韩媛媛 作品数:4 被引量:40 H指数:2 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科学技术基金 贵州省优秀科技教育人才省长资金项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
阳离子脂质体介导肽核酸转染K562细胞的研究 被引量:1 2016年 目的优化阳离子脂质体介导肽核酸(PNA)转染K562细胞的条件。方法以阳离子脂质体lipofectamine 2000为载体,将标记有FITC荧光基团的PNA转染K562细胞,在荧光显微镜下观察并计算其转染效率,采用Cell Counting Kit(CCK-8)检测其细胞毒性。应用正交试验筛选出最佳的PNA和脂质体的用量及比例,并优化稀释用培养基血清浓度,以获得最优的转染效果。结果以2.5×105/mL^3×105/mL的细胞密度接种,100μL/孔的培养基中加入PNA 6.25pmol,PNA与脂质体的体积比为1∶3.5,稀释用培养基未加胎牛血清时,细胞转染效率和细胞毒性最佳,转染效率为87.2%,细胞存活率(RGR)为94.1%。结论PNA可通过阳离子脂质体转染进入K562细胞,优化条件后得到的细胞转染效率和细胞存活率能够满足基因表达研究的实验要求。 王偲颖 林靖 韩媛媛 张华 黄盛文关键词:K562细胞 肽核酸 脂质体转染 细胞毒性 应用Hapmap数据库分析HBG1-HBD基因间序列单倍型及标签SNP的挑选 被引量:1 2016年 目的 HBG1-HBD基因间序列在γ珠蛋白基因表达有重要作用,文中分析中国北京汉族人群HBG1-HBD基因间序列的单倍型并挑选标签SNP(tag SNP)。方法从Hapmap数据库中下载HBG1-HBD基因间序列上中国北京汉族人群的所有SNP数据。应用Haploview 4.0软件对HBG1-HBD基因间序列的SNP位点进行连锁不平衡分析,在此基础上构建HBG1-HBD基因间序列范围的单倍域及单倍型。用MEGA5.10软件对单倍型进行聚类分析,根据SNP之间的r2值挑选出可代表不同类型单倍型的tag SNP。结果在中国北京汉族人群中,HBG1-HBD基因间序列中共有2个单倍域(Block1和Block2),分别有7种和3种单倍型,发生频率均>1%。通过聚类分析将Block1的单倍型分为2组,可通过相互代表的11个tag SNP进行分组,11个SNP依次为:rs3813727、rs10837643、rs4320977、rs4283007、rs4402323、rs4910543、rs4910736、rs2105819、rs968857、rs968856、rs10768687。结论获得了中国北京汉族人群中HBG1-HBD基因间序列的单倍型及tag SNP,为研究HBG1-HBD基因间序列的单倍型与γ珠蛋白基因表达的相关性打下了基础。 韩文平 黄盛文 黄凌 王偲颖 韩媛媛 王予川 安邦权关键词:HAPMAP 单倍型 脐血红细胞参数MCV和HbA定量对新生儿β-地中海贫血筛查的意义 被引量:6 2016年 目的评价新生儿脐血平均红细胞体积(MCV)和Hb A定量对新生儿β-地中海贫血的筛查价值。方法收集2011年2月-2012年5月该院足月新生儿脐血样本106份,按MCV分组:MCV≥100 f L 58例,MCV<100 f L 48例;按Hb A定量分组:Hb A≥16%78例,Hb A<16%28例。提取脐血基因组DNA,用反向点杂交(RDB)技术检测β-珠蛋白基因突变。用χ2检验比较按不同指标分组的β-地贫的阳性率,并评价Hb A<16%筛查新生儿β-地贫的敏感性和特异性。结果 106份样本共检出β-地贫11例,均为杂合子。MCV≥100 f L和MCV<100 f L的样本中,β-地贫的阳性率分别为12.1%和8.3%,差异无统计学意义(P=0.530);Hb A≥16%和Hb A<16%的样本中β-地贫的阳性率分别为3.8%和28.6%,差异有统计学意义(P<0.001)。Hb A<16%筛查β-地贫的敏感性和特异性分别为72.73%,78.95%。结论脐血红细胞参数MCV不能作为新生儿β-地贫筛查的指标;Hb A定量对新生儿β-地贫具有一定的筛查意义。 王偲颖 方星 韩媛媛 刘兴梅 黄盛文关键词:脐血 平均红细胞体积 Β-地中海贫血 新生儿筛查 13738例孕妇的地中海贫血筛查及基因检测结果分析 被引量:32 2017年 目的探讨贵阳地区孕妇人群地中海贫血(简称地贫)筛查的阳性率和基因突变的类型及其分布特征。方法应用红细胞参数分析和血红蛋白电泳对孕妇进行地贫产前筛查。对表型阳性者用单管多重PCR和PCR结合反向点杂交(PCR—reverse dot blot,PCR—RDB)技术检测中国人群中常见的α和β-地贫基因突变类型。罕见突变和未知突变采用DNA直接测序法进行检测。结果在13738例孕妇中,表型阳性者有1745例,筛查阳性率为12.70%。按籍贯统计,地贫筛查阳性率较高的省区依次为广西、广东、江西及贵州;按民族统计,地贫筛查阳性率较高的民族依次为壮族、黎族及布依族。有801例表型阳性者进行了基因检测,其中457例确诊为地贫,确诊率为57.05%。共检出9种α-地贫基因型,其中--SEA/αα最多,占63.35%,其次是-α3.7/αα和-α4.2/αα,分别占19.37%和8.90%;检出11种β-地贫基因型,所占比例较高的基因型为:CD17/N(42.91%)、CD41—42/N(32.46%)和IVS-Ⅱ-654/N(11.94%);检出β-地贫罕见突变CD54—58/N和IVS-I-130/N各1例。结论贵阳地区孕妇人群地贫筛查阳性率较高,不同籍贯和民族的筛查阳性率差异较大;地贫基因突变类型多样,突变谱与其他地区有一定差异。 韩媛媛 戴薇 刘兴梅 李贵芳 许吟 马星卫 李媛媛 韩文平 杨楠楠 徐琴 黄凌 黄盛文关键词:地中海贫血 产前筛查 基因检测