杨梦莉
- 作品数：16 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 构建稳定表达pLVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU719细胞系被引量：2
- 2017年
- 目的:构建稳定表达pLVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU719细胞系。方法:合成能与EB病毒(EBV)编码的EBV-miR-BART16、EBV-miR-BART4-5p、EBV-miR-BART5-5p及EBV-miR-BART22 miRNAs特异结合的miRNA海绵(miRNA sponge)序列,用PITA软件预测构建的sponge是否结合非特异性miRNAs;构建pLVshRNA-EGFP-EBVsponge载体,与慢病毒包装质粒pH1、pH2共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染SNU719细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞株;Real-time PCR检测细胞中EBV-miR-BART16、EBV-miRBART4-5p、EBV-miR-BART5-5p及EBV-miR-BART22表达水平。结果:成功构建pLVshRNA-EGFP-EBVspong(命名为pEGFP-EBV-sp);与对照组相比,pEGFP-EBV-sp组中4种microRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建稳定表达pEGFP-EBV-sp的SNU719细胞系。
- 陈香岭杨梦莉马春霞俞建昆
- 关键词：细胞系胃肿瘤MIRNASPONGE
- 梯度浓度顺铂处理对6种肿瘤细胞中CASP9的mRNA选择性剪接的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:分析顺铂处理后多种肿瘤细胞中CASP9基因mRNA选择性剪接异构体的表达及其变化规律。方法:用梯度浓度的顺铂处理肺癌细胞(A549、H1299)、人胚肾细胞(293FT)、宫颈癌细胞(SiHa、CaSki、C33A)6种细胞,提取各细胞的总RNA,用半定量RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳及胶图像分析软件检测分析CASP9基因mRNA异构体的组成及其比例和相对表达水平的变化。结果:6种细胞中,CASP9f∶r1引物检测到的CASP9a和c(NR-102732)两种异构体,但随着顺铂浓度的增加,两种异构体的比例在6种细胞中均无变化;而CASP9f∶r2引物可检测到的异构体CASP9a和b、a/b比例在A549、H1299、SiHa、C33A、Ca Ski中呈逐渐增加趋势,而在293FT细胞中则呈相反趋势;在A549顺铂抗性株中,顺铂处理前后CASP9a/b的比例显著差异变化明显减弱。结论:在顺铂处理下,检测的5种细胞中的Casp9是通过增加casp9a/b的比例来应对,仅293FT例外;顺铂抗性A549细胞株在顺铂处理后casp9a/b的比例比例与细胞凋亡和抗性有关,提示调节casp9a/b的比例是治疗癌症的可能的有效途径之一。
- 杨勤兴马春霞陆成龙杨艳波杨梦莉刘舒媛李明阳杨渊史荔俞建昆
- 关键词：顺铂细胞凋亡
- 顺铂处理下肺癌细胞中剪接因子SRSF2 mRNA异构体的变化被引量：3
- 2017年
- 目的:分析不同浓度顺铂(CDDP)处理后肺癌细胞中剪接因子2(SRSF2)mRNA异构体及蛋白水平的变化及机制。方法:分别使用8、16、24、32、40、48及56μmol/L的CDDP处理肺癌细胞系A549和12、24、36、48、60、72及84μmol/L的CDDP处理肺癌细胞系H1299为实验组,同时设立实验组最高浓度CDDP浓度组等体积的DMSO处理的两种细胞的对照组;提取处理后细胞的总RNA,设计SRSF2基因不同的引物(F1∶R1,F2∶F2,F2∶R1),RT-PCR检测mRNA剪接异构体的变化;采用Western-blot检测不同浓度CDDP处理后A549细胞中SRSF2蛋白的表达。结果:在A549和H1299细胞中检测到了6种异构体(a、b、c、d、e、f),且随着处理CDDP浓度的增加,非编码蛋白的mRNA异构体的比例明显上升,主要是Isoform-b和Isoform-e的上升;而编码蛋白的mRNA异构体所占比例明显下降,主要是Isoform-d的下降;同时处理后两种细胞SRSF2的总mRNA水平也逐渐降低,但SRSF2蛋白水平则逐渐升高。结论:在CDDP处理的肺癌细胞A549和H1299中,SRSF2蛋白水平被上调,这种上调可能被SRSF2通过向自身mRNA选择性剪接上调非编码蛋白和下调编码蛋白的mRNA异构体的转录水平来调节。
- 马春霞杨梦莉陈香玲李明阳杨渊刘淑媛史荔俞建昆
- 关键词：顺铂
- 一种四级生物安全实验室病毒化学淋浴消毒验证方法
- 本发明公开了一种四级生物安全实验室病毒化学淋浴消毒验证方法，包括如下步骤：(1)病毒原液制备；(2)病毒载体的制备：取适量事先配制好的粘附基质加至1.5*1.5cm的正方形载体上，后再加100ul上述病毒原液至表面，然后...
- 王云川郑吟秋李静美朱凡丽杨梦莉孙强明
- 2013-2017年国内报道人感染H7N9禽流感病毒死亡病例风险因素的Meta分析被引量：5
- 2018年
- 目的分析2013-2017年中国人感染H7N9禽流感病毒者死亡的相关风险因素。方法通过"万方数据库"、"中国知网(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)"、"维普资讯网"进行检索,收集2013-2017年公开发表的关于H7N9禽流感病例流行病学特征的文献,应用Review Manager 5.0软件对死亡病例的流行病学特征进行Meta分析。结果纳入符合标准的文献20篇,Meta分析结果显示,与女性相比,男性感染H7N9死亡的可能性更高,OR(95%CI)=1.57(1.09~26.00);与其他年份相比,2015年人感染H7N9死亡的可能性更高,OR(95%CI)=2.02(1.23~3.31);与≥60岁组相比,0~14岁和15~59岁组死亡的可能性更低,OR(95%CI)值分别为0.14(0.04~0.52)和0.50(0.29~0.84);与无明确禽类接触史者相比,有接触史者死亡的可能性更高,OR(95%CI)=1.88(1.02~3.45);与无慢性病史者相比,有慢性病史者死亡的可能性更高,OR(95%CI)=8.63(1.44~51.7)。结论年龄、活禽市场暴露、有慢性基础疾病史是H7N9感染死亡的相关风险因素。
- 杨梦莉杨程云朱凡丽陈咏刘龙丁施海晶
- 关键词：禽流感META分析流行病学因素
- ERCC1新的mRNA剪接异构体及其在顺铂处理细胞中的变化
- 2016年
- 为了考察用顺铂处理肺癌和宫颈癌细胞后,ERCC1的mRNA选择性剪接是否发生变化,通过提取处理的肿瘤细胞和对照细胞的总RNA,进行RT-PCR检测,对出现的剪接异构体目的条带进行TA克隆、测序鉴定。结果发现了2个新的ERCC1的mRNA剪接异构体,其中缺失外显子7-9的异构体在所检测的多种癌细胞中普遍存在,并且在顺铂处理下,其所占比例会随顺铂浓度的升高而增加。该异构体的变化揭示细胞可能会通过pre-mRNA选择性剪接调控ERCC1的功能。
- 陈香岭杨梦莉隋旭廉亚茹马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆
- 关键词：生物化学顺铂核苷酸切除修复
- 一种四级生物安全实验室病毒化学淋浴消毒验证方法
- 本发明公开了一种四级生物安全实验室病毒化学淋浴消毒验证方法，包括如下步骤：(1)病毒原液制备；(2)病毒载体的制备：取适量事先配制好的粘附基质加至1.5*1.5cm的正方形载体上，后再加100ul上述病毒原液至表面，然后...
- 王云川郑吟秋李静美朱凡丽杨梦莉孙强明
- 文献传递
- WEE1激酶及其抑制剂在抗肿瘤治疗中的应用进展被引量：3
- 2016年
- WEE1激酶是一种细胞周期调节蛋白,能调控细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)的磷酸化状态,从而调节CDK1与细胞周期蛋白B(cyclin B)复合物的活性从而实现对细胞周期的调控,且对DNA损伤检查点具有重要的调节作用。WEE1是G2/M期阻滞的关键基因,起着重要的监测作用,在一些癌症中过表达,抑制或下调WEE1激酶均能引发有丝分裂灾难,因此WEE1激酶抑制剂可能在抗癌治疗中有关键作用。在癌症的治疗过程中,WEE1抑制剂与DNA损伤剂、化学药物等联合使用会得到比单独使用更为有效,且在p53缺失的癌细胞中能发挥更好的效果。目前WEE1已成为许多癌症治疗的关键靶点之一,其抑制剂MK-1775已处于临床研究阶段,且能增强一些DNA损伤剂对p53缺失的癌细胞的杀伤能力。本文就WEE1激酶及其抑制剂在抗癌治疗中的应用作一综述。
- 隋旭韩斌杨梦莉陈香岭俞建昆牛华
- 关键词：有丝分裂检查点癌症治疗
- 高等级生物安全实验室化学淋浴消毒效果和程序的评价
- 2021年
- 以枯草芽孢杆菌、腮腺炎病毒和肠道病毒为指示菌/毒株对高等级生物安全实验室淋浴系统的消毒效果进行验证,评价化学淋浴系统的运行程序。结果显示,采用消毒淋浴(2min)—暴露维持(1min)—清水淋浴(3min)和全程进行涂擦洗刷的化学淋浴程序能够有效地杀灭指示菌和指示病毒。该研究可为保证高等级生物安全实验室的化学淋浴系统安全可靠运行提供数据支持。
- 杨梦莉梁燕李敬美杨程云王云川刘龙丁施海晶
- 顺铂处理后几种hTERT mRNA剪接异构体的变化
- 2016年
- 目的:利用顺铂处理肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞,检测人类端粒酶逆转录酶催化亚单位(hTERT)mRNA的选择性剪接是否发生变化。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,用顺铂处理实验组细胞,DMSO处理对照组细胞;设计hTERTα+β+、α+β-、α-β+、INS3及DEL[e2]引物,提取两组细胞的总RNA,利用RT-PCR检测hTERT mRNA剪接异构体表达。结果:与对照组细胞相比,随着顺铂浓度的增加,肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞以及人胚肾293FT细胞中hTERTα+β-和INS3异构体比例升高,而DEL[e2]异构体变化不明显。结论:在顺铂引起的DNA损伤情况下,细胞可利用hTERT mRNA选择性剪接调控机制进行调节,通过改变不同异构体的量和所占比例,从而调节端粒酶功能活性。
- 杨梦莉陈香岭隋旭廉亚茹马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆
- 关键词：宫颈肿瘤人胚肾细胞顺铂
