳作用时间为24h,增殖率达18.6%(P<0.01);(2)TAM能显著抑制E2诱导的细胞增殖,浓度为10-6mol/L时抑制效能最佳,抑制率达28.63%(P<0.01);(3)CAL也可明显抑制E2的细胞增殖效应,在CAL为10-5mol/L时抑制率最高,达26.34%(P<0.01)。比较CAL与TAM的细胞增抑制殖效能未见显著性差异。结论CANP抑制剂能有效抑制E2诱导的乳腺癌细胞增殖活动,因而以CANP作为乳腺癌治疗的候选药靶可能具有潜在的应用前景。
- 王旭东丁姗姗陈腾祥刘晓红杨勤
- 关键词：雌激素乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶细胞增殖
- 雌激素对人乳腺癌细胞周期蛋白E表达及血清饥饿时细胞存活力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨雌激素对人乳腺癌细胞周期蛋白E表达及在血清饥饿状态下细胞存活力的影响。方法:以MCF-7乳腺癌细胞为模型,采用蛋白印迹分析法检测乳腺癌周期蛋白与表达、显微镜下观察细胞变化、台盼蓝染色及细胞计数法测算细胞存活力。结果:雌激素(10 nmol/L)处理可引起乳腺癌细胞周期蛋白E的过度表达,与对照组比较,增高56.42%(P<0.05);在无血清培养条件下,雌激素能减少乳腺癌细胞死亡,增强细胞的存活力,与对照组比较,72 h细胞存活率增高19.86%(P<0.05)。结论:雌激素能显著上调周期蛋白E的蛋白表达,并增强乳腺癌细胞对血清饥饿的抵抗力。
- 刘晓红易亮陈冷昕陈腾祥王旭东
- 关键词：雌激素类细胞周期蛋白E细胞存活
- 青藤碱及针刺治疗对海洛因戒断大鼠杏仁核的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察和评价针刺及青藤碱(sinomenine)治疗对海洛因成瘾大鼠戒断症状及其杏仁核(amygdala)自发放电及突触素(synaptophysin)表达的影响。方法75只SD大鼠随机均分5组:对照组、成瘾组、针刺组、青藤碱组和联合治疗组。皮下注射海洛因建立成瘾模型大鼠。3个治疗组分别给予针刺穴位(内关、百会、足三里)、青藤碱肌注及两者联合治疗。评估各组大鼠诱导戒断症状,用电生理技术观察5组大鼠杏仁核自发放电,免疫组织化学技术检测杏仁核突触素表达。结果给予纳洛酮后,大鼠出现典型诱导戒断症状(P<0.01),造模成功;给予针刺及青藤碱治疗后,其戒断症状明显减轻(P<0.01)。杏仁核自发放电结果显示:相对于对照组,海洛因成瘾大鼠自发放电低频放电和单个不匀放电比例增多,束簇状和混合型放电比例明显减少(P<0.05),而给予青藤碱或联合治疗的成瘾大鼠放电形式得以逆转(P<0.05),接近对照组水平。免疫组化结果显示,相对于对照组,成瘾组大鼠杏仁核突触素表达增多(P<0.01),给予针刺、青藤碱及联合治疗的大鼠杏仁核突触素的表达明显减少(P<0.01)。结论针刺及青藤碱治疗可以减轻海洛因成瘾大鼠的戒断症状,一定程度地纠正成瘾大鼠杏仁核自发放电频率和形式的异常,降低海洛因成瘾大鼠杏仁核突触素的表达,且二者联合应用效果更好。
- 徐国强刘晓红董宇华李淑芳陈腾祥
- 关键词：青藤碱海洛因成瘾杏仁核突触素自发放电
