张辉
- 作品数：55 被引量：147H指数：6
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院更多>>
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- FoxO1经ATF6调控Hcy诱导的肝细胞凋亡被引量：4
- 2021年
- 目的探讨叉头状转录因子(FoxO1)在同型半胱氨酸(Hcy)诱导肝细胞凋亡中的作用及机制。方法随机选取10周龄雄性cbs^+/-与cbs+/+小鼠各8只饲以2%高蛋氨酸饮食12周,qRT-RCR和Western blot检测肝脏中FoxO1和ATF6的表达;100μmol·L^-1 Hcy处理肝细胞(HL-7702)48 h后,qRT-PCR和Western blot检测FoxO1和ATF6的表达改变;转染FoxO1和ATF6 siRNA后,Western blot检测ATF6、Bax和Bcl2蛋白表达,流式细胞术观察肝细胞凋亡情况;FoxO1过表达腺病毒与ATF6 siRNA共转至肝细胞,Western blot检测Bax和Bcl2蛋白表达。结果与cbs+/+组相比,cbs^+/-组肝脏中FoxO1和ATF6的表达水平显著增加(P<0.01);与Control组相比较,Hcy组FoxO1和ATF6的表达显著上调(P<0.01);与Hcy+siNC组相比,Hcy+siFoxO1组的ATF6和Bax表达水平明显降低,Bcl2的表达显著增加,肝细胞凋亡率显著降低(P<0.01);与Ad-FoxO1组相比,Ad-FoxO1+siATF6组Bax的表达显著降低,Bcl2的表达显著增加(P<0.01)。结论FoxO1介导的ATF6表达上调是Hcy致肝细胞凋亡进而引起肝损伤的重要机制之一。
- 王青青焦运吴欣妍海秀玲徐龙张辉郭伟郝银菊姜怡邓
- 关键词：同型半胱氨酸FOXO1内质网应激肝细胞凋亡肝损伤
- 一种对细胞有保护作用的中草药组合物的制备工艺
- 一种对细胞有保护作用的中草药组合物的制备工艺，其制备工艺为：在紫花地丁采收期采集其全草，除去杂质，洗净，晾干，再于50℃烤箱中彻底烘干后，将其打成粗粉，加入药材重量12倍的水，搅拌0.5h，浸泡1h，武火煎煮0.5h，文...
- 姜怡邓张慧萍刘圆张辉
- 文献传递
- 同型半胱氨酸对巨噬细胞中Line-1 DNA甲基化标准曲线的影响
- 2014年
- 目的寻找简单、可靠、经济准确的检测巨噬细胞中Line-1甲基化水平的实验方法。方法体外培养单核细胞源性巨噬细胞,不同浓度Hcy作用后以甲基化特异性PCR检测Line-1 DNA甲基化水平变化后,分别克隆扩增相应的片段,将不同浓度稀释的甲基化和非甲基化样品分别加入到荧光PCR体系中,按照荧光PCR体系进行操作,检测其荧光表达,根据相应的稀释倍数与扩增数做出相应的标准曲线。结果各Hcy浓度组的Line-1 DNA甲基化程度随Hcy浓度的增高甲基化程度升高,Line-1 DNA甲基化程度与对照组比较,分别上升了1.30、1.52、1.61、2.18倍,差异有统计学意义(<0.05);分别得到Line-1 DNA甲基化标准曲线:Y=-4.3448x+51.512;非甲基化标准曲线:Y=-2.7406x+36.208。结论 Line-1 DNA甲基化与Hcy介导的动脉粥样硬化关系密切,荧光定量PCR法建立的标准曲线是检测Line-1 DNA甲基化水平的一种方便且准确的方法。
- 蒲雅洁孔繁琪张辉王艳华杨晓玲韩学波田珏贾月霞姜怡邓
- 关键词：巨噬细胞同型半胱氨酸DNA甲基化荧光定量PCR
- ASPP2调控GRP78在L-NAME诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2019年
- 目的探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitroarginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据。方法体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0μmol·L^(-1)L-NAME)和L-NAME组(100μmol·L^(-1)LNAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化; ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100μmol·L^(-1) L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达。结果与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加(P <0. 05);吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加(P <0. 05,P <0. 01);干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低(P <0. 05)。结论下调ASPP2可降低GRP78的表达,进而抑制L-NAME诱导的胎盘滋养细胞凋亡。
- 谢琳张辉丁宁王艳华吴凯吴凯王青青刘昆张慧萍张慧萍
- 关键词：葡萄糖调节蛋白78N-硝基-L-精氨酸甲酯胎盘滋养细胞细胞凋亡
- 心率及心率变异性与心力衰竭及预后的相关性
- 目的探讨心率及心率变异性与心力衰竭及预后的相关性。
方法入选2010年10月至2012年6月期间就诊宁夏医科大学总医院心内科的慢性充血性心力衰竭患者245例，根据住院期间平均静息心率水平分3组：A组：50～70次/...
- 张辉
- 关键词：心率心率变异性心力衰竭预后
- 文献传递
- 一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用
- 一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用，（1）100μmol/l Hcy干预内皮细胞建立凋亡模型，并且细胞活力染色及流式细胞术检测该浓度Hcy可以致内皮细胞凋亡，为后续实验奠定基础；（2）步骤（1）后，RT‑qPC...
- 姜怡邓张慧萍刘圆张辉
- PPD诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞的实验研究被引量：4
- 2016年
- 目的探索结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化的能力及其诱导破骨细胞形成的剂量、时间关系。方法采用细胞增殖与毒性试验检测PPD对RAW264.7细胞增殖的影响,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察破骨细胞的形成,比较不同剂量(0、2、20、50、100μL)及诱导时间(1、4、7d)条件下,破骨细胞形成的差异。结果 PPD能够抑制RAW264.7细胞的增殖,TRAP染色后显微镜下可见破骨细胞形成,20μL PPD诱导形成的破骨细胞数量最多,与其他PPD剂量组相比差异均有统计学意义(P均<0.05),在20μL PPD连续诱导7d下,破骨细胞形成的数量随时间的延长而增多,各诱导时间破骨细胞形成的组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 PPD能够诱导小鼠RAW264.7细胞分化为破骨细胞,最佳剂量为20μL,且破骨细胞的形成与PPD之间存在时间依赖性,不存在剂量依赖性。
- 梁思敏马赫潘希安宋天增张辉戈朝晖
- 关键词：结核菌素纯蛋白衍生物破骨细胞分化
- 血清同型半胱氨酸水平与外周血中FOXO1DNA甲基化在糖尿病视网膜病变中的关联性研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中同型半胱氨酸(Hcy)和外周血中叉头状转录因子O1(FOXO1)DNA甲基化水平,为深入探讨DR的发生机制和靶向性治疗提供实验依据。方法收集2013年1月-2016年3月宁夏银川市第一人民医院眼科和内分泌科门诊及住院的2型糖尿病(DM)患者资料,根据是否伴有视网膜病变分为2组:无视网膜并发症患者作为DM组,DR患者为DR组,检测患者血清中Hcy水平、糖化血红蛋白含量、外周血中FOXO1 m RNA表达水平,并采用甲基化特异性PCR技术分析FOXO1 DNA甲基化水平,分析Hcy与FOXO1 DNA甲基化的相关性。结果一般资料分析可见DR组患者病程较长,血清Hcy水平显著升高。与DM组相比,在DR组中FOXO1 m RNA表达升高了3.25倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。DR患者外周血中FOXO1 DNA甲基化水平显著下降,与DM组相比下降了51.23%,差异具有统计学意义(P<0.01)。Hcy与FOXO1 DNA甲基化水平呈负相关(r2=-0.4833,P=0.0016)。结论 Hcy可能通过下调FOXO1 DNA甲基化水平上调了FOXO1的表达而参与DR的发生发展,可能成为靶向性治疗DR的潜在靶点。
- 高春兰张辉邹晓燕张鑫郑白兰李红莉姜怡邓
- 关键词：糖尿病视网膜病变同型半胱氨酸DNA甲基化
- 增生性瘢痕诊断用分子标志物非编码RNA FPASL的鉴定、应用及检测方法
- 增生性瘢痕分子诊断用标志物非编码RNA FPASL的鉴定、应用及检测方法，包括以下步骤：在增生性瘢痕患者手术过程中收集增生性瘢痕及瘢痕旁正常皮肤组织样本；从组织样本培养来源于增生性瘢痕及瘢痕旁正常皮肤的原代成纤维细胞；检...
- 姜怡邓马芳沈江涌张辉万瑀贺茜
- 一种在衰老心肌缺血后处理缺血再灌注损伤治疗用miRNA标志物及其应用
- 本发明公开了一种在衰老心肌缺血后处理缺血再灌注损伤治疗用miRNA标志物及其应用，属于分子生物学和基因工程技术领域，测血液样本中miR‑30a表达水平的试剂在制备治疗在衰老心肌缺血后处理缺血再灌注损伤产品中的应用，用于检...
- 姜怡邓张慧萍王艳华徐灵博张辉丁宁王睿吴琪瑞吴凯杨勇
- 文献传递
