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鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达: 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了一对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得与预期大小相符约1.6ku核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌...; 胡桂学张鑫徐佳王淳玉许洪洁; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因真核表达载体 VERO细胞; 文献传递

鹅副黏病毒HN基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果被引量：1: 2008年; 以大量提取的鹅副黏病毒(GPMV)HN基因真核表达载体pVAXⅠ-HN和空载体pVAXⅠ肌肉注射BALB/c小鼠。利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,用ELISA方法检测小鼠血清中GPMV抗体,观察GPMV HN基因真核表达载体pVAXⅠ-HN在小鼠中的免疫效果。结果表明:试验组小鼠血清中GPMV特异性抗体水平显著高于对照组,ELISA试验结果OD492值分别为1.360 0±0.101 7和0.358 0±0.018 1;试验组与对照组的淋巴细胞增殖试验刺激指数(SI)差异不显著,其SI值分别为1.181 2±0.030 1和1.119 1±0.035 5。由此说明,GPMV HN基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫。; 夏铭崎王淳玉许洪洁胡桂学; 关键词：鹅副黏病毒 HN基因真核表达载体免疫

小鹅瘟病毒VP3基因真核表达质粒在小鼠中的免疫效果被引量：13: 2008年; 检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因真核表达质粒在小鼠中的免疫效果。大量提取本实验室已构建的含有GPV VP3基因的真核表达质粒pVAXⅠ/VP3和空载体pVAXⅠ,分两组进行两点肌肉注射免疫小鼠,共免疫4次。利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,间接ELISA法检测免疫小鼠血清中GPV特异性抗体的水平。淋巴细胞增殖指数,免疫小鼠与正常小鼠差异不显著。间接ELISA检测结果表明,pVAXⅠ/VP3质粒免疫组小鼠血清中GPV特异性抗体水平,显著高于空载体对照组和阴性对照组。已构建的GPV VP3基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫,为小鹅瘟核酸疫苗的研究奠定基础。; 许洪洁张鑫夏铭琦胡桂学; 关键词：小鹅瘟病毒真核表达质粒 VP3基因免疫效果

鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中表达被引量：2: 2010年; 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了1对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得大小为1605bp的核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌JM109,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。经过酶切和连接反应,将VP3基因克隆入真核表达载体pVAX1,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,提取质粒,进行了PCR和酶切鉴定。通过脂质体法将pVAX1-VP3转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光法检测。结果显示,VP3基因克隆成功,与GPVB株核苷酸序列同源性为96.2%;PCR和酶切鉴定结果证实,成功构建了含VP3基因的GPV真核表达载体pVAX1-VP3。提取转染该质粒的Vero细胞RNA,RT-PCR扩增,在1000～2000bp可见一明显DNA条带;间接荧光抗体染色转染细胞,在细胞表面可见特异荧光。; 高光张鑫徐佳王淳玉许洪洁胡桂学; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因核酸疫苗 VERO细胞

小鹅瘟病毒VP3基因真核表达质粒在小鼠中的免疫效果: 小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus，GPV)引起的雏鹅急性或亚急性败血性传染病，以渗出性肠炎、小肠黏膜表层大片坏死脱落、肠道栓塞为特征性病变，该病主要侵害出壳后4～20日龄的雏鹅和番鸭。自...; 许洪洁; 关键词：小鹅瘟病毒细小病毒真核表达质粒 VP3基因免疫效果; 文献传递

鹅细小病毒vp3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达: 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列，设计并合成了一对引物，PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白vp3基因，获得与预期大小相符约1.6ku核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体，转化感受态大肠杆菌...; 胡桂学张鑫徐佳王淳玉许洪洁; 关键词：鹅细小病毒 VP3基因真核表达载体 VERO细胞

鹅重要传染病高效防制技术与诊断、预防产品的开发研究: 胡桂学高光吴伟徐凤宇付连军于守平王翌李长瑜张鑫王淳玉许洪洁夏酩崎王占林陈永红李国强马辉; 近年来，吉林省养鹅业迅速发展，已成为农民致富的新兴产业。鹅传染病发生频繁，危害严重，造成了巨大的经济损失。受吉林省科技厅委托，开展本课题研究。应用禽胚或固体培养基从吉林省患病鹅体内分离到4株小鹅瘟病毒、4株鹅副黏病毒、2...; 关键词：; 关键词：传染病小鹅瘟鹅副黏病毒病

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许洪洁