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Kupffer细胞CD14及Toll样受体4介导大鼠肝移植缺血再灌注损伤的机制被引量：16: 2005年; 目的研究大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14和Toll样受体4(TLR4)的表达及其参与缺血再灌注损伤的机制。方法建立肝移植缺血再灌注模型,并分为正常对照组、缺血再灌注组、抗CD14抗体组,每组均为10只大鼠。分离培养大鼠肝移植缺血再灌注后的Kupffer细胞。检测Kupffer细胞CD14及TLR4的mRNA、蛋白表达、核转录因子κB(NFκB)活性以及培养上清TNFα的分泌量。结果再灌注后Kupffer细胞CD14及TLR4的mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组(P<001),再灌注后核转录因子κB活性、培养上清TNFα表达量明显高于对照组(P<001)。用抗CD14抗体后NFκB活性,TNFα表达量明显下降(与再灌注组相比,P<005),但仍然高于对照组(P<001)。结论缺血再灌注后肠道内毒素(脂多糖)能够上调Kupffer细胞CD14及TLR4的表达,激活NFκB,启动细胞因子的转录和分泌,但除CD14和TLR4以外的其他信号途径参与了缺血再灌注损伤。; 彭勇刘作金龚建平刘海忠甘霖李寿柏; 关键词：CD14 KUPFFER细胞鼠肝缺血再灌注损伤肝移植

SOCS-1在内毒素血症及耐受小鼠肝组织中的表达变化及意义被引量：5: 2010年; 目的:观察内毒素血症及内毒素耐受模型小鼠对LPS刺激的反应性,以及肝组织中SOCS-1表达的变化,试图从机体水平探讨SOCS-1与内毒素耐受状态之间的关系.方法:通过脂多糖(LPS)预处理建立内毒素血症及内毒素耐受动物模型,并与对照组进行比较.分时点用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中TNF-α水平,逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)检测肝组织中TNF-α mRNA的表达水平以及肝组织中SOCS-1 mRNA的表达,并观察肝组织病理改变及超微结构改变,免疫组织化学检测SOCS-1在肝脏的表达.结果:在LPS刺激后,LPS组血清TNF-α水平、TNF-α mRNA、SOCS-1 mRNA均在1h开始升高,至3h时达到峰值,随后又逐渐下降正常水平;PBS组血清TNF-α水平及TNF-α mRNA表达几乎没有明显变化,且无SOCS-1 mRNA表达,与LPS组比较有统计学意义(P<0.01);但是耐受组(ETT)的3h血清TNF-α水平较非耐受组(NETT)低(693.38ng/L±95.2ng/Lvs1110.24ng/L±164.33ng/L,P<0.01);3h肝组织TNF-α mRNA表达峰值较NETT组低(97.96±19.67vs139.14±31.17,P<0.05);而肝组织SOCS-1 mRNA表达峰值较NETT组高(91.58±12.94vs52.82±6.96,P<0.01);肝组织可见脂肪变性、坏死等病理改变,超微结构表现为Kupffer细胞激活,吞噬功能增强;免疫组织化学可见肝组织中SOCS-1的表达.结论:内毒素耐受状态下,肝组织中的SOCS-1 mRNA表达却明显增强,肝组织中的SOCS-1 mRNA表达、Kupffer细胞的激活以及机体的内毒素耐受状态三者间可能有着紧密的联系.; 陈先锋李旭宏游海波刘海忠刘作金龚建平; 关键词：内毒素耐受 KUPFFER细胞

猪原位肝移植体外静脉转流中门脉系统插管的选择: 2005年; 目的　比较在猪原位肝移植体外静脉转流中行门静脉插管或脾静脉插管对血流动力学的影响。方法　选健康美国杜洛克猪60头,配对施行原位肝移植术,根据术中转流时门脉系统插管的不同,随机分为两组,即门静脉插管组(n=15)和脾静脉插管组(n=15)。术中连续监测两组动物血流动力学指标的变化。结果　门静脉插管组15例中死亡2例,其中1例死于术中转流不畅,1例死于DIC; 脾静脉插管组15例中死亡1例,死于失血性休克。脾静脉插管组无肝期为(44.5±7.6) min,明显短于门静脉插管组的(51.5±8.7) min。Ⅲ、Ⅳ期门静脉插管组血流动力学改变与脾静脉插管组相比差异有显著性意义(P<0.05)。结论　在猪原位肝移植体外静脉转流中采用脾静脉插管转流能缩短无肝期,保持术中血流动力学的相对稳定,减少术后相关并发症的发生,是一种有效的静脉转流途径。; 刘海忠龚建平彭勇李旭宏游海波陈先锋赵蕾甘霖; 关键词：插管脾静脉体外静脉转流原位肝移植健康美

内毒素介导Kupffer细胞激活的跨膜信号传导分子机制研究: 龚建平韩本立李生伟李旭宏刘海忠冯虎翼游海波陈先锋吴传新; 本研究选用单核-巨噬细胞系统中最典型的代表KCs和炎性介质中最典型的代表LPS，瞄准LPS与细胞结合的关键部位——脂多糖受体CD14和细胞激活的中心环节——核转录因子NF-κB，采用内毒素血症动物模型活体实验、细胞分离离...; 关键词：; 关键词：内毒素 KUPFFER细胞 CD14

土贝母皂苷甲增强人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性被引量：4: 2011年; 目的探讨土贝母皂苷甲(tubeimoside 1,TBMS1)促进人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂(cisplatin,DDP)的增敏作用。方法采用MTT法分别检测顺铂和TBMS1对A2780/DDP细胞作用的半抑制浓度值(IC50),将实验分为对照组:只加等量生理盐水;顺铂组:给予6μmol/L顺铂处理;联合用药Ⅰ组:6μmol/L顺铂+3μmol/L TBMS1;联合用药Ⅱ组:6μmol/L顺铂+6μmol/L TBMS1。按上述方法处理细胞后,MTT法检测细胞活力;电泳法检测细胞内DNA损伤;流式细胞技术检测细胞凋亡及周期;Western blot分析周期蛋白A(Cyclin A)和周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果 TBMS1(3、6μmol/L)与顺铂(6μmol/L)联用使人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性增强;细胞的DNA损伤随TBMS1浓度的增加而明显增多;细胞周期被阻滞在S期,联合用药Ⅰ和Ⅱ组S期所占比例分别为(51.23±3.53)%、(77.34±2.80)%;细胞凋亡率为(5.19±0.78)%、(7.11±1.06)%;Cyclin A的表达为1.89±0.28及2.91±0.43,CyclinD1为0.66±0.09及0.28±0.05(P<0.05,P<0.01)。结论 TBMS1显著增加顺铂对A2780/DDP细胞增殖抑制作用,Cyclin A、Cyclin D1可能参与其调节。; 刘海忠于超杨竹王应雄陈文娟殷娟李文明刘洪涛; 关键词：顺铂细胞凋亡周期蛋白卵巢肿瘤

奥沙利铂长循环脂质体对人结直肠癌SW480细胞凋亡影响被引量：2: 2011年; 目的探讨奥沙利铂长循环脂质体对人结直肠癌SW480细胞的凋亡作用。方法采用荧光标记的长循环脂质体,奥沙利铂长循环脂质体和游离奥沙利铂分别处理人结直肠癌SW480细胞,流式细胞仪、荧光显微镜检测细胞对脂质体的摄取;MTT分析载药脂质体对细胞增殖影响;透射电镜观察细胞超微结构变化;流式细胞仪及TUNEL检测细胞凋亡;Western blot分析actived-caspase-3(P17)的表达。结果脂质体被细胞摄取,2 h的荧光强度为(197.72±8.92),24 h的荧光强度为(641.74±44.46);2.6 mmol/L的奥沙利铂长循环脂质体(含28 mg/L奥沙利铂)对细胞的活性影响及凋亡诱导作用大于28 mg/L游离奥沙利铂(P<0.01);actived-caspase-3蛋白的表达随细胞凋亡增加而上调(P<0.01)。结论奥沙利铂长循环脂质体对人结直肠癌SW480细胞有显著凋亡诱导作用。; 杨闯刘海忠傅仲学; 关键词：脂质体奥沙利铂结直肠肿瘤

肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14的表达机制被引量：5: 2004年; 目的:研究大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞脂多糖受体CD14表达即其参与缺血再灌注损伤的机制. 方法:分离培养大鼠Kupffer细胞,分为正常对照组,肝移植缺血再灌注组,抗CD14抗体组,检测Kupffer细胞CD14mRNA、膜蛋白表达,核转录因子κB活性、以及培养上清TNF-α、IL-1的分泌量. 结果:再灌注后Kupffer细胞CD14mRNA和膜蛋白表达明显高于对照组(mRNA 1.28±0.12 vs 0.42+0.02;膜蛋白23.7±2.36 vs 6.3±1.27,P<0.01);再灌注后核转录因子κB 活性、培养上清TNF-α、IL-1表达量明显高于对照组(NF-κB 2.79±0.48 vs 0.27±0.01;TNF-α205.9±12.04 ng/L vs 57.4±4.35 ng/L;IL-1 176.8±8.94 ng/L vs 37.6±3.47 ng/L, P<0.01);用抗CD14抗体后NF-κB活性、TNF-α、IL- 1表达量与再灌注相比明显下降(NF-κB 1.34±0.24 vs 2.79±0.48;TNF-α129.6±6.48 ng/L vs 205.9±12.04 ng/L;IL-1 103.4+5.74 ng/L vs 176.8±8.94 ng/L;P<0.05),但仍然高于对照组(NF-κB 1.34±0.24 vs 0.27±0.01;TNF-α129.6±6.48 ng/L vs 57.4±4.35 ng/L;IL-1 103.4+5.74 ng/L vs 37.6±3.47 ng/L.P<0.01). 结论:缺血再灌注时LPS够上调Kupffer细胞CD14表达, 激活NF-κB,启动细胞因子的转录和分泌,但尚存在除CD14以外的其他信号途径参与了NF-κB的激活和缺血再灌注损伤.; 彭勇龚建平刘长安李生伟刘海忠李寿柏; 关键词：肝移植缺血再灌注 KUPFFER细胞细胞因子

用腹腔镜途径成功治愈乳糜性腹水1例被引量：1: 2005年; 陈先锋龚建平李旭宏游海波刘海忠; 关键词：腹腔镜乳糜性腹水

核因子-κB圈套对Kupper细胞活化的抑制作用及其机制被引量：9: 2006年; 目的探讨核因子-kB(NF-kB)圈套对大鼠Kupper细胞(KCs)活化的抑制作用及其机制。方法分离大鼠KCs并随机分为3组：正常对照组、内毒素(LPS)刺激组及NF-kB圈套组。后者KCs在LPS刺激前转染NF-kB圈套。除对照组外,两个实验组培养液中加入终浓度为1mg/ L的LPS。于LPS刺激6h后,凝胶电迁移率改变分析法(EMSA)检测NF-kB蛋白结合活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测KCs膜表面CD80 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6表达情况。结果转染NF-kB圈套可以高效抑制KCs激活,EMSA结果显示NF-kB活性仅为LPS组的0．53,RT-PCR结果显示KCs CD80 mRNA表达仅为LPS组的0．46,ELISA结果显示培养上清TNF-α表达量仅为LPS组的0．37,IL-6仅为LPS组的0．60。结论NF-kB圈套可以高效抑制NF-kB的转录活性,降低KCs膜表面共刺激分子和细胞因子的产生,为活体内应用NF-kB圈套提供了可靠的实验依据。; 彭勇李敬东彭祥玉刘海忠刘作金龚建平; 关键词：核因子-ΚB 细胞因子

普通外科的历史回顾与展望被引量：1: 2003年; 刘海忠龚建平; 关键词：普通外科直观思维理论思维

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