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靶向腺病毒载体介导的EGFP基因在甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异表达被引量：4: 2005年; 目的建立一种在甲胎蛋白(AFP)阳性的肝癌细胞中靶向表达目的基因的重组腺病毒载体。方法基于腺病毒载体Adeno-XTMExpressionsystem,以300bpAFP特异启动子替换穿梭质粒Pshuttle中CMV启动子,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因亚克隆至Pshuttle,HEK293细胞包装腺病毒,收集病毒后分别转染人正常肝脏LO2细胞,人肝癌HepG2细胞及HeLa细胞;通过Northern杂交检测EGFP基因在3种细胞中的转录水平,荧光显微镜下观察3种细胞中绿色荧光蛋白的表达。结果Northern杂交显示,HepG2细胞中有大量EGFP基因的转录,而正常肝细胞LO2和HeLa细胞中仅能检测到微量基因的转录;荧光显微镜检测发现HepG2细胞内有强绿色荧光表达,而在LO2以及HeLa细胞内见极弱绿色荧光。结论在AFP特异启动子作用下,腺病毒携带的目的基因在AFP阳性的肝癌细胞中得到显著转录和表达,而在非AFP阳性细胞仅微量转录,蛋白表达极弱。该腺病毒载体可作为AFP阳性的肝癌基因靶向治疗的适宜载体。; 石毓君刘长安龚建平李旭宏彭勇梅英米粲霍艳英; 关键词：甲胎蛋白类腺病毒载体

解剖性切除对≤5cm肝癌预后影响的Meta分析被引量：2: 2012年; 目的用Meta分析的方法，评价≤5cm肝癌解剖性与非解剖性切除对患者预后的影响。方法检索已公开发表的有关比较≤5cm肝癌解剖性与非解剖性切除对患者术后生存期影响的所有随访严密的临床研究，按纳入和排除标准筛选文献，并对符合条件的所有研究结果进行Meta分析，统计处理使用RevMan5．0软件。结果符合纳入标准的共4篇文献，总样本量776例，其中解剖性切除组484例，非解剖性切除组292例。纳入研究对象年龄53．4—63．0岁，男：女为3．56：1，87．1％患者术前肝功能为Child-PughA级，94．5％患者是单个肿瘤。对比两组间的1、3、5年无瘤生存率和总生存率，结果发现两种手术方式对患者预后影响无明显差别。但敏感性分析提示，肝癌解剖性切除能提高患者3年无瘤生存率（OR=0．72，95％CI：0．52～0．99，P=0．04）。结论≤5cm肝癌解剖性切除能提高患者3年无瘤生存率，但不能延长远期无瘤生存率和总生存率。但两种手术方式对肝癌预后的影响还需规范的、足够大样本的前瞻性随机对照研究来证实。; 田云鸿李敬东赵国刚彭勇石刚徐威李德新李强; 关键词：肝切除术预后 META分析

大鼠原位肝移植模型制作过程中麻醉方法的选择被引量：44: 2003年; 目的　研究在大鼠原位肝移植模型制作过程中麻醉对大鼠的影响 ,以便合理选择正确的麻醉方法。方法　用SD大鼠以改进的二袖套法制作大鼠原位肝移植模型。将 10 0只大鼠随机分为5组 :对照组 ,乙醚组 ,氯胺酮组 ,水合氯醛组 ,戊巴比妥组。观察每种麻醉剂的麻醉过程、对大鼠生理和肝功能的影响以及无肝期开始后的死亡率。结果　每种麻醉剂的麻醉过程不尽相同。麻醉对大鼠生理均有影响 ,其中以乙醚的影响较小 ,戊巴比妥有较大的肝毒性。无肝期开始后氯胺酮组、水合氯醛组、戊巴比妥组死亡率较高 ,而乙醚组无死亡发生。结论　各种麻醉对肝移植大鼠均有明显影响。乙醚具有对生理、肝功影响小 ,无肝期开始后死亡率低的优点 ,可作为制作大鼠原位肝移植模型的首选麻醉方法。; 彭勇龚建平刘长安王炜严律南; 关键词：肝移植疾病模型动物麻醉方法

白细胞介素-1受体相关激酶-4短发夹RNA阻断库普弗细胞激活效应的实验研究被引量：4: 2005年; 目的探讨以白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)特异性短发夹RNA(shRNA)阻断内毒素诱导的库普弗细胞(KCs)激活效应的可行性。方法构建两对表达IRAK-4-shRNA的阳性载体质粒(pSⅡRAK-4-A,pSⅡRAK-4-B)及一对阴性载体质粒(pSⅡRAK-4-C)。分离培养小鼠KCs,分为正常对照组,RNA干扰(RNAi)对照组(转染pSⅡRAK一4 C)与RNAi抑制组(转染pSⅡRAK-4-A, pSⅡRAK-4-B)。质粒转染后24 h,加入0.1 μg/ml脂多糖(LPS)。6 h后,蛋白免疫印迹法及逆转录-聚合酶链反应测定IRAK-4蛋白和mRNA表达水平;酶联免疫吸附法检测0、1、3、6、12 h后KCs的核因子- κB(NF-κB)活性及培养上清液中肿瘤坏死因子α含量。结果RNAi抑制组IRAK-4表达水平,以及LPS刺激后NF-κB活性、肿瘤坏死因子α峰值均明显低于正常对照组和RNAi对照组,t值分别为22.50, 4.18及958.49,P<0.01;尤其是pSⅡRAK-4-A组,抑制效果明显优于pSⅡRAK-4-B,t值分别为12.60, 3.36及256.39,P<0.01。结论以IRAK-4为靶点的shRNA能有效的阻断内毒素诱导的KCs激活效应。; 刘作金李生伟刘长安游海波彭勇李旭宏陈先锋龚建平; 关键词：库普弗细胞白细胞介素-1受体短发夹RNA 细胞激活相关激酶阻断

无肝硬化肝癌患者术后生存分析被引量：4: 2011年; 肝硬化是肝癌的独立危险因素之一，但有15％一20％的肝癌患者无肝硬化病史[1]。本研究回顾性分析1993年8月至2008年6月我科收治的104例无肝硬化肝癌患者的临床资料，旨在探讨影响这类患者预后的因素。; 田云鸿李敬东彭勇李权林李德新李强; 关键词：肝癌患者肝硬化术后独立危险因素

改良“二袖套法”制备大鼠原位肝移植动物模型被引量：6: 2003年; 目的 :介绍改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植动物模型。方法 :采用改进的“二袖套”法进行 110只大鼠原位肝移植。结果 :切取供肝时间平均 37min ,修肝时间平均 13min ,无肝期平均 14min。术中和术后 4h内死亡 8只 ,手术成功率达 93%。术后 1周死亡 11只 ,1周存活率为 89%,主要死亡原因为感染和胆道梗阻。结论 :改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植具有无肝期短、手术成功率高、大鼠术后存活时间长的优点 ,是大鼠原位肝移植的理想术式。; 彭勇龚建平涂兵刘长安; 关键词：肝移植动物近交系

重庆市新生儿脂肪酸氧化代谢病筛查及确诊患儿随访分析被引量：2: 2022年; 目的:了解重庆市脂肪酸氧化代谢病(FAOD)的发病率、临床特征、基因突变特点及预后。方法:采集2020年7月至2022年2月重庆医科大学附属妇女儿童医院新生儿疾病筛查中心招募的35374名新生儿的血液标本,采用串联质谱法检测干血斑中酰基肉碱谱,初筛阳性的患儿于2周内召回,进一步通过尿有机酸、血生化及基因检测等方法确诊,并对确诊患儿进行治疗和随访。结果:35374名新生儿初筛阳性267例,初筛阳性率为0.75%,基因确诊5例(FAOD发病率为1/7075),其中原发性肉碱缺乏症(PCD)3例(发病率为1/11791),短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(SCADD)和极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)各1例(发病率均为1/35374)。3例PCD患儿SLC22A5基因突变以c.1400C>G和c.338G>A常见,c.621G>T为新突变,其中2例患儿予口服补充左卡尼汀,随访期间无临床表现;1例患儿拒绝治疗,于6月龄急性发作,补充左卡尼汀后症状好转,现生长发育正常。1例SCADD患儿检出ACADS基因复合杂合突变(c.417G>C和c.1054G>A),无临床表现。1例VLCADD患儿检出ACADVL基因复合杂合突变(c.1349G>A和c.1843C>T),新生儿期急性发作,治疗好转后予富含中链脂肪酸的奶粉喂养至今,随访期间发育正常。结论:重庆市FAOD发病率较高,其中PCD比例最高,VLCADD患儿临床表型严重。通过新生儿筛查,早诊断、早治疗有助于改善患儿预后。; 陈敏尹一帆刘浩彭勇叶亮罗茜苗静琨; 关键词：新生儿筛查串联质谱法基因突变随访研究

肝移植后巨细胞病毒感染被引量：1: 2004年; 目的　探讨临床肝移植后巨细胞病毒 (CMV)感染的一般特征、临床表现以及诊断和防治方法。方法　检索近 10年来国内、外有关文献并综述。结果　临床肝移植后发生CMV感染率较高 ,常并发其它类型的感染性疾病 ,其临床表现无特异性 ,对CMV感染的早期诊断和防治尚缺乏有效措施。结论　CMV是临床肝移植后最重要的机会致病病毒 ,重视术前、术后CMV感染的监测 ,积极预防和早期治疗是关键。; 彭勇龚建平严律南; 关键词：肝移植巨细胞病毒感染高危因素暴发性肝功能衰竭急性排斥反应

超声吸引刀(CUSA)结合双极电凝在肝叶切除术中的应用研究被引量：9: 2005年; 目的探讨超声吸引刀(Cut-U ltrasound Asp iration,CUSA)结合双极电凝在肝叶切除术中的技巧和可行性。方法对我院2004年7月至2005年7月间进行肝叶切除的82例肝肿瘤病人进行回顾性分析,并根据是否应用这种技术分成A、B两组,A组46例运用CUSA结合双极电凝肝叶切除,B组36例行常规肝叶切除,并比较两组疗效。结果A组46例病人均顺利恢复,而且切肝的术中出血量、术后引流量、转氨酶恢复时间、术后拔管时间、术后平均住院日和并发症发生率均比常规肝叶切除术组疗效好,二者之间有显著性差异(P<0.01)。结论运用CUSA结合双极电凝是肝叶切除术的一种实用而且有效的技术,能提高切除率,并减少并发症的发生率。; 李敬东彭祥玉曾勇李波彭勇雷俊阳武国盛涛; 关键词：肝切除超声吸引刀双极电凝

两种细胞制作的人肝癌裸鼠模型转移性状的比较被引量：3: 2010年; 目的比较两种人肝癌细胞株（HCCLM3和SMMC-7721细胞）构建的人肝癌裸鼠模型的转移潜能。方法实验分为两组：应用HCCLM3细胞构建的人肝癌裸鼠模型组为A组，SMMC7721细胞构建的模型组为B组。比较A组和B组的原发灶的肿瘤大小和病理检查结果。比较各组的肝内转移率、转移数目，累及的肝叶数以及转移肿瘤体积的大小。所有数据由SPSS16．0软件分析，计量资料采用t检验，率的比较采用Fisher确切概率法，计数资料采用秩和检验。结果A组的肝内转移率为100％（8／8）、肝内原发肿瘤体积为（6954±1945）mm^3，B组的肝内转移率为62．5％（5／8）、肝内原发肿瘤体积为（6034±2035）mm^3，两组肝内转移率和原发灶肿瘤体积大小比较，差异无统计学意义。肝内转移的数目、累及肝叶数、转移肿瘤的体积大小A组分别为4．5个（中位数）、3个和975mm^3（中位数），B组分别为1个（中位数）、1个和274mm^3（中位数），两组比较，Z值分别为-2．818、2．289和1．975，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。两组在肺转移率（P=0．001）和累及其他脏器个数（P=0．041）的比较，差异均具有统计学意义。结论HCCLM3细胞制作的人肝癌裸鼠转移模型具有高转移潜能，可应用于人肝癌的生物性状的研究。; 李敬东彭勇戴毅李波魏永刚严律南; 关键词：肝细胞肿瘤转移

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彭勇

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