胡卫杰
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸭RIG-1基因的组织表达及体外抗禽流感病毒活性研究被引量：5
- 2013年
- 视黄酸诱导基因蛋白1(RIG-1)是一类模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。为检测金定鸭RIG-1基因的组织特异性表达水平和体外抗禽流感病毒(AIV)活性,本研究采用RT-PCR方法扩增鸭RIG-1基因并克隆于pcDNA3.1(+)中构建重组真核表达质粒pcDNA-RIG-1,应用荧光定量PCR方法检测该基因在鸭不同组织中的特异性表达水平;并将pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞,通过病毒TCID50测定、间接免疫荧光、荧光定量PCR的方法检测RIG-1的抗AIV活性。结果显示,从金定鸭脾脏中扩增的RIG-1基因的CDS序列大小为2 802 bp,编码934个氨基酸;RIG-1基因在不同组织中的表达各不相同,在鸭的脾脏和肾脏中表达量较高,肝脏中度表达,心脏、肺脏和肌肉低度表达;pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞组与pcDNA3.1(+)转染组相比,病毒TCID50及相对表达量显著降低,IFN-β及Mx的相对表达量显著升高,表明RIG-1产生了显著的抗AIV作用。本研究为禽类RIG-1蛋白功能和家禽的天然免疫研究奠定了基础。
- 张雅春胡卫杰王建超王伟邓瑞坡李越赵颖慧孟庆文
- 关键词：抗病毒
- ICR小鼠Mx1基因的克隆及组织表达被引量：4
- 2011年
- 为了对ICR小鼠的Mx1基因序列特征进行比较分析,揭示该基因的组织特异性表达规律,用干扰素诱导剂poly（I）/（C）诱导小鼠腹腔巨噬细胞,应用RT-PCR技术克隆小鼠Mx1基因全长编码区序列,并用半定量RT-PCR方法研究该基因在组织中的特异性表达规律。结果显示,从雌性ICR小鼠腹腔巨噬细胞中克隆的Mx1基因的CDS序列大小为1 611 bp,编码536个氨基酸。该序列与其他物种Mx基因序列的比较结果显示,核苷酸同源性为37.36%~69.98%,氨基酸同源性为38.8%~76.6%。半定量RT-PCR显示,Mx1基因在所检测组织的脾脏、肺脏中表达量较高,肝脏中度表达,心脏、肾脏低度表达,肌肉中不表达。研究结果表明,克隆的Mx1基因所编码的蛋白具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征,该基因的表达具有组织特异性。
- 肖志广刘晓敏王丽李巍王伟胡卫杰王建超孟庆文
- 关键词：小鼠基因克隆
- 鸡Mx蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2013年
- Mx蛋白为GTP酶动态蛋白家族成员,已被证明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用。为制备鸡Mx蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸡Mx蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得4株稳定分泌抗鸡Mx蛋白抗体的杂交瘤细胞株。间接ELISA测定4株MAb纯化后腹水的效价介于1∶3.2×104～1∶2.5×105之间。Western blot结果证实4株MAb均具有良好的反应性;间接免疫荧光试验表明其中一株MAb与真核表达的鸡Mx蛋白发生反应。本研究为鸡Mx蛋白功能及表达鸡Mx蛋白的转基因动物等研究奠定了基础。
- 胡卫杰王伟孙建华邓瑞坡张雅春尹海畅孟庆文
- 关键词：MX蛋白单克隆抗体
