陈宇新
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人Tau基因多表位肽段原核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-TauP1/P2。将鉴定后的阳性重组质粒转入E.coli BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并采用GST法纯化、SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达。以TauP1/P2 DNA疫苗免疫小鼠获取血清,Dot-blot检测TauP1/P2特异性抗体产生情况。结果 PCR扩增出约300 bp的基因片段,克隆至表达载体后,经酶切和测序验证正确;获得了纯化的目的蛋白,并证实了GST-TauP1/P2融合蛋白的表达。Dot-blot检测到特异性TauP1/P2抗体的产生。结论成功构建和表达人Tau多表位肽段基因的目的蛋白GST-TauP1/P2,能够识别Tau多表位DNA疫苗免疫后小鼠产生的特异性TauP1/P2抗体。
- 孙海涛杨化强杨璐军李正阳杜谋选陈宇新姜晓丹
- 关键词：TAU质粒原核表达融合蛋白
- BDNF转染神经干细胞可降低β-淀粉样蛋白对神经元的毒性被引量：2
- 2015年
- 目的探讨神经干细胞（NSCs）转染脑源性神经生长因子（BDNF）后对β-淀粉样蛋白（Aβ）毒性作用的抵抗能力及机制。方法用脂质体介导法将BDNF基因转染到C57小鼠NSCs内．经荧光显微镜及ELISA检测转基因NSCs及其分化细胞基因表达情况。体外培养小鼠神经元，将其分成3组：a组为神经元组，b组为神经元与NSCs共培养组，c组为神经元与BDNF转基因NSCs共培养组；每组设2平行组。培养3d后，向其中一平行组加入AB。蛋白，作为d、e、f组。通过ELISA和Western blotting检验记录24h和48h后神经元生存率以及各组Aβ、总tau蛋白、磷酸化tau蛋白水平。结果BDNF转基因干细胞及其子代细胞均有BDNF表达并持续1．5周左右。以a组细胞存活率为参照．24h后d-f组细胞平均存活率分别是51．86％±0．03％、73．68％±0．04％、85．34％±0．01％：48h后d-f组细胞平均存活率分别是38．76％±0．01％、59．65％±0．04％、75．6l％±0．07％；其中d、e组细胞存活率明显低于其他各组，差异有统计意义（P〈0．05）。a-c组Aβ蛋白未能检测到，d-f组Aβ蛋白水平较高，组间差异不具有统计学意义（p〉0．05）。各组细胞总tau蛋白水平差异不具有统计学意义（P〉0．05）。各组磷酸化tau蛋白水平差异有统计学意义（P〈0．05），其中d、e组磷酸化tau蛋白水平显著高于其他各组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BDNF转基因NSCs可以持续表达BDNF基因产物，降低Aβ对神经元的毒性作用，同时通过减少细胞内磷酸化tau蛋白的水平提高细胞存活率。
- 陈宇新杨璐军张凤兰钟慧霖孙海涛肖志成姜晓丹
- 关键词：Β-淀粉样蛋白TAU蛋白脑源性神经生长因子神经干细胞
- 低代毛乳头细胞来源外泌体对毛囊再生及毛囊周期的影响及其机制的研究
- 目的： 毛囊(HF)是哺乳动物一个复杂的小器官，由上皮和间充质成分相互作用而组成。毛乳头细胞(dermal papilla cells，DPCs)被认为是一种独特的间充质干细胞，具有自体干细胞治疗的潜力，位于毛囊底端的...
- 陈宇新
- 关键词：脱发毛乳头细胞外泌体
