王娟
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 供职机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 苦参碱对NK细胞杀伤HL60细胞的影响及其机制研究被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨苦参碱对NK细胞杀伤急性早幼粒细胞白血病细胞株HL60的影响及作用机制。方法:实时定量PCR(qRT-PCR)检测苦参碱处理前后HL60细胞表面NK细胞活化性受体凝集素样同型二聚体(NKG2D)配体分子MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3表达情况,CFSE染色流式法检测苦参碱作用前后HL60细胞对NK细胞杀伤敏感性的改变。结果:qRTPCR结果表明1.0mg/ml苦参碱处理HL60细胞24h后HL60细胞表面MICA和ULBP2表达水平较正常对照组分别增加2.34倍和2.86倍,而MICB、ULBP1和ULBP3与处理前相比差异无统计学意义(P>0.05);处理48h后HL60细胞表面MICA/B、ULBP1/2/3表达水平较处理前均有不同程度升高,尤以ULBP2和ULBP3升高最明显,较正常对照组分别增加了3.74倍和3.22倍。CFSE染色流式数据显示效靶比例5∶1和10∶1条件下,苦参碱均可加强NK细胞对HL60细胞的杀伤效率。结论:苦参碱可促进HL60细胞对NK细胞杀伤敏感性,其机制与诱导HL60细胞表面NKG2D配体表达上调密切相关。
- 雷秦王梦昌王娟
- 关键词：苦参碱HL60细胞NKG2D配体
- 癌特异性双靶向载体的安全性及其携带基因的杀伤性被引量：14
- 2006年
- 背景与目的:我们创导的“癌症的靶向双基因-病毒治疗”策略可消灭移植性肿瘤,目前最重要的是要提高其安全性,使其只靶向肿瘤细胞,而在正常细胞内不复制或者很少复制。本研究旨在构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,并研究其安全性;在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,研究其杀伤性。方法:用hTERT启动子控制腺病毒复制必需的E1A基因,并将E1B55KD基因删除,构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,使其只靶向p53功能缺乏的肿瘤。在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,通过分子克隆构建质粒pTD55和pTD55-TRAIL,并与包装腺病毒的大质粒pBHGE3在293细胞中同源重组,得到腺病毒TD55和TD55-TRAIL。构建好的病毒体外感染人胚肺细胞MRC5、WI38,人结肠癌细胞SW620、HCT116、人肺癌细胞A549,分别用结晶紫染色法和MTT法检测其对细胞生长的影响。用流式细胞仪测定肿瘤细胞的凋亡率。结果:结晶紫染色结果和MTT结果表明,双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞MRC5和WI38的杀伤作用比ZD55-TRAIL小很多。病毒复制能力分析表明,单靶向腺病毒在正常细胞中的复制倍数是双靶向腺病毒的3～5倍。TD55和TD55-TRAIL均能引起SW620细胞的凋亡,后者是前者的3.3倍。结论:双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞的安全性比以往所构建的单靶向腺病毒ZD55-TRAIL更好,说明双靶向载体TD55比单靶向载体ZD55靶向性更高,如做为治疗药物可增加安全性,在治疗中可大大增加药物的安全性。携带的TRAIL基因能引起肿瘤细胞的凋亡,杀伤力较TD55增加数倍。
- 王娟顾锦法杨水云肖田齐荣孙兰英刘新垣
- 关键词：肿瘤生物疗法溶瘤腺病毒HTERT启动子
