吴凯
- 作品数：37 被引量：83H指数：5
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 卵巢移植对去势大鼠海马神经元和雌激素膜受体GPR30表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元形态、尼氏体数量和雌激素膜受体GPR30表达的变化,评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法成年雌性SD大鼠分为对照组、去势组和卵巢移植组。对照组行假手术,去势组行双侧卵巢切除,卵巢移植组在切除双侧卵巢7 d后,肾被膜下移植出生3 d内乳鼠的卵巢。于移植后的7、14、21和28 d,尼氏染色观察海马神经元形态、尼氏体数量;免疫组织化学法和Western blot检测GPR30蛋白的表达。结果去势组随去势时间延长,海马神经元排列散乱,胞体皱缩,核固缩深染,神经元尼氏体数量减少(P<0.05),GPR30表达减少(P<0.05)。卵巢移植组随移植时间的延长,细胞形态逐渐好转并与正常形态接近,海马神经元内尼氏体数量和GPR30蛋白表达逐步恢复,并接近对照组。结论卵巢移植可以逆转去势所致神经元形态改变,并提高GPR30蛋白的表达,促进海马神经元蛋白合成功能的恢复。
- 刘芳黑常春孔斌常青郑小敏吴凯周文献朱万平赵承军
- 关键词：卵巢去势卵巢移植海马神经元GPR30
- ASPP2调控GRP78在L-NAME诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2019年
- 目的探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitroarginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据。方法体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0μmol·L^(-1)L-NAME)和L-NAME组(100μmol·L^(-1)LNAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化; ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100μmol·L^(-1) L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达。结果与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加(P <0. 05);吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加(P <0. 05,P <0. 01);干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低(P <0. 05)。结论下调ASPP2可降低GRP78的表达,进而抑制L-NAME诱导的胎盘滋养细胞凋亡。
- 谢琳张辉丁宁王艳华吴凯吴凯王青青刘昆张慧萍张慧萍
- 关键词：葡萄糖调节蛋白78N-硝基-L-精氨酸甲酯胎盘滋养细胞细胞凋亡
- 缝隙连接蛋白43和黄体生成素受体在小鼠卵巢中的表达
- 2017年
- 目的观察小鼠卵泡发育过程中缝隙连接蛋白43(Cx43)和黄体生成素受体(LHR)在小鼠卵巢中的表达以及黄体生成素(LH)对卵巢Cx43表达的影响,为这两种分子与卵泡发育的关系提供实验依据。方法选择出生后1d、4d、7d、2周、3周、4周、6周、8周龄雌性C57小鼠共8组,每组10只,取卵巢。HE染色观察卵巢形态、卵泡发育并测量颗粒细胞体积分数。免疫组织化学和Western blotting观察卵巢组织中Cx43及LHR的表达,Western blotting检测不同浓度黄体生成素(LH)孵育后对卵巢Cx43表达的影响。结果 HE染色显示,出生1d小鼠卵巢中见原始卵泡,出生7d卵巢内出现初级卵泡,2周时出现窦前卵泡和少量窦卵泡,3周、4周时,出现较多大的窦卵泡,6~8周时出现黄体。卵泡颗粒细胞体积分数在2周后的卵巢中明显增加。Cx43表达在各阶段卵泡的颗粒细胞胞膜上,LHR表达在卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞胞质中。Cx43和LHR出生后2周卵巢中的表达开始明显增加,并随卵泡发育表达逐渐增强,在3周、4周、6周和8周维持相对较高水平。LH体外干预可增加卵巢组织Cx43的表达。结论 Cx43和LHR在卵泡发育中发挥重要作用,LH可能通过LHR促进卵巢卵泡颗粒细胞Cx43的表达。
- 经华高山庆黑常春蔡玉芳孔斌郑小敏吴凯赵承军常青
- 关键词：缝隙连接蛋白43颗粒细胞小鼠免疫组织化学免疫印迹法
- 考绩与人的能力
- 1997年
- 靠闭卷考试成绩评价学生，引入人们只注重知识记忆，忽略能力测评。本文针对这一弊端提出教师在教学中突出培养目标，引导学生不为应试而学；应科学命题，增加对学生综合分析能力的考核；避免机械教条阅卷；以能力培养为主，全面考核学生。
- 郝银菊吴凯
- 关键词：知识
- 卵巢摘除对急性肝损模型鼠脑血管内皮细胞凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究卵巢摘除对于急性肝损伤模型鼠脑血管内皮细胞功能的影响。方法对去势(卵巢摘除)与未去势小鼠分别给与四氯化碳制备急性肝损伤模型,另设单纯卵巢摘除组及空白对照组;免疫组织化学法观察各组小鼠脑血管内皮细胞Bax及Bcl-2的表达。结果发现各组小鼠嗅脑及皮层等脑区毛细血管内皮细胞Bax阳性表达结果类似;而Bcl-2表达存在明显差异,急性肝损伤组嗅脑及皮层等各脑区毛细血管内皮细胞Bcl-2阳性表达呈强阳性;而去势+急性肝损伤组各脑区Bcl-2的阳性表达均偏弱。结论卵巢摘除或卵巢功能退化会影响脑血管内皮细胞应对化学毒性损伤时的抗凋亡功能,从另一个侧面揭示了卵巢相关激素的脑保护作用。
- 郑小敏崔岫赵承军黑常春党玲吴凯沈新生蔡玉芳周文献孔斌杨文娟王燕蓉
- 关键词：卵巢摘除血管内皮细胞凋亡
- 一种在衰老心肌缺血后处理缺血再灌注损伤治疗用miRNA标志物及其应用
- 本发明公开了一种在衰老心肌缺血后处理缺血再灌注损伤治疗用miRNA标志物及其应用，属于分子生物学和基因工程技术领域，测血液样本中miR‑30a表达水平的试剂在制备治疗在衰老心肌缺血后处理缺血再灌注损伤产品中的应用，用于检...
- 姜怡邓张慧萍王艳华徐灵博张辉丁宁王睿吴琪瑞吴凯杨勇
- 文献传递
- 脂肪酸结合蛋白4 DNA甲基化在L-NAME干预胎盘滋养细胞脂代谢异常中的作用被引量：2
- 2017年
- 目的观察并分析一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对滋养细胞脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因启动子区DNA甲基化及脂质代谢异常的影响。方法体外培养人胎盘滋养细胞(HTR-8)并用100μmol/L-NAME干预48 h后检测胎盘滋养细胞脂质含量;qRT-PCR和Western blot检测胎盘滋养细胞中DNA甲基转移酶1(DNMT1)、FABP4 m RNA和蛋白表达改变;巢式甲基化特异性PCR(NT-MSP)检测胎盘滋养细胞中FABP4启动子区DNA甲基化的程度改变。结果 L-NAME干预滋养细胞后脂质含量明显增多,且细胞内FABP4 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05),而FABP4基因启动子区甲基化程度以及DNMT1的表达水平显著减低。结论 FABP4启动子区低DNA甲基化可能参与了L-NAME诱导的胎盘滋养细胞脂代谢异常的调控过程。
- 杨珺毛彩艳杨松昊杨安宁邓梅吴凯杨晓玲姜怡邓张慧萍
- 关键词：滋养细胞DNA甲基化脂代谢
- 卵巢移植对去势大鼠海马神经元PSD-95表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元尼氏体数量、突触后密度蛋白95(PSD-95)表达的变化,评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法成年雌性SD大鼠分为对照组,去势组和去势卵巢移植组。对照组行假手术,去势组行双侧卵巢切除,卵巢移植组在切除双侧卵巢后,肾被膜下移植出生3d内乳鼠的卵巢。在去势和移植后的7、14、21和28d,尼氏染色测量海马神经元尼氏面积;免疫组织化学法和Western-blot检测PSD-95蛋白的表达情况。结果对照组见正常海马形态,神经元尼氏体丰富,PSD-95蛋白表达于神经元胞体。去势组随去势时间延长,海马神经元排列散乱,神经元层数减少,海马神经元胞体有皱缩,核有固缩深染。在去势28d时,尼氏体面积,PSD-95累计光密度和蛋白表达量分别减少到对照组的6.42%,33.33%和42.48%(P均<0.05)。卵巢移植组神经元形态随移植时间逐渐接近正常形态,在移植28d时,海马神经元内尼氏体面积,PSD-95累计光密度和蛋白表达量分别恢复到对照组的81.68%,86.67%和88.50%(P>0.05)。结论卵巢去势可损害海马神经元的功能和减少PSD-95蛋白的表达,卵巢移植可以逆转去势所致神经元形态改变,并提高PSD-95蛋白的表达。
- 王丽梅刘芳黑常春吴凯郑小敏朱万平常青赵承军
- 关键词：去势卵巢移植海马神经元
- 环状RNA BRAF_2在子痫前期胎盘滋养细胞增殖和凋亡中的作用及其机制被引量：1
- 2023年
- 目的 探讨环状RNABRAF_2(circRNABRAF_2)在子痫前期(PE)胎盘滋养细胞增殖和凋亡中的作用及其机制。方法 收集2018年1月-2019年2月宁夏医科大学总医院正常妊娠与PE孕妇的胎盘组织(n=21),采用qRTPCR检测两组胎盘组织中circRNABRAF_2的表达水平,并分析circRNABRAF_2表达水平与血压的相关性。体外培养人源胎盘滋养细胞株(HTR8-S/Vneo):(1)将细胞分为对照组与缺氧组,采用qRT-PCR检测circRNA BRAF_2的表达;(2)在HTR8-S/Vneo中转染circRNABRAF_2慢病毒空载体和过表达慢病毒,分为对照组、circRNABRAF_2阴性对照组及circRNA BRAF_2过表达组,使用qRT-PCR对circRNA BRAF_2进行过表达验证;(3)在circRNA BRAF_2过表达慢病毒转染成功的基础上,将细胞分为对照组、circRNA BRAF_2阴性对照组、circRNA BRAF_2过表达组、缺氧组、缺氧+circRNABRAF_2阴性对照组与缺氧+circRNABRAF_2过表达组,采用EdU和CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blotting检测凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9、Bcl-2及Bax的表达。采用qRT-PCR检测circRNABRAF_2在HTR8-S/Vneo细胞质和细胞核中的表达水平,通过生物信息学分析筛选与circRNABRAF_2可能结合的miRNA并检测其在组织和细胞中的表达水平。结果 与正常妊娠组比较,PE组孕妇胎盘组织中circRNA BRAF_2表达水平明显降低(P<0.001),且circRNA BRAF_2表达水平与收缩压、舒张压呈负相关(r=±0.4531,P<0.01;r=±0.4381,P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,缺氧组circRNABR AF_2表达水平明显降低(P<0.01)。circRNA BRAF_2阴性对照组circRNA BRAF_2表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与circRNA BRAF_2阴性对照组比较,circRNA BRAF_2过表达组circRNA BRAF_2表达水平明显升高(P<0.001)。EdU及CCK-8法检测结果显示,与对照组比较,缺氧组EdU阳性细胞百分比明显下降(P<0.001),滋养细胞增殖能力降低(P<0.001);与缺氧+circRNA BRAF_2阴性对照组比较,缺氧+ci
- 张玉月朱亚飞高丽娜殷荷马朝霞吴玉珠王艳华吴凯张慧萍
- 关键词：子痫前期细胞增殖MIRNAS
- 双氢睾酮调节原代培养大鼠Sertoli细胞GDNF的表达
- 2015年
- 目的观察双氢睾酮对原代培养大鼠Sertoli细胞GDNF及相关细胞信号通路关键蛋白的表达,探讨Sertoli细胞GDNF表达调控的机制。方法原代培养出生后20 d大鼠Sertoli细胞,给予双氢睾酮干预,免疫荧光检测GDNF在细胞中定位和表达强度,Western blot检测GDNF,ERK和CREB蛋白的表达及磷酸化情况,并用ERK和c AMP/PKA信号通路抑制剂干预。结果 GDNF表达在Sertoli细胞质中,双氢睾酮干预可增加GDNF的表达(P<0.05),并使ERK和CREB磷酸化水平增高(P<0.05),使用ERK和c AMP/PKA信号通路抑制剂可减低双氢睾酮诱导的GDNF表达(P<0.05)。结论双氢睾酮通过激活ERK信号通路诱导Sertoli细胞GDNF的表达。
- 常青王丽梅黑常春蔡玉芳吴凯孔斌朱万平沈新生赵承军
- 关键词：双氢睾酮SERTOLI细胞GDNFERK信号通路
