杨红杰 作品数:7 被引量:13 H指数:2 供职机构: 北京农学院动物科学技术学院 更多>> 相关领域: 农业科学 理学 更多>>
高低剂量伪狂犬病弱毒疫苗临床免疫效果的比较 引言猪的伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的一种危害严重的传染病,疫苗接种是防控该病的主要手段。一般而言,疫苗诱导免疫反应的强弱与其抗原剂量有关。现阶段猪的伪狂犬病疫苗生产厂家主要有国内、国外厂家,其生产的伪狂犬病疫... 杨倩 杨红杰 周双海文献传递 伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:5 2015年 伪狂犬病病毒(PRV)野毒有gE基因,而其疫苗毒株无gE基因,这为检测有无PRV野毒感染提供参考。用PCR方法扩增PRV的gE基因片段,构建含有PRV gE基因片段的重组质粒。以系列稀释后的重组质粒作为模板,应用SYBR GreenⅠ来进行检测PRV gE基因的实时荧光定量PCR扩增。结果显示:在(6.9×107~6.9×101)copies/μL范围内,相邻扩增曲线之间间距均匀,所有产物具有单一整齐的熔解曲线峰,标准曲线具有优良的线性关系。该方法最低可准确检测69copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2%,对PRV-gE基因缺失疫苗毒株和常见猪源DNA病毒的检测结果均为阴性,对临床样品的检出率高于常规PCR方法。研究结果表明,建立了1种特异性强、灵敏度高、重复性好的检测PRV gE基因的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,可用于PRV野毒感染的定量检测。 李雪明 于红欣 杨红杰 王俊 王俊关键词:伪狂犬病病毒 GE基因 荧光定量PCR 高低效价伪狂犬病疫苗免疫效果的比较 被引量:1 2021年 伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的一种危害养猪业的重要疫病,PRV-gE基因缺失疫苗接种是其有效预防措施,疫苗免疫虽能阻止临床发病,但难以完全阻止野毒感染。2010年以来,猪的伪狂犬病在国内出现了明显反弹,部分猪场的PRV野毒感染率明显上升,疫苗效价不足可能是其重要原因之一。现有多种猪伪狂犬病商品疫苗,不同商品疫苗标识的每头份剂量之间存在明显差异。 方伟 杨倩 杨红杰 任国鑫 李焕荣 张永红 周双海关键词:伪狂犬病 疫苗效价 野毒感染 临床发病 PRV 免疫效果 伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 为建立一种快速检测伪狂犬病病毒(PRV)野毒的荧光定量PCR方法.根据PRV-gE基因序列设计1对特异性引物,构建含有PRV-gE基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板来建立定量检测PRV-gE的SYBR G... 于红欣 李雪明 杨红杰 王俊 周双海关键词:伪狂犬病病毒 GE基因 荧光定量聚合酶链反应 文献传递 伪狂犬病病毒gB基因荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:9 2015年 用PCR方法扩增伪狂犬病病毒(PRV)的gB基因片段,构建含有gB基因片段的重组质粒,以不同浓度的PRV-gB基因重组质粒为模板应用SYBR Green I方法来建立检测PRV-gB基因载量的荧光定量PCR方法。结果显示:在(8.6×107~8.6×101)copies/μL范围内,回归方程为y=-3.5604x+41.165,其决定系数为0.9993,显示出优良的线性关系;扩增产物的熔解曲线仅有一个特异性单峰。该方法对猪圆环病毒、猪细小病毒、猪细环病毒等常见猪源DNA病毒进行检测时均没有扩增曲线,重复性试验的变异系数小于2%,表明建立了特异性强、重复性好、灵敏性高的PRV-gB基因SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。用该方法检测8种商品伪狂犬病弱毒活疫苗的每头份剂量的病毒载量,结果显示不同商品伪狂犬病弱毒活疫苗之间的病毒载量存在明显差异,与其标识剂量基本一致,表明该荧光定量PCR检测方法可用于疫苗剂量检测。 杨红杰 于长青 林树伯 于红欣 周双海 李继良关键词:伪狂犬病病毒 GB基因 SYBR 疫苗剂量 猪群伪狂犬病病毒野毒感染快速检测方法的比较 为比较猪群伪狂犬病病毒野毒感染的快速检测方法,53头5~6月龄肥育猪的血清和扁桃体,用ELISA方法检测血清PRV-gE抗体,用常规PCR方法和荧光定量PCR方法检测血清与扁桃体中的PRV-gE核酸,比较分析猪群PRV野... 周双海 李雪明 于红欣 杨红杰 王俊关键词:伪狂犬病病毒 野毒感染 扁桃体 血清 文献传递 伪狂犬病病毒野毒感染快速检测方法的比较 2016年 【目的】对猪群伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染的快速检测方法进行比较。【方法】采集肥育猪的血清和扁桃体,用ELISA方法检测血清中PRV-gE蛋白抗体,用常规PCR方法和荧光定量PCR方法检测血清与扁桃体中的PRV-gE基因,比较分析猪群PRV野毒感染情况。【结果】结果显示,荧光定量PCR方法对血清与扁桃体中的PRV-gE基因的检出率均高于常规PCR方法,gE基因在扁桃体中的检出率高于血清,而gE蛋白抗体检出率高于gE基因检出率。【结论】PRV-gE蛋白抗体检测敏感性高于gE基因检测,荧光定量PCR对gE基因的检测敏感性高于常规PCR,gE基因在扁桃体中的检测敏感性高于血清,为猪群PRV野毒感染快速检测方法的选用提供了试验依据。 杨红杰 李雪明 于红欣 邹战明 杨倩 周双海关键词:伪狂犬病病毒 野毒感染 血清 扁桃体