文力
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达
- 2005年
- 目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体。结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Westernblot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽。结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株。表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽。
- 文力王革非冷武军王贞慧杨光
- 关键词：甲状旁腺素基因合成基因克隆免疫活性
- 人甲状旁腺素N端34肽基因的合成克隆和融合表达
- 选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N端34肽基因序列,通过六个DNA片段分段合成,经过片段连接、PCR及TA克隆、测序验证,构建了GST融合表达载体。经过SDS-PAGE、检测到了PTH(1-34)肽与GST...
- 文力王革非冷武军王贞慧杨光
- 文献传递
- 人瘦素Leptin前体及成熟基因的克隆与表达
- 利用RT-PCR方法从脂肪细胞RNA中克隆人瘦素前体(pre-Leptin)和去信号肽序列的Leptin成熟基因片段,将该成熟基因片段插入pET32a中,建立Leptin工程菌株,其表达量达菌体总蛋白的40%以上。wes...
- 曹剑峰王革非文力李均吴海祥李清雄王贞慧
- 文献传递
- 人Leptin基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2005年
- 目的克隆Leptin基因,构建其重组表达菌株,并对表达产物进行免疫学鉴定。方法利用RT-PCR方法从脂肪细胞RNA中扩增出人瘦素前体(pre-Leptin)的cDNA片段和去信号肽序列的Leptin成熟基因片段,并插入pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达重组人瘦素(rh-Leptin)的菌株。结果DNA序列分析显示获得的pre-Leptin和成熟基因片段的序列与预计序列一致,菌株诱导后经SDS-PAGE检测,rh-Leptin表达量达菌体总蛋白的40%以上。Western blot分析显示重组Lep-tin具有免疫学活性。结论已获得高效表达Leptin的重组菌株。
- 曹剑峰王革非文力李均吴海祥李清雄王贞慧
- 关键词：大肠杆菌N基因DNA序列分析LEPTINRT-PCR方法WESTERN
