李正阳
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家临床重点专科建设项目广东省高校优秀青年创新人才培养计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Scriptaid提高小鼠体细胞核移植克隆胚早期发育能力的实验研究
- 随着人类社会的飞速发展,人类某些中枢神经退行性病变/[如帕金森病/(Parkinson's disease, PD/),阿尔茨海默病/(Alzheimer's disease, AD/)等/]和中枢神经系统/(centr...
- 李正阳
- 关键词：体细胞核移植组蛋白去乙酰化酶抑制剂
- 文献传递
- 人Tau基因多表位肽段原核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-TauP1/P2。将鉴定后的阳性重组质粒转入E.coli BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并采用GST法纯化、SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达。以TauP1/P2 DNA疫苗免疫小鼠获取血清,Dot-blot检测TauP1/P2特异性抗体产生情况。结果 PCR扩增出约300 bp的基因片段,克隆至表达载体后,经酶切和测序验证正确;获得了纯化的目的蛋白,并证实了GST-TauP1/P2融合蛋白的表达。Dot-blot检测到特异性TauP1/P2抗体的产生。结论成功构建和表达人Tau多表位肽段基因的目的蛋白GST-TauP1/P2,能够识别Tau多表位DNA疫苗免疫后小鼠产生的特异性TauP1/P2抗体。
- 孙海涛杨化强杨璐军李正阳杜谋选陈宇新姜晓丹
- 关键词：TAU质粒原核表达融合蛋白
- Scriptaid对小鼠体细胞核移植克隆胚早期发育能力的提高作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨抗肿瘤药物Scriptaid对小鼠体细胞核移植（SCNT）克隆胚体外发育的影响及提高移植效率的新途径。方法以C57／BL6小鼠卯母细胞为受体、卯丘细胞为供体进行SCNT，构建克隆胚，并采用数字随机表法将克隆胚分为5组，分别在含0nmol／L（阴性对照组1、50、100、250、500nmol／LScriptaid的无钙激活剂中激活6h．然后在含相应浓度Scriptaid的KSOM培养基中处理4h，最后转移至KSOM培养基中孵育96h。观察、记录各组克隆胚的发育情况并进行囊胚细胞计数。结果各组克隆胚激活率和2．cell率之间差异无统计学意义（P〉O．05）；250nmol／LScript,aid组的囊胚形成率（24．2％）和囊胚细胞数（56．27±2．43）与0 nmol／L组、50nmol／L组、100nmol／L、500nmol／LScriptaid组之间f其囊胚形成率分别为5．3％、6．5％、9．4％和6．9％．囊胚细胞数分别为44.67±1.53, 50.25±1.26, 52.33± 2.50 和 50.75±1.50比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论250nmol／LScrimaid能有效提高小鼠SCNT克隆胚体外早期发育能力。
- 李正阳邹雨汐孙海涛姜晓丹
- 关键词：核移植组蛋白去乙酰化干细胞
