刘珊
- 作品数：21 被引量：86H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军第二炮兵总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 日本脑炎病毒SA14-14-2E蛋白结构域Ⅲ的抗原性和免疫原性分析被引量：3
- 2009年
- 为了表达日本脑炎病毒囊膜蛋白(E蛋白)结构域DⅢ区,了解其作为亚单位疫苗的可能性,本研究根据SA14-14-2病毒株序列(GenBank Accession No.D90195)设计两条引物,以全长JEV感染性克隆pBR-JTF为模板,通过PCR扩增出JEVE蛋白DⅢ的cDNA片段,构建了原核表达载体pET-JEDⅢ,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行融合表达。融合蛋白为可溶性表达,表达量约占菌体蛋白的75%。用纯化后蛋白免疫新西兰兔和BALB/C鼠,通过ELISA,Western blotting,噬斑减少实验,及乳鼠攻毒实验验证JEDⅢ的抗原性和免疫原性。Western blotting及ELISA结果表明纯化后的表达产物具有良好的抗原性,纯化的JEDⅢ蛋白免疫新西兰兔,可以获得高达1:7×105滴度的抗JEV特异性抗体;JEDⅢ蛋白免疫BALB/C鼠,可以获得1:8.2×104滴度的抗JEV特异性抗体。并且获得1:256滴度的中和抗体,乳鼠攻毒实验能达到75%的保护效果。以上结果说明本研究表达、纯化的重组JEDⅢ蛋白,免疫小鼠以及兔后,能产生抗JEV的特异性抗体,中和性抗体,能够保护部分乳鼠接受毒种的攻击,抗原性及免疫原性较好,有进一步开发研制成亚单位疫苗的潜能。
- 黄莺刘珊杨鹏杜韫孙志伟俞炜源
- 关键词：日本脑炎病毒E蛋白亚单位疫苗
- 胃幽门螺杆菌感染与慢性胃炎病理变化的相关性分析被引量：23
- 2015年
- 目的研究胃幽门螺杆菌感染与慢性胃炎的组织类型、炎症活动程度、淋巴滤泡形成、肠化等病理变化的关系。方法对我院2012年至2013年期间行胃镜检查的435例患者标本制成石蜡切片,显微镜下观察慢性胃炎的组织类型、炎症活动度、固有层淋巴滤泡形成、肠化等病理变化,同时提取DNA,用实时荧光定量PCR方法检测有无HP感染。结果 435例患者标本中,HP阳性为137例,阳性率为31.5%;其中慢性萎缩性胃炎HP阳性率为40.5%,明显高于HP阳性率为19.1%的慢性浅表性胃炎,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);HP阳性率随炎症活动度无、轻度、中度、重度依次增高,差异有统计学意义(P<0.05);固有层淋巴滤泡形成时HP阳性率明显高于无淋巴滤泡形成的标本,差异有统计学意义(P<0.05);肠上皮化生的有无与HP感染率无明显相关性(P>0.05)。结论HP的感染与慢性胃炎的组织类型、炎症活动程度、淋巴滤泡形成等病理变化存在相关关系,当存在上述病理改变时,应高度警惕HP感染,及时进行检测和治疗。
- 石建玲段恋程波刘珊吴西钊章方莉权兰菊孙锁柱
- 关键词：幽门螺杆菌慢性胃炎淋巴滤泡形成肠化
- 子宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌组织cyclin D1表达特征及其与HPV16 E7表达的相关性分析被引量：6
- 2015年
- 目的探讨cyclinD1在宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌中的表达及其与HPV16E7基因表达的相关性。方法SiHa、Hcc94细胞均为宫颈上皮来源的鳞癌细胞，其中Hcc94细胞的E6／E7基因缺失。采用即时荧光定量PCR、免疫组织化学法检测cyclinD1在子宫颈上皮内瘤变（CIN）及鳞状细胞癌组织中基因及蛋白的表达情况；采用逆转录PCR（RT—PCR）、Westernblot、免疫组织化学方法检测cyclinD1在不同E7表达状态的鳞状细胞癌细胞系的表达情况；设计靶向HPV16E7基因启动子区的siRNA序列，构建质粒转染SiHa细胞，筛选稳定沉默E7基因的细胞系命名为cm-16细胞株；将空质粒转染SiHa细胞，获得空质粒细胞系命名为B3细胞株。用RT—PCR和Westernblot检测E7沉默cm-16细胞cyclinD1基因及蛋白表达情况。结果cyclinD1仅在正常宫颈鳞状上皮副基底细胞中表达，在CIN1、CIN2、CIN3表达降低，在HPV阳性的宫颈鳞状细胞癌中阴性或少量点灶状表达；cyclinD1在E7阳性SiHa细胞中的表达水平较cm-16及Hcc94细胞减低（均P〈0．05）。结论E7高表达的子宫颈癌组织及细胞中cyclinDI低表达，HPVE7基因抑制子宫颈癌cyclinD1表达。
- 王平刘珊程波吴西钊丁姗姗武迪许琳石建玲段恋孙锁柱
- 关键词：人乳头瘤病毒16细胞周期蛋白D
- 哺乳动物细胞高效表达载体的优化被引量：2
- 2006年
- 目的:优化哺乳动物细胞表达系统,提高目的基因的表达效率。方法:以组织型纤溶酶原激活剂(tPA)为报告基因,利用本实验室建立的CHOfrt/dhfr-细胞定点整合表达系统,对多种表达调控元件(包括hCMV和hEF-1α启动子、hCMV增强子、hEF-1α1st内含子及翻译增强子H213和V163等)及其多种组合的表达效率进行了系统的比较和评价。结果:hCMV启动子与H213组合以及hEF-1α启动子与V163组合的表达效率分别是仅含hCMV启动子的156.6%和139.5%。结论:该研究为构建高效的哺乳动物细胞表达载体奠定了基础。
- 张国强刘志刚刘珊俞炜源
- 直肠黑变病伴腺癌、腺瘤一例
- 章方莉程波刘珊王福翔丁珊珊吴西钊石建玲权兰菊孙锁柱
- 结外指突状树突细胞肉瘤伴骨髓浸润临床病理观察并文献复习
- 目的：探讨脾脏指突状树突细胞肉瘤的诊断要点及其鉴别诊断。方法：对1例脾脏指突状树突细胞肉瘤进行组织病理学、免疫组化染色，并随访。结果：肿瘤原发于脾脏并累及骨髓，于确诊4月后死亡。镜检：肿瘤组织呈席纹状、旋涡状或杂乱排列，...
- 刘珊程波王福翔章方莉吴西钊权兰菊丁姗姗孙锁柱
- 关键词：指突状树突细胞肉瘤脾脏骨髓
- 人乳头瘤病毒基因分型在宫颈鳞癌及癌前病变的分布规律及临床意义被引量：7
- 2013年
- 为探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)基因分型在宫颈鳞癌及癌前病变中的分布规律及其与宫颈鳞癌发生发展的关系,应用PCR-反向点杂交技术对109例宫颈病变患者(宫颈鳞癌40例、CIN69例)进行HPV感染基因分型测定.结果显示,109例标本中HPV阳性检出率为100%,最常见HPV基因型为HPV16型;随着病变程度增加HPV单一感染比例逐渐升高,多重感染比例逐渐下降,单一感染以高危型HPV16型感染为主;HPV16型在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC中阳性率分别为30.77%(8/26)、59.09%(13/22)、90.48%(19/21)、90%(36/40),阳性率呈依次上升趋势.宫颈鳞癌及癌前病变与HPV感染直接相关,宫颈癌癌前病变是高、低危HPV共同作用的结果;高危型HPV持续感染是高级别子宫病变及癌变发生的必要条件;HPV16型病毒感染是国人子宫颈鳞癌形成的主要原因.
- 武迪程波刘珊吴西钊许琳石建玲孙锁柱
- 关键词：人乳头瘤病毒基因分型宫颈鳞癌
- 基于日本脑炎病毒复制子载体系统的疫苗研究
- 乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)属于黄病毒科黄病毒属,主要在亚洲流行,可引起严重的中枢神经系统传染病,感染后致死率高达30%左右,并有50%的存活者会留下永久性的神经系统后遗...
- 刘珊
- 关键词：日本脑炎病毒复制子
- 文献传递
- 稳定表达乙脑病毒结构蛋白的细胞系的建立被引量：2
- 2009年
- 以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株全长基因组克隆质粒pBR-JTF为模板,通过PCR分别扩增prM-E及C-prM-E基因片段,构建表达乙型脑炎病毒结构蛋白的真核表达质粒pCJE-ME及pCJE-CME。将这2种重组质粒用脂质体法转染BHK-21细胞后,质粒pCJE-ME表现明显的细胞毒性,转染细胞不能存活;质粒pCJE-cME可导致筛选到表达JEV结构蛋白的稳定细胞系,这种稳定表达JEV结构蛋白的细胞系通过PCR扩增细胞系基因组、ELISA、Western Blot、间接免疫荧光等方法得到鉴定。研究结果表明在C蛋白存在下,乙型脑炎病毒C-prM-E蛋白可以在BHK细胞中稳定表达,为研制JEV新型复制子颗粒疫苗提供了便利工具。
- 刘珊黄莺杨鹏孙志伟俞炜源
- 关键词：乙型脑炎病毒结构蛋白细胞系
- 老年性EB病毒阳性的弥漫性大B细胞淋巴瘤1例被引量：7
- 2013年
- 患者男性，75岁，发现全身多处浅表淋巴结肿大半年余。查体：颌下、锁骨上，双侧腋窝下及左腹股沟可触及数个肿大淋巴结，最大者2cm×3cm，活动度可，无发红、触痛。行左锁骨上淋巴结活检。
- 程波孙锁柱丁姗姗刘珊吴西钊
- 关键词：B细胞性淋巴瘤EB病毒老年
