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Kupffer细胞在肝移植缺血再灌注损伤中的作用: 2020年; 目的分析Kupffer细胞(KCs)与肝移植缺血再灌注损伤(IRI)的关系。方法收集近年KCs在肝移植IRI中研究的相关文献并进行综述。结果近年研究表明,先天性免疫与适应性免疫皆与肝脏IRI的发生、发展以及KCs激活密切相关。KCs是肝脏常驻巨噬细胞,其在无菌性炎症损伤中起着关键作用。KCs可分泌多种促炎因子而加剧肝细胞损伤,也可通过上调抗炎因子来改善肝脏IRI。结论肝脏IRI可激活先天免疫系统和适应性免疫系统而引起损伤肝细胞的无菌炎症反应。在肝脏IRI期间,活化的KCs可分泌促炎因子和抗炎因子而发挥损伤和保护肝细胞的双重作用。; 曹铸敏吴欣怡刘长安龚建平; 关键词：KUPFFER细胞肝移植缺血再灌注损伤

靶向腺病毒载体介导的EGFP基因在甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异表达被引量：4: 2005年; 目的建立一种在甲胎蛋白(AFP)阳性的肝癌细胞中靶向表达目的基因的重组腺病毒载体。方法基于腺病毒载体Adeno-XTMExpressionsystem,以300bpAFP特异启动子替换穿梭质粒Pshuttle中CMV启动子,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因亚克隆至Pshuttle,HEK293细胞包装腺病毒,收集病毒后分别转染人正常肝脏LO2细胞,人肝癌HepG2细胞及HeLa细胞;通过Northern杂交检测EGFP基因在3种细胞中的转录水平,荧光显微镜下观察3种细胞中绿色荧光蛋白的表达。结果Northern杂交显示,HepG2细胞中有大量EGFP基因的转录,而正常肝细胞LO2和HeLa细胞中仅能检测到微量基因的转录;荧光显微镜检测发现HepG2细胞内有强绿色荧光表达,而在LO2以及HeLa细胞内见极弱绿色荧光。结论在AFP特异启动子作用下,腺病毒携带的目的基因在AFP阳性的肝癌细胞中得到显著转录和表达,而在非AFP阳性细胞仅微量转录,蛋白表达极弱。该腺病毒载体可作为AFP阳性的肝癌基因靶向治疗的适宜载体。; 石毓君刘长安龚建平李旭宏彭勇梅英米粲霍艳英; 关键词：甲胎蛋白类腺病毒载体

大鼠原位肝移植模型制作过程中麻醉方法的选择被引量：44: 2003年; 目的　研究在大鼠原位肝移植模型制作过程中麻醉对大鼠的影响 ,以便合理选择正确的麻醉方法。方法　用SD大鼠以改进的二袖套法制作大鼠原位肝移植模型。将 10 0只大鼠随机分为5组 :对照组 ,乙醚组 ,氯胺酮组 ,水合氯醛组 ,戊巴比妥组。观察每种麻醉剂的麻醉过程、对大鼠生理和肝功能的影响以及无肝期开始后的死亡率。结果　每种麻醉剂的麻醉过程不尽相同。麻醉对大鼠生理均有影响 ,其中以乙醚的影响较小 ,戊巴比妥有较大的肝毒性。无肝期开始后氯胺酮组、水合氯醛组、戊巴比妥组死亡率较高 ,而乙醚组无死亡发生。结论　各种麻醉对肝移植大鼠均有明显影响。乙醚具有对生理、肝功影响小 ,无肝期开始后死亡率低的优点 ,可作为制作大鼠原位肝移植模型的首选麻醉方法。; 彭勇龚建平刘长安王炜严律南; 关键词：肝移植疾病模型动物麻醉方法

白细胞介素-1受体相关激酶-4短发夹RNA阻断库普弗细胞激活效应的实验研究被引量：4: 2005年; 目的探讨以白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)特异性短发夹RNA(shRNA)阻断内毒素诱导的库普弗细胞(KCs)激活效应的可行性。方法构建两对表达IRAK-4-shRNA的阳性载体质粒(pSⅡRAK-4-A,pSⅡRAK-4-B)及一对阴性载体质粒(pSⅡRAK-4-C)。分离培养小鼠KCs,分为正常对照组,RNA干扰(RNAi)对照组(转染pSⅡRAK一4 C)与RNAi抑制组(转染pSⅡRAK-4-A, pSⅡRAK-4-B)。质粒转染后24 h,加入0.1 μg/ml脂多糖(LPS)。6 h后,蛋白免疫印迹法及逆转录-聚合酶链反应测定IRAK-4蛋白和mRNA表达水平;酶联免疫吸附法检测0、1、3、6、12 h后KCs的核因子- κB(NF-κB)活性及培养上清液中肿瘤坏死因子α含量。结果RNAi抑制组IRAK-4表达水平,以及LPS刺激后NF-κB活性、肿瘤坏死因子α峰值均明显低于正常对照组和RNAi对照组,t值分别为22.50, 4.18及958.49,P<0.01;尤其是pSⅡRAK-4-A组,抑制效果明显优于pSⅡRAK-4-B,t值分别为12.60, 3.36及256.39,P<0.01。结论以IRAK-4为靶点的shRNA能有效的阻断内毒素诱导的KCs激活效应。; 刘作金李生伟刘长安游海波彭勇李旭宏陈先锋龚建平; 关键词：库普弗细胞白细胞介素-1受体短发夹RNA 细胞激活相关激酶阻断

肿瘤坏死因子、内皮素和一氧化氮在肝硬化大鼠门静脉高压高动力循环综合征中作用的研究被引量：9: 2002年; 目的　了解肿瘤坏死因子 (TNF)、内皮素 (ET)和一氧化氮 (NO)在门静脉高压高动力循环综合征 (HCS)中的作用和地位以及门静脉血中含量的高低对HCS的影响。方法　四氯化碳诱导肝硬化大鼠在用抗TNF抗体 ,一氧化氮合成酶 (NOS)抑制剂NG 甲基 L 精氨酸处理前后测定门脉血TNF ,ET和NO含量及肝组织NOS活性 ,同时监测血流动力学。结果　肝硬化大鼠门脉血中TNF ,NO水平显著增高 ,ET也有轻度上升 ,肝组织NOS活性显著增高。在注射抗TNF抗体后 ,门脉血中TNF含量显著下降至对照水平 ,ET水平无变化 ,肝组织NOS活性较处理前下降 15 %～30 % ,同时HCS部分缓解。在注射NG 甲基 L 精氨酸后 ,门脉血NO含量及肝组织NOS活性显著降低至对照水平 ,HCS明显缓解 ,门脉压力降至正常范围。结论　NO在HCS形成中起关键作用 ,TNF可能通过激活NOS使NO升高而发挥作用 ,ET与HCS形成无直接因果关系。; 王继见高根五刘长安丁雄姚榛祥; 关键词：肝硬化肿瘤坏死因子内皮素一氧化氮门静脉高压症

HIFU联合载HSV-TK基因的纳米级超声分子探针治疗对裸鼠肝移植瘤血管生成的影响被引量：3: 2017年; 目的观察高强度聚焦超声(HIFU)治疗裸鼠肝移植瘤后,再注入载单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(HSV-TK)的纳米级超声分子探针治疗效果,并探讨其治疗机制。方法用人肝癌HepG2细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型60只,采用CZF型HIFU机治疗后,分别经鼠尾静脉注射200μL的微泡+HSV-TK+磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC3)(A组)、微泡+HSV-TK(B组)、HSV-TK+GPC3(C组)、HSV-TK(D组)、微泡+GPC3(E组)、PBS液(F组),每3天1次,共注射3次。每次注射后,根据超声监测微泡到达靶组织的情况,对A、B、D、E组用DZC型超声转染仪给予2W/cm^2、1MHz、5min超声辐照。首次注射48h后,各组经腹腔注射0.2mL更昔洛韦(GCV,100mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续注射14d。治疗结束后,用免疫组织化学法测残瘤中微血管密度(MVD)水平,用Western blot和免疫组织化学法测量残癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的变化情况,用Q-PCR检测肿瘤中HIF-1α、VEGF基因的转录水平。结果治疗14d后,B、C、D、E、F组肿瘤组织中HIF-1α、VEGF蛋白表达量,VEGF及HIF-1αmRNA水平,MVD均明显高于A组(P<0.05)。结论载HSV-TK的纳米级超声分子探针治疗可降低HIFU治疗后残瘤组织中的VEGF、HIF-1α及MVD水平,从而抑制肿瘤的生长,提高HIFU的治疗效果。; 谢辉刘山曾辉李友伟许进丁雄刘长安李峰; 关键词：血管内皮生长因子A 缺氧诱导因子1 分子探针

川芎嗪配伍心得安预防食管静脉曲张破裂出血的临床对照研究被引量：16: 2000年; 目的探讨川芎嗪配伍心得安预防肝硬化食管静脉曲张破裂出血（ｅｓｏｐｈａｇｅａｌｖａｒｉｃｅｓ　ｂｌｅｅｄｉｎｇ，ＥＶＢ）复发的效果及其作用机制。方法对３８例治疗组患者和３６例对照组患者进行前瞻性对照研究，在用药前后用彩色多普勒超声仪检测其门静脉系统血流动力学的变化，并动态监测患者的血压、心率、肝、肾功能及ＥＶＢ复发情况。结果用药１周后治疗组门静脉内径、脾静脉血流量显著下降，于４周后门静脉血流量、脾静脉血流量、门静脉内径、脾静脉内径，分别下降为（１１５２．３６ ± ３８７．４６）ｍｌ／ｍｉｎ，（５２９、３５ ± ３２６．３）ｍｌ／ｍｉｎ，（１．３６ ± ０．２８）ｃｍ，（０．９４ ± ０．１９）ｃｍ，与用药前比较有显著差异，临床上未见明显副反应；随访２年，对照组再出血率和病死率均显著高于治疗组，两组中ＣｈｉｌｄＣ级患者的再出血率和病死率无显著差异。结论小剂量川芎嗪与心得安联用预防ＥＶＢ复发是安全有效的，值得在临床进一步研究和试用。; 李孝生沈鼎明邹建忠刘长安张炼; 关键词：食管静脉曲张川芎嗪心得安 EVB

腹腔镜胆总管探查胆管一期缝合与T管引流的Meta分析被引量：17: 2013年; 目的:系统评价腹腔镜胆总管探查(laparoscopic common bile duct exploration,LCBDE)取石后胆管一期缝合(primaryclosure,PC)与T管引流(T-tube drainage,TD)治疗胆总管结石的临床疗效。方法:检索Cochrane Library、PubMed、EMbase、中国生物医学、中国期刊全文等数据库,查找2000-2012年发表的关于LCBDE取石后PC与TD治疗胆总管结石的文献资料,进行Meta分析。结果:共纳入5篇文献,合计572例患者。Meta分析结果显示,LCBDE取石后PC与TD相比,在胆道相关并发症发生率上无统计学差异(RR=0.87,95%CI[0.46,1.63],P=0.66),但在手术时间(WMD=-28.66,95%CI[-34.00,-23.32],P<0.000 01)、术后住院时间(WMD=-3.03,95%CI[-3.85,-2.47],P<0.000 01)、总并发症发生率(RR=0.55,95%CI[0.34,0.89],P=0.01)等方面明显减少。结论:LCBDE取石后PC安全有效,可作为治疗胆总管结石的有效方法。; 肖林糠何承峻李红阳刘长安; 关键词：腹腔镜胆总管探查一期缝合 T管引流 META分析

全反式维甲酸增强携单纯疱疹病毒胸苷酸激酶基因的超声微泡对SMMC-7721细胞的旁观者效应被引量：2: 2011年; 目的观察经全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导后,单纯疱疹病毒胸苷酸激酶/丙氧鸟苷系统(HSV-TK/GCV)对人肝癌细胞SMMC-7721旁观者效应的影响。方法免疫组化法观察经全反式维甲酸诱导前后SMMC-7721细胞连接蛋白Cx32的表达;将含有HSV-TK基因的质粒通过静电吸附在脂质微泡表面上,采用超声辐照转染并用倒置显微荧光镜及RT-PCR观察TK基因的转入及表达;MTT法观察经全反式维甲酸诱导后HSV-TK/GCV对肝癌细胞SMMC-7721的旁观者效应。结果经全反式维甲酸诱导后SMMC-7721细胞膜上Cx32表达明显增加,而胞质内仅少量表达;通过超声辐照后HSV-TK基因可顺利转入SMMC-7721细胞中并稳定表达;与对照组相比,经全反式维甲酸诱导组可明显提高HSV-TK/GCV对肝癌细胞SMMC-7721的旁观者效应(P<0.05)。结论全反式维甲酸可提高SMMC-7721细胞中连接蛋白Cx32的表达且能正确定位于细胞膜上,这可能与其能增强HSV-TK/GCV系统对肝癌细胞SMMC-7721的旁观者效应有关。; 廖伟李生伟刘长安龚建平丁雄蔡宇周世骥; 关键词：维甲酸超声微泡连接蛋白32

改良“二袖套法”制备大鼠原位肝移植动物模型被引量：6: 2003年; 目的 :介绍改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植动物模型。方法 :采用改进的“二袖套”法进行 110只大鼠原位肝移植。结果 :切取供肝时间平均 37min ,修肝时间平均 13min ,无肝期平均 14min。术中和术后 4h内死亡 8只 ,手术成功率达 93%。术后 1周死亡 11只 ,1周存活率为 89%,主要死亡原因为感染和胆道梗阻。结论 :改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植具有无肝期短、手术成功率高、大鼠术后存活时间长的优点 ,是大鼠原位肝移植的理想术式。; 彭勇龚建平涂兵刘长安; 关键词：肝移植动物近交系

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刘长安

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