王淳玉
- 作品数:8 被引量:13H指数:2
- 供职机构:吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:吉林省科技厅发展计划项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 孔雀新城疫病毒与大肠杆菌混合感染的诊断被引量:4
- 2006年
- 从1只病死孔雀的肝、脾及脑组织悬浊液中分离到1株病毒,经HA和HI试验、病毒中和试验及荧光PCR试验,证明该病毒为新城疫病毒。取其肝及心血做细菌分离培养,经革兰氏染色、镜检及各多种生化试验鉴定为大肠杆菌,动物试验结果证明其具有致病性。由此说明,该孔雀死于新城疫和大肠杆菌混合感染。
- 于守平王淳玉刘岩胡桂学
- 关键词:孔雀新城疫病毒大肠杆菌
- 鹅源副黏病毒HN基因真核表达载体的构建及表达研究
- 鹅副黏病毒病是由鹅源副黏病毒/(Goose Paramyxovirus,GPMV/)引起的鹅的一种急性、烈性传染病,具有较高的发病率和死亡率,给养鹅业带来了严重的危害。
目前,临床上对GPMV感染尚无特效...
- 王淳玉
- 关键词:鹅源副黏病毒HN基因克隆测序真核表达
- 文献传递
- 鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达
- 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了一对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得与预期大小相符约1.6ku核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌...
- 胡桂学张鑫徐佳王淳玉许洪洁
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因真核表达载体VERO细胞
- 文献传递
- 鹅副黏病毒HN基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果被引量:1
- 2008年
- 以大量提取的鹅副黏病毒(GPMV)HN基因真核表达载体pVAXⅠ-HN和空载体pVAXⅠ肌肉注射BALB/c小鼠。利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,用ELISA方法检测小鼠血清中GPMV抗体,观察GPMV HN基因真核表达载体pVAXⅠ-HN在小鼠中的免疫效果。结果表明:试验组小鼠血清中GPMV特异性抗体水平显著高于对照组,ELISA试验结果OD492值分别为1.360 0±0.101 7和0.358 0±0.018 1;试验组与对照组的淋巴细胞增殖试验刺激指数(SI)差异不显著,其SI值分别为1.181 2±0.030 1和1.119 1±0.035 5。由此说明,GPMV HN基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫。
- 夏铭崎王淳玉许洪洁胡桂学
- 关键词:鹅副黏病毒HN基因真核表达载体免疫
- 鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中表达被引量:2
- 2010年
- 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了1对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得大小为1605bp的核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌JM109,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。经过酶切和连接反应,将VP3基因克隆入真核表达载体pVAX1,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,提取质粒,进行了PCR和酶切鉴定。通过脂质体法将pVAX1-VP3转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光法检测。结果显示,VP3基因克隆成功,与GPVB株核苷酸序列同源性为96.2%;PCR和酶切鉴定结果证实,成功构建了含VP3基因的GPV真核表达载体pVAX1-VP3。提取转染该质粒的Vero细胞RNA,RT-PCR扩增,在1000~2000bp可见一明显DNA条带;间接荧光抗体染色转染细胞,在细胞表面可见特异荧光。
- 高光张鑫徐佳王淳玉许洪洁胡桂学
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因核酸疫苗VERO细胞
- 鹅源副黏病毒的分离鉴定及部分特性研究被引量:2
- 2007年
- 采用9日龄鸡胚,从长春某个体养鹅户的病死鹅的肝、脾和肾脏中分离到1株病毒,暂定名为JG04株。经HA和HI试验、电镜观察、常规RT-PCR、NDV荧光RT-PCR检测,证实JG04株为鹅源副黏病毒。与GenBank下载的9株NDV毒株的HN基因作同源性比较,并进一步对JG04株进行耐酸试验、氯仿和乙醚敏感试验、血凝解脱及血凝素热稳定性试验、EID50、ELD50和毒力测定。结果表明:JG04株与江苏近年来分离的鹅源副黏病毒株的HN基因同源性较高,核苷酸同源性高达96.4%,氨基酸同源性高达96.9%;JG04株有良好的血凝性,能凝集人和鸡的红细胞;电镜观察病毒粒子有囊膜,直径约200 nm;对酸、氯仿、乙醚敏感;血凝解脱为快速解脱型,血凝素热稳定性差;EID50、ELD50分别为1.74×109/mL、2.57×109/mL;MDT为54.2 h,ICPI为1.66,IVPI为2.60。上述结果表明,GJ04株与新城疫病毒(NDV)速发型具有类似的毒力,属强毒力毒株。
- 杨晓杰王翌董丽娜李天松王淳玉胡桂学
- 关键词:副黏病毒
- 鹅细小病毒四平分离株VP3基因的克隆与序列分析被引量:4
- 2006年
- 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)核苷酸序列,设计并合成了1对引物,对吉林农业大学预防兽医学研究室分离鉴定的GPV四平株(SP)主要保护性抗原蛋白VP3基因进行扩增。所得到的PCR产物片段大小约1.6 kb,与预期片段大小相符。将该片段纯化后与T载体连接,转化到感受态大肠杆菌JM-109中进行克隆。对所提质粒进行快速鉴定、PCR鉴定以及限制性内切酶NheⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒,对重组质粒测序并进行核苷酸序列分析。结果表明:GPV四平株VP3基因长1 605 nt,包含了完整编码GPV VP3蛋白阅读框,且与国内GPV分离株B,GD,HG5/82相应核苷酸序列和氨基酸序列的同源性较高,分别为96.2%,96.3%,96.4%和97.4%,98.7%,98.9%。据此认为,GPV四平株VP3基因可以作为构建具有普遍应用价值的基因工程疫苗的候选基因。
- 张鑫李柏岁徐佳李长瑜王淳玉胡桂学
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因克隆
- 鹅重要传染病高效防制技术与诊断、预防产品的开发研究
- 胡桂学高光吴伟徐凤宇付连军于守平王翌李长瑜张鑫王淳玉许洪洁夏酩崎王占林陈永红李国强马辉
- 近年来,吉林省养鹅业迅速发展,已成为农民致富的新兴产业。鹅传染病发生频繁,危害严重,造成了巨大的经济损失。受吉林省科技厅委托,开展本课题研究。应用禽胚或固体培养基从吉林省患病鹅体内分离到4株小鹅瘟病毒、4株鹅副黏病毒、2...
- 关键词:
- 关键词:传染病小鹅瘟鹅副黏病毒病