田广兰 作品数:4 被引量:6 H指数:1 供职机构: 河南工业大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 河南省高校杰出科研人才创新工程基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶在毕赤酵母中的分泌表达 2012年 以嗜酸乳杆菌AS1.1854来源的亚油酸异构酶基因为模板,用PCR方法扩增目的片段,并克隆到pMD19T载体.经双限制性酶切的pMD19T-LAI和载体pPICZαA连接转化得到重组质粒pPICZαA-LAI.将阳性重组质粒用sacⅠ进行线性化后,经化学法转化毕赤酵母GS115.提取重组酵母GS115/pPICZαA-LAI基因组,利用交叉引物通过PCR方法筛选重组子.阳性毕赤酵母GS115/pPICZαA-LAI经1%甲醇诱导,分泌表达出相对分子质量为69 000亚油酸异构酶.经测定发酵上清酶活力为0.107 U,未破碎重组酵母酶活力0.08 U. 田广兰 曹健 吴兴泉 张洁琼关键词:嗜酸乳杆菌 亚油酸异构酶 巴斯德毕赤酵母 两种亚油酸异构酶毕赤酵母工程菌的构建 共轭亚油酸(ConjugatedLinoleicAcid,CLA)在动物和人体中具有抗癌、抗动脉粥样硬化、抗糖尿病、抗氧化、抗菌、降低胆固醇、促进生长等保健功能。然而,共轭亚油酸在天然食品中含量较低,构建和利用基因工程菌... 田广兰关键词:亚油酸异构酶 嗜酸乳杆菌 植物乳杆菌 重组毕赤酵母 文献传递 Nisin抗性菌株的筛选及其抗性基因的克隆 2011年 利用乳酸链球菌肽(Nisin)抗性基因常与乳糖利用基因位于同一质粒上这一特性,在含300IU/mL Nisin和质量浓度为0.004g/100mL溴甲酚紫的选择性培养基上,从新鲜牛奶中初筛到5株Nisin抗性菌株。经脱脂乳培养基培养、革兰氏染色和镜检,初步确定为乳球菌。分别以5株抗性菌株的基因组和质粒DNA为模板,采用PCR对其Nisin抗性基因(NSR)保守序列进行了扩增,从其中3株抗性菌株(分别命名为N1、N2、N3)的质粒DNA上得到大小约400bp的目的基因产物。经16S rDNA鉴定,进一步确定3株抗性菌株均为乳酸乳球菌。分别以N1、N2、N3的质粒为模板,采用PCR扩增其全长NSR基因,均得到大小约1000bp的目的产物。将从N1得到的NSR基因全长产物与pMD-19T进行连接测序,结果显示,其与已发表序列的相似性达99%,可确定其为NSR基因,且位于抗性菌株N1的质粒上。 李艳芳 曹健 吴兴泉 万谦 张洁琼 田广兰关键词:克隆 聚乳酸的合成·生物降解及应用研究现状 被引量:5 2010年 综述了聚乳酸的合成、聚合机理、生物降解及其应用方面的最新研究进展,并对该领域未来的工作进行了展望。 张洁琼 曹健 李艳芳 田广兰关键词:聚乳酸 生物降解