李敏思
- 作品数：12 被引量：59H指数：4
- 供职机构：吉林出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家质检总局科技计划项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 核酸适配体在病毒检测中的研究进展被引量：5
- 2013年
- 核酸适配体指利用SELEX技术筛选出的寡聚核苷酸片段,它可以特异性地识别靶标并与之结合,且该技术具有成本低、亲和力高、特异性强等优点。目前,核酸适配体已广泛地应用于基础研究、临床诊断、疾病治疗等多领域,并且显示出巨大的应用潜力。结合近年来核酸适配体在病毒检测研究领域的最新研究成果,凭借适配体独特的性质在检测方面发挥的重要作用,综述了核酸适配体在人类免疫缺陷病病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒等病毒检测方面的最新研究进展,展望了核酸适配体在病毒检测领域的发展趋势。
- 李敏思伏小平宋战昀付志金
- 关键词：SELEX病毒适配体
- 新城疫病毒RNA适配体的筛选及活性研究
- 新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）属于副黏病毒科，为单股、不分节段、有囊膜的负链RNA病毒。新城疫病毒F48E9株为标准强毒株，于1948年初次在中国分离，是我国特有的基因型。 适...
- 李敏思
- 关键词：SELEX新城疫病毒HN蛋白
- 文献传递
- 羧甲基壳聚糖病毒灭活/去除工艺验证被引量：3
- 2016年
- 目的对羧甲基壳聚糖病毒灭活/去除工艺进行验证。方法模拟生产条件,选择猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)、伪狂犬病病毒(pseudo rabies virus,PRV)、鸭肝炎病毒Ⅰ型(duck hepatitis virus-Ⅰ,DHV-Ⅰ)、牛滤过性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)作为指示病毒,采用高温碱化和醇洗灭活/去除病毒,Karber法计算病毒滴度,荧光PCR检测病毒灭活/去除效果。结果 3批甲壳素经碱化反应处理,PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ的平均灭活对数值分别为≥6.736、≥6.597、≥6.138和≥5.806 log TCID50/0.1 ml;3批羧甲基壳聚糖经醇洗处理,PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ的平均灭活对数值分别为≥6.763、≥6.569、≥6.167和≥5.587 log TCID50/0.1 ml。碱化反应与醇洗处理前感染PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ样品荧光PCR检测平均Ct值分别为23.465、23.387,24.873、24.706,26.887、25.376,27.386、24.629,处理后样品的荧光PCR检测平均Ct值均>40。结论羧甲基壳聚糖经高温碱化和醇洗反应处理均能有效灭活病毒,保证了产品的安全性。
- 杨倩宋战昀张旭光李敏思王向辉隋佳辰张健郑言魏春艳王振国
- 关键词：甲壳素羧甲基壳聚糖
- 新城疫病毒血凝素蛋白RNA适配体的筛选及活性研究被引量：4
- 2014年
- 核酸适配体与单克隆抗体相比具有更高的分辨率,能识别配体间一个基团的细微差别,且所需的结合活性位点更小。本试验通过SELEX技术,体外经过12轮筛选获得了能够与F48E9株新城疫病毒特异性结合的3个RNA适配体,命名为FHN12-45-3、FHN12-36-6和FHN12-19-9。RNA适配体的二级机构预测结果显示,所筛选获得的RNA适配体空间结构以外环、内环、发夹环及突起结构为主。特异性试验结果显示,适配体FHN12-45-3经ELISA和Dot-blot试验证实能够区分不同株的新城疫病毒。生物学活性试验结果显示,适配体FHN12-45-3能够减少4个单位的F48E9株病毒血凝效价,初步表明适配体与F48E9株病毒可能的活性作用位点在血凝素蛋白上,在鸡胚成纤维细胞培养体系中适配体FHN12-45-3能够减少84.62%的F48E9株病毒蚀斑,荧光定量RT-PCR方法检测适配体FHN12-45-3能够减少培养体系中77.73%病毒载量,表明筛选的RNA适配体在细胞水平能够有效的抑制F48E9株新城疫病毒的复制。
- 李敏思宋战昀冯新杨倩郑言魏春艳王伟利王振国付小平
- 关键词：新城疫病毒血凝素蛋白SELEX
- Taq Man探针实时荧光PCR方法检测黑蜂王台病毒的方法建立和应用被引量：3
- 2015年
- 为了建立实时荧光PCR方法以检测蜜蜂黑蜂王台病毒,试验依据Taq Man荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂黑蜂王台病毒编码衣壳蛋白的保守序列区域,设计出1对特异性引物和1条探针,建立了一种快速检测黑蜂王台病毒(BQCV)的荧光PCR方法,对2005年从12省收集到的18种蜜蜂病料进行检测,确定各地区感染BQCV情况。结果表明:该方法对蜜蜂黑蜂王台病毒有较好的特异性,与其他蜜蜂病毒之间均无交叉反应;检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL阳性质粒,可对低病毒含量的样品进行准确检测;变异系数为1.3%;应用该方法对2005年从12省收集到的18种蜜蜂病料进行检测,4 h内即可报告检测结果。说明该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等优点,适用于蜜蜂中黑蜂王台病毒的快速检疫。
- 杨倩宋战昀石建平张健王振国孟庆峰崔焕忠王全凯李敏思郑言
- 关键词：TAQ荧光PCR检测
- 黑蜂王台病毒基因组结构研究进展被引量：1
- 2015年
- 蜜蜂病毒被认为是主要威胁蜜蜂健康的因素之一,是引发蜜蜂蜂群大量死亡及蜂群衰竭的关键因素[1-7].首次鉴定出蜜蜂病毒并认定其为新的感染蜜蜂的病原体是在20世纪初期.目前,已知可感染蜜蜂的病毒高达20种,其中包括18种RNA病毒,其中的某些病毒已在全球范围内广泛传播[8-10].蜜蜂病毒能够影响蜜蜂形态、生理和行为,并与弱群及蜜蜂死亡息息相关[11].蜜蜂黑蜂王台病是由黑蜂王台病毒（Black queen cell virus,BQCV）引起的一种蜜蜂蜂王幼虫病害.BQCV由Baliey等于1977首次报道,该病毒是从蜂王幼虫和封盖蜂王蛹中分离得到,感染的蜂王蛹死亡并且其颜色由棕色变暗变黑,随后蜂房壁开始变黑,BQCV的名称也因此而来[12].
- 杨倩宋战昀张健石建平崔焕忠王振国孟庆峰王全凯李敏思郑言王向辉
- 关键词：RNA病毒基因组结构黑蜂蜂王幼虫VIRUS
- 蜜蜂残翼病病毒PCR检测及5′-UTR基因序列分析被引量：1
- 2015年
- 从吉林省某蜂场疑似蜜蜂残翼病病料中分离到一株蜜蜂残翼病病毒（DWV）,命名为DWVJL1,提取该分离株的总RNA,采用RT-PCR技术扩增其基因组的5′-UTR并测序。测序结果与GenBank公布道的DWV 5′-UTR序列同源性在95%~99%之间。将测序结果与GenBank上公布的9个相关序列进行系统遗传进化树分析,证实其与JX878304同源性最近,而与GU109335、KJ437447同源性最远。
- 郑言宋战昀杨倩王向辉隋佳辰张健王振国李敏思
- 核酸适配体技术在食品重金属检测中的应用研究进展被引量：24
- 2015年
- 近年来食品中重金属超标对人们健康构成了威胁,所以对食品中重金属检测技术的开发成为了重要研究内容。虽然传统的检测技术对重金属进行了高选择性和高灵敏度的检测,但是仍需要一种简单、快速、有效、成本低廉的方法用于食品安全领域的快速检测。核酸适配体为一段单链DNA或者RNA序列,是经体外筛选技术筛选出的能特异结合蛋白质或其他小分子物质的寡聚核苷酸片段。核酸适配体具有靶分子广、灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点,因而被广泛用于食品安全检测领域。本文综述近年来核酸适配体技术对食品中Hg2+、As3+、Pb2+的检测,并对核酸适体技术在食品重金属检测领域的应用前景进行了展望。
- 于寒松隋佳辰代佳宇宋战昀郑言杨倩王向辉张健李敏思
- 关键词：重金属核酸适配体
- 结核分支杆菌核酸适配体研究进展被引量：4
- 2014年
- 结核分支杆菌(MTB)是引起多种宿主感染结核病的重要病原菌,由于结核分支杆菌耐药菌株的产生,导致结核病在世界范围内呈高发趋势。由于MTB检出率较低,开发一种简单快速的诊断方法迫在眉睫。指数富集配体系统进化技术(SELEX)的原理是从随机寡核苷酸文库中筛选到能特异性结合靶物质的寡核苷酸配体(称为适配体)。论文对近几年国内外通过SELEX技术对结核分支杆菌筛选出的适配体做一综述,适配体的靶物质分别为分泌蛋白MPT64,CFP10-ESAT6蛋白,多磷酸激酶2(PPK2)以及结核分支杆菌(H37Rv株)整个菌体。体外筛选的结核分支杆菌适配体,能对结核病做出早期诊断,并能作为MTB疫苗的免疫佐剂,在临床诊断及药物研究等方面有很大应用前景。
- 杨倩王全凯宋战昀李敏思张健王振国
- 关键词：结核分支杆菌适配体蛋白
- 吉林省梅花鹿副结核病、结核病及布鲁菌病血清流行病学调查被引量：10
- 2013年
- 采集吉林省具有代表性的4个地区的8个梅花鹿场(四平2个梅花鹿场、通化2个梅花鹿场、长春市2个梅花鹿场、辽源2个梅花鹿场)中630份血清样本作为研究对象,进行血清学(ELISA方法)检测,了解吉林省梅花鹿副结核病、结核病及布鲁菌病感染现状。。上述4个地区均存在梅花鹿副结核病,结核病及布鲁菌病发生和流行,其中副结核病的整体阳性率为18.73%、结核病的整体阳性率为19.21%、布鲁病的整体阳性率为28.42%。吉林省梅花鹿副结核病、结核病及布鲁菌病流行不容乐观,提示广大饲养者及相关部门应该高度重视梅花鹿副结核病的防治工作。
- 付志金宋战昀冯新王振国侯红燕王春雨王全凯李敏思
- 关键词：梅花鹿副结核病结核病布鲁菌病血清流行病学
