姜静
- 作品数：8 被引量：41H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过表达前脑啡肽原(PPENK)增强线粒体自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤被引量：5
- 2017年
- 目的探讨前脑啡肽原-最低限度免疫定义基因表达-核定位信号(PPENK-MIDGE-NLS)基因载体后处理对大鼠心肌缺血再灌注线粒体自噬的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术对照组(sham)组:开胸不进行冠状动脉左前降支(LAD)血流阻断及再灌注;缺血再灌注(I/R)组、PPENK-MLDGE(MIDGE)-NLS载体(PPENK)组及Control-MIDGE-NLS载体(对照)组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注前给予生理盐水、PPENK-MIDGE-NLS 200μg及Control-MIDGE-NLS 200μg,股静脉注射各1.5 m L。再灌注24 h后取材。ELISA测定血浆心肌肌钙蛋白I(c Tn I)含量;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积;透射电镜下观察心肌细胞超微结构及线粒体自噬并分析线粒体损伤评分;Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、线粒体外膜转位酶20(TOM20)、PTEN诱导推定激酶1(PINK1)、帕金森病蛋白(parkin)水平。结果 PPENK组血浆c Tn I含量降低,心肌梗死面积减少,线粒体损伤评分改善,心肌组织及线粒体超微结构明显改善,线粒体自噬体增多。线粒体PINK1、parkin、p62、LC3B表达增强。对照组与I/R组间无显著性差异。结论 PPENK-MIDGENLS基因载体处理后可减轻大鼠心肌I/R损伤,可能与增强线粒体自噬,保护线粒体结构完整有关。
- 王艳卢晓娥赵品姜静姚立农
- 关键词：缺血-再灌注脑啡肽基因载体
- 极化液在脓毒症心肌损伤的应用研究
- 2018年
- 脓毒症是由感染引起的的严重威胁生命的危重病之一,极化液在心肌梗死中的心肌保护作用已毋庸置疑,本文就极化液在脓毒症患者的心肌保护作用做一综述。
- 姜静朱长亮董敬之姚立农
- 关键词：脓毒症心肌损伤极化液胰岛素
- PPENK-MIDGE-NLS后处理对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体的影响
- 2018年
- 目的观察PPENK-MIDGE-NLS基因载体对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体的影响。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(开胸不进行LAD血流阻断,sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、PPENK-MLDGE-NLS载体组(PPENK组)及Control-MIDGE-NLS载体组(control组),后面3组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注前给予生理盐水1.5 ml、PPENKMIDGE-NLS 200μg/1.5 ml及control-MIDGE-NLS 200μg/1.5 ml。再灌注24 h后,观察基因载体转染后在缺血区心肌组织表达情况;测定缺血区组织中亮氨酸脑啡肽(L-ENK)含量、血浆c Tn I浓度,心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及ATP含量,线粒体膜电位水平变化,电子显微镜下观察心肌细胞及线粒体超微结构变化。结果与sham组相比,I/R组、PPENK组及control组的L-ENK及、SOD活性、ATP含量降低,c Tn I浓度及MDA明显上升,线粒体膜电位水平下降(P<0.05);与I/R组及control组相比,PPENK组心肌L-ENK及SOD活性、ATP含量升高,c Tn I浓度及MDA明显降低,线粒体膜电位水平升高(P<0.05),心肌及线粒体超微结构也有明显改善。control组与I/R组间,L-ENK、SOD、ATP含量、c Tn I浓度及MDA、线粒体膜电位水平对比无统计学差异(P>0.05),两组超微结构改变也相似(P>0.05)。结论 PPENK-MIDGE-NLS基因载体处理缺血再灌注大鼠模型后,能够提高大鼠缺血区局部脑啡肽含量,减轻缺血区心肌氧化应激反应,改善心肌细胞及线粒体结构。
- 王艳韩瑞丽姜静姚立农
- 关键词：缺血再灌注脑啡肽基因载体线粒体
- 前脑啡肽原基因转染对大鼠心肌缺血／再灌注损伤的影响被引量：2
- 2017年
- 目的 观察采用非病毒、非质粒微量免疫原定义的基因表达（minimalistic immunological defined gene expression, MIDGE）方法构建前脑啡肽原（preproenkephalin， PPENK）-MIDGE-核定位序列（nuclear localization sequence， NLS）基因载体在缺血心肌的表达及对心肌的保护作用。 方法 48只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组（每组12只）：假手术组（C组）、缺血/再灌注（ischemia/reperfusion， I/R）组（I/R组）、载体组（P组）、拮抗剂组（D组）。C组仅进行开胸手术，冠状动脉左前降支（left anterior descending， LAD）挂线不结扎；I/R组开胸结扎LAD 30 min再灌注24 h；P组尾静脉注射PPENK-MIDGE-NLS基因载体24 h后建立心肌I/R模型；D组实验前24 h尾静脉注射PPENK-MIDGE-NLS基因载体，实验前30 min给予纳曲吲哚（1 g/kg）。记录缺血前（T0）和缺血30 min（T1）、再灌注30 min时（T2）的MAP、HR；按Lambeth会议标准记录T1和T2心律失常情况并评分；于I/R后24 h用ELISA检测大鼠血清肌钙蛋白I（carciac troponin I， cTnI）、氯化三苯四氮唑（2，3，5-triphenyltetrazolium chloride， TTC）染色测量心肌梗死面积、H-E染色观察心肌形态学改变、Western blot检测心肌组织内前脑啡肽（proenkephalin， PENK）的表达。 结果 PPENK-MIDGE-NLS基因载体静脉注射后可减轻心肌I/R诱导的MAP、HR下降程度，P组的cTnI低于I/R组和D组（P〈0.05），P组大鼠心律失常评分［（2.0±0.9）分］分别低于I/R组［（4.1±0.6）分］和D组［（4.0±1.0）分］（P〈0.05），P组的心肌梗死面积较I/R组明显减少（P〈0.05），H-E染色示P组大鼠心肌损伤程度明显减轻，心肌PENK蛋白表达量明显高于其他组（P〈0.05）。 结论 PPENK-MIDGE-NLS提高心肌缺血区PENK含量，具有心肌保护作用。
- 姜静韩瑞丽陈曦赵品李江静吴巍姚立农
- 关键词：心肌基因载体
- 大鼠心肌缺血再灌注损伤模型线粒体自噬变化的研究被引量：2
- 2018年
- 目的:观察大鼠心肌缺血再灌注损伤模型不同时间点线粒体及线粒体自噬的变化。方法:成年雄性SD大鼠40只,随机分为假手术对照组(sham组):开胸不进行冠状动脉左前降支(Left anterior descending coronary artery,LAD)血流阻断;缺血再灌注组2h组(I/R 2 h组)、24 h组(I/R 24 h组)及48 h组(I/R 48 h组),以上3组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注后2 h、24 h、48 h观察心肌ATP含量,线粒体膜电位水平变化,透射电镜下观察线粒体及线粒体自噬超微结构变化,western blot法测定线粒体自噬蛋白PINK1、Parkin、p62、LC3B及线粒体膜蛋白Tom20表达水平。结果:与对照组相比,线粒体膜电位水平及心肌组织ATP含量于再灌注2 h开始下降,24 h下降最显著,48 h有所改善,线粒体超微结构损伤再灌注24 h最为明显,48 h有所改善。PINK1、Parkin、p62蛋白表达于损伤后2 h增强,于再灌注后24 h升高最显著,持续至48 h,LC3BⅡ表达于损伤后24 h增强,同样持续至48 h。透射电镜下可见线粒体自噬体于再灌注后24 h明显增多,并持续至48 h。结论:大鼠心肌缺血再灌注损伤后,线粒体功能与形态损伤以损伤后24 h最为显著,至损伤后48 h后好转;线粒体自噬水平升高以损伤后24 h最为显著,且维持至损伤后48 h,提示两者之间可能存在关联。
- 王艳宗媛赵品姜静姚立农陶蕾
- 关键词：缺血-再灌注PINK1PARKIN
- 迷走神经在缺血后处理减轻大鼠复苏后脑损伤中的作用探究被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨迷走神经在远隔缺血后处理减轻大鼠心肺复苏后脑损伤中的作用。方法:雄性SD大鼠70只,随机分5组:假手术组(sham组,n=10);模型组(CA组,n=15),远隔缺血后处理组(RIPost组,n=15),远隔缺血后处理+迷走神经切断组(RIPost+VAG组,n=15),迷走神经切断组(VAG组,n=15)。ELISA法检测ROSC 24 h神经元特异性烯醇化酶(NSE)、乙酰胆碱(Ach)、IL-1β和TNF-α浓度;ROSC 24h NSE免疫荧光染色;ROSC 1d及3d神经功能缺损评分(NDS);ROSC 5d Nissl染色计算海马CA1区神经元数目。结果:与sham组相比,各组海马CA1区NSE、IL-1β和TNF-α含量升高,而Ach浓度降低,NDS评分和海马CA1区存活神经元数目降低(P<0.05);与CA组相比,RIPost组海马CA1区NSE、IL-1β和TNF-α含量降低,Ach浓度升高,NDS评分和海马CA1区存活神经元数目升高(P<0.05),而RIPost+VAG组及VAG组各项指标与其差异无统计学意义(P>0.05);与RIPost组相比,RIPost+VAG组海马CA1区NSE、IL-1β和TNF-α含量升高,Ach浓度降低,NDS评分和海马CA1区存活神经元数目降低(P<0.05)。结论:迷走神经的完整性在远隔缺血后处理减轻大鼠心肺复苏后脑损伤中具有重要意义。
- 韩瑞丽高龙飞姜静李江静高昌俊
- 关键词：缺血后处理迷走神经心肺复苏窒息
- 电磁脉冲对大鼠大脑额叶皮层炎性因子TNF-α、IL-1β及NFκBp65表达的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)的生物学效应,为免受电磁辐射损伤提供新的研究靶点。方法:成年雄性SD大鼠随机分为四组:对照组、EMP照后1 h组、EMP照后6 h组、EMP照后24 h组。通过HE染色、ELISA和Western Blot实验方法,研究EMP(400 kv/m,200个脉冲)连续辐照3 d后在不同组大鼠大脑额叶皮层神经元的组织学变化、额叶皮层组织炎性因子-肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及NFκBp65的表达变化。结果:(1)HE染色结果显示:经EMP辐照6 h后,大脑额叶皮层内异常神经元数目增多,异常神经元细胞核边移,胞浆与细胞核深染。(2)ELISA结果显示:EMP辐照后,大脑额叶皮层内TNF-α水平随时间逐渐升高,于辐照后6 h尤为明显(P<0.05),24 h逐渐恢复至正常;IL-1β水平各实验组均较对照组明显升高,于辐照后1 h升高最为明显(P<0.05)。(3)Western Blot结果显示:经EMP辐照后,6 h组大脑额叶皮层内NFκBp65的表达明显增多,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电磁脉冲照射会引起大鼠大脑额叶皮层神经元损伤和炎性反应,其机制可能是通过诱导NFκB活化,启动炎性反应,进而导致大脑额叶皮层神经元损伤。
- 李江静孙绪德王晋邓斌张鸽韩瑞丽姜静高佳栋
- 关键词：电磁脉冲炎性因子
- 脂多糖诱导脓毒症小鼠心肌细胞及线粒体自噬被引量：26
- 2016年
- 目的探讨脓毒症心肌损伤时心肌细胞及线粒体自噬水平的变化。方法雄性C57BL/J小鼠随机分为空白对照组(NC)、LPS处理6、12、24、36 h组。LPS处理组小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS建立脓毒症模型,空白对照组注射等量生理盐水。分别于以上时间点处死小鼠,收集血液及心脏组织,提取心肌组织胞质蛋白、线粒体及线粒体蛋白,另取心肌组织进行冰冻切片;应用ELISA试剂盒测定血清心肌肌钙蛋白I(c Tn I)含量变化;JC-1染色结合荧光酶标仪检测LPS刺激后不同时间点线粒体膜电位变化;Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、PTEN诱导激酶1(pink1)、E3泛素连接酶帕金森病蛋白(parkin)水平;免疫荧光组织化学染色检测心肌组织LC3、pink1/parkin蛋白的定位及其在不同处理组的表达差异。结果与对照组相比,LPS诱导的脓毒症小鼠血清c Tn I在6 h即开始明显升高;LPS处理组线粒体膜电位下降,在LPS 12 h组最低;细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在腹腔注射LPS 12 h明显升高,然后逐渐下降;pink1/parkin在腹腔注射LPS 6 h明显升高,然后逐渐下降。结论脓毒症心肌损伤时心肌细胞及线粒体自噬水平升高,自噬应激可能更早发于心肌线粒体。
- 赵品高金鉴姜静彭细娟吴巍郑兰兰姚立农
- 关键词：脓毒症PINK1PARKIN
