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鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达: 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了一对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得与预期大小相符约1.6ku核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌...; 胡桂学张鑫徐佳王淳玉许洪洁; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因真核表达载体 VERO细胞; 文献传递

禽流感病毒H5、H9蛋白特异性单克隆抗体的制备与鉴定: 禽流感是禽流行性感冒/(Avian Influenza，AI/)的简称，这是由A型流感病毒引起的禽类的一种重要传染病。有重要的公共卫生意义，本试验研制针对禽流感病毒H5亚型和H9亚型血凝素蛋白的单克隆抗体就是要为快速诊断...; 徐佳; 关键词：禽流感病毒血凝素单克隆抗体间接ELISA; 文献传递

鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中表达被引量：2: 2010年; 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了1对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得大小为1605bp的核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌JM109,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。经过酶切和连接反应,将VP3基因克隆入真核表达载体pVAX1,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,提取质粒,进行了PCR和酶切鉴定。通过脂质体法将pVAX1-VP3转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光法检测。结果显示,VP3基因克隆成功,与GPVB株核苷酸序列同源性为96.2%;PCR和酶切鉴定结果证实,成功构建了含VP3基因的GPV真核表达载体pVAX1-VP3。提取转染该质粒的Vero细胞RNA,RT-PCR扩增,在1000～2000bp可见一明显DNA条带;间接荧光抗体染色转染细胞,在细胞表面可见特异荧光。; 高光张鑫徐佳王淳玉许洪洁胡桂学; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因核酸疫苗 VERO细胞

鹅细小病毒vp3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达: 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列，设计并合成了一对引物，PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白vp3基因，获得与预期大小相符约1.6ku核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体，转化感受态大肠杆菌...; 胡桂学张鑫徐佳王淳玉许洪洁; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因真核表达载体 VERO细胞

鹅细小病毒四平分离株VP3基因的克隆与序列分析被引量：4: 2006年; 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)核苷酸序列,设计并合成了1对引物,对吉林农业大学预防兽医学研究室分离鉴定的GPV四平株(SP)主要保护性抗原蛋白VP3基因进行扩增。所得到的PCR产物片段大小约1.6 kb,与预期片段大小相符。将该片段纯化后与T载体连接,转化到感受态大肠杆菌JM-109中进行克隆。对所提质粒进行快速鉴定、PCR鉴定以及限制性内切酶NheⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒,对重组质粒测序并进行核苷酸序列分析。结果表明:GPV四平株VP3基因长1 605 nt,包含了完整编码GPV VP3蛋白阅读框,且与国内GPV分离株B,GD,HG5/82相应核苷酸序列和氨基酸序列的同源性较高,分别为96.2%,96.3%,96.4%和97.4%,98.7%,98.9%。据此认为,GPV四平株VP3基因可以作为构建具有普遍应用价值的基因工程疫苗的候选基因。; 张鑫李柏岁徐佳李长瑜王淳玉胡桂学; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因克隆

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徐佳