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水稻复配除草剂对水稻恶性杂草防除效果的筛选试验被引量：3: 2013年; 通过田间实验表明在四种供试复配除草剂中,异噁·甲戊灵-二甲戊乐灵16%+异噁草松2%可湿性粉剂(处理3)对水稻田中三种恶性杂草防效显著,持效期长,对水稻的安全性好。; 丁增伟杨鹏蒋永娇; 关键词：复配除草剂水稻防效

稳定表达乙脑病毒结构蛋白的细胞系的建立被引量：2: 2009年; 以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株全长基因组克隆质粒pBR-JTF为模板,通过PCR分别扩增prM-E及C-prM-E基因片段,构建表达乙型脑炎病毒结构蛋白的真核表达质粒pCJE-ME及pCJE-CME。将这2种重组质粒用脂质体法转染BHK-21细胞后,质粒pCJE-ME表现明显的细胞毒性,转染细胞不能存活;质粒pCJE-cME可导致筛选到表达JEV结构蛋白的稳定细胞系,这种稳定表达JEV结构蛋白的细胞系通过PCR扩增细胞系基因组、ELISA、Western Blot、间接免疫荧光等方法得到鉴定。研究结果表明在C蛋白存在下,乙型脑炎病毒C-prM-E蛋白可以在BHK细胞中稳定表达,为研制JEV新型复制子颗粒疫苗提供了便利工具。; 刘珊黄莺杨鹏孙志伟俞炜源; 关键词：乙型脑炎病毒结构蛋白细胞系

日本脑炎病毒SA14-14-2E蛋白结构域Ⅲ的抗原性和免疫原性分析被引量：3: 2009年; 为了表达日本脑炎病毒囊膜蛋白(E蛋白)结构域DⅢ区,了解其作为亚单位疫苗的可能性,本研究根据SA14-14-2病毒株序列(GenBank Accession No.D90195)设计两条引物,以全长JEV感染性克隆pBR-JTF为模板,通过PCR扩增出JEVE蛋白DⅢ的cDNA片段,构建了原核表达载体pET-JEDⅢ,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行融合表达。融合蛋白为可溶性表达,表达量约占菌体蛋白的75%。用纯化后蛋白免疫新西兰兔和BALB/C鼠,通过ELISA,Western blotting,噬斑减少实验,及乳鼠攻毒实验验证JEDⅢ的抗原性和免疫原性。Western blotting及ELISA结果表明纯化后的表达产物具有良好的抗原性,纯化的JEDⅢ蛋白免疫新西兰兔,可以获得高达1:7×105滴度的抗JEV特异性抗体;JEDⅢ蛋白免疫BALB/C鼠,可以获得1:8.2×104滴度的抗JEV特异性抗体。并且获得1:256滴度的中和抗体,乳鼠攻毒实验能达到75%的保护效果。以上结果说明本研究表达、纯化的重组JEDⅢ蛋白,免疫小鼠以及兔后,能产生抗JEV的特异性抗体,中和性抗体,能够保护部分乳鼠接受毒种的攻击,抗原性及免疫原性较好,有进一步开发研制成亚单位疫苗的潜能。; 黄莺刘珊杨鹏杜韫孙志伟俞炜源; 关键词：日本脑炎病毒 E蛋白亚单位疫苗

鸡球虫病免疫预防研究现状被引量：2: 2013年; 鸡球虫病是严重危害养禽业的一种细胞内寄生虫病。鸡抗球虫药的长期使用,使得球虫抗药性问题日益严重,药物在球虫病控制中的作用越来越受到限制。近年来用免疫预防的方法控制鸡球虫病逐渐受到重视,并有望成为主要的技术手段。笔者就鸡球虫病的免疫预防,从活苗、亚单位苗和基因工程苗这几个研究阶段进行概述。; 王秋悦郑梅竹杨鹏任铁燕倪静师清博; 关键词：鸡球虫病免疫预防疫苗

阿魏酸抑制朊病毒复制作用的研究被引量：3: 2013年; 目的本试验通过已建立的ScN2a细胞模型,探讨阿魏酸对朊病毒复制的影响。方法通过Western blot法检测阿魏酸对朊病毒复制作用的影响。结果 0.5、1和5μg/mL的阿魏酸能够极显著的抑制PrPSc的表达水平(P<0.01)。结论由于中药单体阿魏酸可以抑制ScN2a中PrPSc蛋白的复制,所以中药单体阿魏酸对朊病毒病可能起到一定的治疗作用,这为我们以后对于研究朊病毒的治疗提供了新的思路。; 白换力张海雷鞠传静孟轲音李忠义杨鹏徐静万家余申海清; 关键词：朊病毒中药单体阿魏酸神经瘤细胞

重组黄热病毒E蛋白结构域Ⅲ作为亚单位疫苗的抗原性和免疫原性被引量：2: 2009年; 目的:表达纯化黄热病毒(YFV)囊膜蛋白(E蛋白)结构域Ⅲ,研究其作为亚单位疫苗预防YFV、日本脑炎病毒(JEV)感染的可能。方法:扩增YFVE蛋白结构域Ⅲ(YFDⅢ)的cDNA片段333bp,将其连接到原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-YFDⅢ,转化感受态大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达重组YFDⅢ;用纯化的YFDⅢ免疫新西兰兔和BALB/c鼠,检测相关抗体滴度。结果:在大肠杆菌中可溶性表达了YFDⅢ融合蛋白,表达量约占菌体蛋白的50%;Western印迹及ELISA分析表明,纯化的YFDⅢ具有良好的抗原性和免疫原性;利用纯化的YFDⅢ免疫新西兰兔,获得了高达1∶4×105滴度的抗YFV抗体和1∶2×104滴度的抗JEV抗体;利用纯化的YFDⅢ免疫BALB/c鼠,获得了1∶7×104滴度的抗YFV抗体和1∶2×103滴度的抗JEV抗体。结论:重组YFDⅢ有较好的免疫原性,具有开发成亚单位疫苗的潜能。; 杨鹏黄莺刘珊孙志伟俞炜源; 关键词：黄热病毒 E蛋白免疫原性抗原性亚单位疫苗

一种日本脑炎病毒JEV复制子载体及其应用: 本发明提供了一种以日本脑炎病毒基因组为骨架的复制子载体，以及用于该复制子载体包装的细胞系及包装系统。本发明JEV复制子载体有高效表达外源蛋白的能力。将复制子载体免疫小鼠，三免后抗JEV抗体滴度达到1∶1280，能保护75...; 黄莺刘珊杨鹏孙志伟俞炜源; 文献传递

日本脑炎病毒C蛋白对其复制子载体自主复制活性的影响: 2010年; 为了研制具有高效自主复制能力的日本脑炎病毒(JEV)复制子载体,验证其作为新型复制子疫苗载体的可能性。以保留全长核心蛋白C基因的JEV复制子载体pCTCJEV为基础,通过PCR的方法减短C蛋白的部分基因序列,分别保留C23和C68位氨基酸,以LacZ基因作为报告基因,构建了C基因长短不同的JEV复制子载体pCMW-2M-1LACZ、pCMW-2M-3LACZ。将复制子载体转染表达JEV结构蛋白的细胞系CME-4,通过LacZ的表达检测JEV复制子载体表达外源蛋白的能力,反映了JEV的系列复制子载体的自主复制能力。结果保留C基因全长,C68、C23的复制子载体表达外源蛋白的能力相当,以上结果说明仅仅保留C蛋白的69个核苷酸即可保留JEV复制子载体的自主复制能力,为进一步优化JEV复制子载体,将该载体开发研制成为高效表达外源蛋白的疫苗载体提供了依据。; 黄莺刘珊杨鹏王超杜韫孙志伟俞炜源; 关键词：JEV C蛋白

浅论奶牛繁殖障碍的原因与应对方法被引量：1: 2012年; 文章结合笔者实际工作经验,对奶牛出现繁殖故障的常见原因进行分析,并提出有效的应对方法,以确保奶牛顺利繁殖,提高繁殖率。; 杨鹏蒋永娇丁增伟; 关键词：奶牛繁殖障碍

新型JEV复制子载体的构建及表达炭疽PA的JEV复制型DNA载体的免疫原性研究: 黄病毒属包括70多种病毒,其中绝大多数是节肢动物传播的人类病原。日本脑炎/(JE/)是一种蚊虫传播的病毒疾病,年发病率约为十万分之一,病死率约为5-40/%,另有20-40/%会引起严重的神经性疾病和后遗症。我国除新疆,...; 杨鹏; 关键词：日本脑炎病毒复制子保护性抗原; 文献传递

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杨鹏