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周双海: 作品数：144 被引量：256H指数：8; 供职机构：北京农学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市教委科技计划面上项目更多>>; 相关领域：农业科学理学医药卫生生物学更多>>

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猪圆环病毒2型感染对猪肺泡巨噬细胞功能的影响: 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征等相关疾病的重要病原.猪肺泡巨噬细胞(PAM)既是其重要靶细胞,又是重要的免疫细胞.该研究将PCV2 BF株经口、...; 周双海; 关键词：猪圆环病毒2型猪肺泡巨噬细胞凋亡抗原递呈细胞因子

排毒逐瘀散等中西药物对高致病性猪蓝耳病的防治效果调查: 对自行研制的排毒逐瘀散和其它中兽药、西药及其中西药结合等药物防治高致病性猪蓝耳病的效果在全市范围内进行了调查.结果显示,中兽药防治高病性猪蓝耳病效果确实,明显优于西药;与目前常用的其它几种中兽药相比,排毒逐瘀散对高病性猪...; 唐耀平周双海刘若愚皮绍娣邓星云; 关键词：高致病性猪蓝耳病; 文献传递

嵌合猪圆环病毒的构建被引量：3: 2016年; 【目的】为了构建猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)的嵌合病毒,并为PCV2疫苗研究奠定基础。【方法】以PCV1基因组为骨架,将其衣壳基因替换为PCV2衣壳基因,来构建嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)DNA克隆,将PCV1-2DNA克隆转染PK-15细胞以获得拯救病毒PCV1-2,并测定PCV1-2在PK-15细胞中的增殖特性。【结果】酶切和序列测定显示成功构建出PCV1-2DNA克隆;免疫荧光试验和PCR检测显示成功获得拯救病毒PCV1-2,其效价达到106.0 TCID50/mL以上;一步生长曲线显示PCV1-2在PK-15细胞中的增殖特性与其亲本病毒近似。【结论】成功构建了1种具有较高体外增殖能力的嵌合猪圆环病毒。; 邵小雪杨倩孟凡伟于红欣周双海

猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量：8: 2016年; 【目的】建立一种定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量PCR方法。【方法】用RTPCR方法扩增PRRSV的N基因片段,构建含有N基因片段的重组质粒,以不同浓度的PRRSV-N基因重组质粒作为模板来进行检测PRRSV的SYBR Green I荧光定量PCR扩增。【结果】PRRSV SYBR Green I荧光定量PCR的扩增效率为98.2%,标准曲线的决定系数为0.9995,可准确检测的最低核酸模板浓度为60copies/μL,重复性试验的变异系数小于3%,对3种常见的猪源RNA病毒的检测结果全为阴性。临床检测显示,PRRS病猪的血清中PRRSV载量极显著(P<0.01)高于PRRSV亚临床感染猪。【结论】建立了一种可用于PRRSV定量检测与PRRS早期快速诊断的特异性强、灵敏度高、重复性好的PRRSV SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。; 单晶晶陈天慧于红欣王立娇周双海; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 SYBR I 荧光定量PCR

PCV2和猪伪狂犬病弱毒疫苗体外共接种对猪PBMC中IL-2及IL-6 mRNA表达的影响被引量：3: 2011年; 将猪圆环病毒2型(PCV2)与猪伪狂犬病弱毒疫苗(PRV)体外单接种和共接种仔猪外周血单个核细胞(PB-MC),采用real-time PCR技术定量检测接种后不同时间PBMC细胞因子IL-2和IL-6的mRNA表达水平,以分析PCV2对PRV免疫反应的影响。结果显示,PRV接种组PBMC中IL-2与IL-6的mRNA表达均出现显著上调(P<0.05),PCV2接种组IL-2与IL-6的mRNA表达在接种后的部分时间也出现显著上调,但PCV2与PRV共接种组的IL-2与IL-6的mRNA表达较PRV组均出现显著下调,表明PCV2能够抑制PRV促进猪PBMC中IL-2与IL-6的mRNA表达上调作用,提示PCV2可能会对PRV的免疫反应产生不利影响。; 高峰贾磊贾超伟任慧英周双海; 关键词：PCV2 外周血单个核细胞 IL-2 IL-6

高低效价伪狂犬病疫苗免疫效果的比较被引量：1: 2021年; 伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的一种危害养猪业的重要疫病,PRV-gE基因缺失疫苗接种是其有效预防措施,疫苗免疫虽能阻止临床发病,但难以完全阻止野毒感染。2010年以来,猪的伪狂犬病在国内出现了明显反弹,部分猪场的PRV野毒感染率明显上升,疫苗效价不足可能是其重要原因之一。现有多种猪伪狂犬病商品疫苗,不同商品疫苗标识的每头份剂量之间存在明显差异。; 方伟杨倩杨红杰任国鑫李焕荣张永红周双海; 关键词：伪狂犬病疫苗效价野毒感染临床发病 PRV 免疫效果

不同稀释液配方对不同品种公猪精液常温保存效果的试验研究被引量：7: 2006年; 比较了6种不同稀释液配方对不同品种公猪精液的常温保存效果。结果表明,6头种公猪精液的常温保存总时间和有效保存时间(精子活力>0.3的时间)都有差异。精液保存存活总时间长短的公猪品种依次是台湾杜洛克猪(小)(94h)、法国大白猪(72.5h)、台湾杜洛克猪(大)(66.67h)、比利时长白猪(小()46.5h)、比利时长白猪(大()45.8h)、皮特兰猪(42.33h);精液有效保存时间长短依次是台湾杜洛克猪(大)(39.33h)、皮特兰猪(34.33h)、法国大白猪(30.17h)、比利时长白猪(大()20.83h)、台湾杜洛克猪(小)(16h)、比利时长白猪(小()2.5h)。同时,6种稀释液的精液保存总时间和有效保存时间结果是:精子有效保存时间为,猪场用进口稀释液6号(36.5h)效果较好,但只与5号稀释液(12.5h)间差异显著(P<0.05),与其它4种稀释液之间的差异不显著(P>0.05);精子保存总时间为,猪场用进口稀释液6号(82.17h)与4号(59.33h)、2号(58.5h)、5号(32.33h)稀释液间差异显著(P<0.05),与1号(69.67h)、3号(64.83h)稀释液差异不显著(P>0.05)。; 王占赫杜永所郭玉琴周双海刘凤华鲁琳魏秀莲陈俊杰刘学荣; 关键词：公猪精液稀释液常温保存

猪圆环病毒II型感染抑制伪狂犬病病毒疫苗的体液免疫反应被引量：8: 2013年; 为了探讨猪圆环病毒II型(PCV2)感染对伪狂犬病病毒(PRV)疫苗体液免疫反应的影响,检测了PCV2实验感染仔猪血清中PRV疫苗抗体含量的动态变化。将仔猪随机分成二组,一组仔猪进行PCV2接种和PRV疫苗免疫而作为PCV2组;另一组仔猪不予PCV2接种但进行PRV疫苗免疫而作为对照组。所有仔猪在PCV2接种后14天均进行PRV弱毒疫苗免疫,用间接ELISA检测仔猪血清中病毒特异性抗体;到PCV2接种后14天,PCV2组仔猪全部出现PCV2病毒血症。在PRV疫苗免疫后7天,多数仔猪血清中可检测到疫苗抗体之后疫苗抗体含量逐渐上升,在免疫后14天时对照组疫苗抗体水平显著(P<0.05)高于PCV2组,但在免疫后21天时两组之间抗体水平没有差异。研究结果显示:PCV2实验感染仔猪的PRV疫苗抗体产生出现延迟,表明PCV2感染可抑制PRV疫苗诱导的体液免疫反应。; 高峰孟凡伟单晶晶周双海王志军段佳强张军; 关键词：猪圆环病毒II型仔猪抗体体液免疫反应

猪圆环病毒2型感染抑制仔猪伪狂犬病疫苗抗体的产生: 为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染对仔猪伪狂犬病疫苗抗体产生的影响,将12头35日龄健康普通仔猪随机平均分成2组,一组滴鼻口服106,05TCID50 PCV2作为感染组,另一组不予接种作为对照。到接种后14天,感染仔...; 孟凡伟高峰单晶晶周双海; 关键词：猪圆环病毒2型伪狂犬病疫苗仔猪抗体; 文献传递

鸡传染性支气管炎病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：5: 2013年; 为定量检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)载量,建立IBV的Real-timeRT-PCR方法。用RT-PCR方法扩增出IBV的N基因片段,并克隆到pEASY-T3载体中,构建成含有N基因片段的重组质粒。应用该重组质粒进行SYBRGreenⅠReal-timePCR,建立了定量检测IBV核酸的标准曲线与直线回归方程,该方法显示:特异性强,检测下限至少达到5.58×102拷贝/μL,其重复性试验的变异系数小于3.2%;用建立的方法对实验接种IBVM41株的雏鸡组织中的病毒核酸进行了定量检测,检测结果显示:攻毒后肾脏中IBV含量高于支气管和肺脏,支气管和肺脏中病毒含量在攻毒后第3天高于攻毒后第7、10天,并证实临床表现与病毒载量之间存在密切关系。研究结果表明,建立的Real-timeRT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好,可用于IBV的定量检测。; 王鹏高峰王园杨莹路红周双海刘凤华; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒 REAL-TIME RT-PCR

周双海

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