王建超
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸭RIG-1基因的组织表达及体外抗禽流感病毒活性研究被引量：5
- 2013年
- 视黄酸诱导基因蛋白1(RIG-1)是一类模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。为检测金定鸭RIG-1基因的组织特异性表达水平和体外抗禽流感病毒(AIV)活性,本研究采用RT-PCR方法扩增鸭RIG-1基因并克隆于pcDNA3.1(+)中构建重组真核表达质粒pcDNA-RIG-1,应用荧光定量PCR方法检测该基因在鸭不同组织中的特异性表达水平;并将pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞,通过病毒TCID50测定、间接免疫荧光、荧光定量PCR的方法检测RIG-1的抗AIV活性。结果显示,从金定鸭脾脏中扩增的RIG-1基因的CDS序列大小为2 802 bp,编码934个氨基酸;RIG-1基因在不同组织中的表达各不相同,在鸭的脾脏和肾脏中表达量较高,肝脏中度表达,心脏、肺脏和肌肉低度表达;pcDNA-RIG-1转染DF-1细胞组与pcDNA3.1(+)转染组相比,病毒TCID50及相对表达量显著降低,IFN-β及Mx的相对表达量显著升高,表明RIG-1产生了显著的抗AIV作用。本研究为禽类RIG-1蛋白功能和家禽的天然免疫研究奠定了基础。
- 张雅春胡卫杰王建超王伟邓瑞坡李越赵颖慧孟庆文
- 关键词：抗病毒
- ICR小鼠Mx1基因的克隆及组织表达被引量：4
- 2011年
- 为了对ICR小鼠的Mx1基因序列特征进行比较分析,揭示该基因的组织特异性表达规律,用干扰素诱导剂poly（I）/（C）诱导小鼠腹腔巨噬细胞,应用RT-PCR技术克隆小鼠Mx1基因全长编码区序列,并用半定量RT-PCR方法研究该基因在组织中的特异性表达规律。结果显示,从雌性ICR小鼠腹腔巨噬细胞中克隆的Mx1基因的CDS序列大小为1 611 bp,编码536个氨基酸。该序列与其他物种Mx基因序列的比较结果显示,核苷酸同源性为37.36%~69.98%,氨基酸同源性为38.8%~76.6%。半定量RT-PCR显示,Mx1基因在所检测组织的脾脏、肺脏中表达量较高,肝脏中度表达,心脏、肾脏低度表达,肌肉中不表达。研究结果表明,克隆的Mx1基因所编码的蛋白具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征,该基因的表达具有组织特异性。
- 肖志广刘晓敏王丽李巍王伟胡卫杰王建超孟庆文
- 关键词：小鼠基因克隆
- 单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立被引量：5
- 2013年
- 单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种人畜共患食源性致病菌,能引起人和动物较为严重的感染症状。现广泛使用具有免疫活性的小鼠模型测定半数致死量(LD50)来评价不同LM菌株的致病性。为建立LM的ICR小鼠模型,本研究采用1/2a血清型的N21 LM菌株,分别以106、107、108、109和1010CFU的剂量口腔灌注感染6周龄ICR小鼠,每组10只;另取10只接种PBS作为对照组,测定LM对ICR小鼠的LD50;另取40只小鼠,平均分为2组,公母各半,以测定的LD50剂量接种LM,分别对各组小鼠临床症状、组织病理变化、体重变化及组织中细菌载量进行评价。结果发现,N21 LM菌株对ICR小鼠的LD50为109.25CFU;感染周期为10 d左右,感染小鼠出现被毛粗糙、精神萎靡、阴茎垂出及体重下降等临床症状。组织病理学分析结果显示,肝脏先后出现实质内灶状细菌团块、形成血栓、细胞坏死等;脾脏主要表现为白髓内淋巴细胞减少;肺脏主要表现为纤维素性肺炎。菌落计数和Real-time PCR的检测结果发现肝脏中细菌载量最高,脾脏次之。结果表明,ICR小鼠能作为单核细胞增生性李斯特菌的感染模型。本试验结果为研究LM的致病机制、疫苗研究及抗菌肽转基因小鼠抗LM的评价奠定了基础。
- 尹海畅吕兴锋刘思国王伟王建超孟庆文
- 关键词：单核细胞增生性李斯特菌
- 表达抗流感Mx-RNAis基因转基因鸡研究
- 本研究采用赤道开窗法将同时表达Mx、RNAis双基因重组慢病毒注射入新生种蛋胚盘下腔，制备转基因(TG)鸡，通过PCR,RT-PCR,Southern blot,Western blot及Tail-PCR方法等方法检测F...
- 孟庆文王伟田进王建超邓瑞坡陈洪岩
- 关键词：转基因鸡
- 文献传递
