肖志成
- 作品数：11 被引量：50H指数：3
- 供职机构：澳大利亚莫纳什大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省高层次科技人才培引工程项目云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人参皂苷Rg3对体外培养小鼠神经干细胞分化的影响被引量：6
- 2018年
- 背景:神经干细胞来源非常有限,而且在自然分化过程中绝大多数分化为神经胶质细胞,分化为神经元的比例相对较少,因此采取有效措施诱导其向合适的子细胞方向分化是非常重要的科研课题。以往研究证明人参皂苷类成分,如Rb1和Rg1,对神经干细胞的定向分化有一定影响,但Rg3是否对神经干细胞的分化起作用鲜有报道。目的:研究人参皂苷Rg3对小鼠神经干细胞分化为神经元和星形胶质细胞的影响。方法:分离孕14 d的C57BL/6小鼠的胎鼠大脑皮质神经干细胞并传代培养,用神经干细胞特异性免疫抗体Nestin和Sox2检测神经干细胞纯度。用分化培养基联合人参皂苷Rg3(空白对照、50 nmol/L和250 nmol/L)诱导神经干细胞分化3 d,然后用神经元特异性免疫抗体Tuj1和星形胶质细胞特异性免疫抗体GFAP检测神经干细胞分化为神经元和星形胶质细胞的情况,计算Tuj1^+/DAPI和GFAP^+/DAPI的比例;通过实时荧光定量PCR技术检测各组细胞Tuj1和GFAP mRNA的表达水平。结果与结论:(1)经细胞免疫荧光实验检测传代培养的小鼠胎鼠细胞几乎全为Nestin和Sox2双阳性细胞,表明成功分离培养出纯度较高的神经干细胞,可以用于后期实验;(2)诱导分化3 d后,与空白对照组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组相比,50 nmol/L人参皂苷Rg3组对神经干细胞分化为神经元具有明显促进作用(P<0.01),而空白对照组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组之间差异无显著性意义(P>0.05);(3)诱导分化3 d后,与空白对照组相比,50 nmol/L人参皂苷Rg3组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组对神经干细胞分化为星形胶质细胞具有促进作用(P<0.05),而50 nmol/L人参皂苷Rg3组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组之间差异不明显(P>0.05);(4)real time PCR结果总体与细胞免疫荧光结果相似;(5)结果表明,人参皂苷Rg3在50 nmol/L浓度时能明显促进神经干细胞向神经元和星形胶质细胞方向分化;但在250 nmol/L浓度时主要促进
- 张凤兰杨璐军胡炜彦周姣月马生霞肖志成
- 关键词：人参皂苷RG3神经干细胞分化神经元星形胶质细胞干细胞
- 脑缺血再灌注损伤研究进展被引量：22
- 2016年
- 脑卒中是最常见的死亡原因之一,目前主要治疗方法是溶栓疗法[1-3].然而再灌注后进一步加重了损伤.脑缺血/再灌注损伤（I/R）可以导致患者产生神经损伤和身体功能缺损或残疾[4].脑I/R损伤的防治已成为研究热点.本文主要从脑缺血再灌注损伤机制及治疗方面进行综述.
- 侯昆戴海龙肖志成
- 关键词：脑缺血再灌注损伤
- 不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究被引量：3
- 2017年
- 目的详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells,NSCs)所占比例,为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18d)和大脑皮层(胎龄14、16和18 d)组织,消化成单细胞悬液,贴壁培养3~4 h,细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin,统计分析各组中NSCs所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄(12.5、14、16和18 d)小鼠大脑皮层中的表达水平。结果细胞免疫荧光结果显示,分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高,为53.42%±1.57%;胎龄18 d组NSCs所占比例最低,为25.96%±1.31%,而胎龄14 d组和16 d组位于二者之间。在分离培养的不同胎龄小鼠大脑皮层组织中,胎龄14 d组NSCs所占比例最高,为33.65%±0.29%;胎龄18d组比例最低,为25.29%±0.28%,胎龄16 d组位于二者之间(26.82%±0.30%)。实时荧光定量PCR结果显示,当把胎龄12.5 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA表达水平设定为1,胎龄14 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA的相对表达量为0.83±0.04,胎龄16 d组为0.77±0.05,胎龄18 d组为0.44±0.05。因此,随着小鼠胎龄增加,小鼠大脑皮层中的Nestin mRNA的表达水平逐渐下降。结论在小鼠大脑发育过程中,随着胎龄增加,分离培养的小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞比例逐渐降低。
- 张凤兰杨璐军朱红梅张南炀沙学芳朱柯颖肖志成
- 关键词：小鼠不同胎龄神经干细胞全脑大脑皮层
- 不同分化时间对体外培养大脑皮层神经干细胞分化的影响被引量：1
- 2017年
- 目的研究不同分化时间对体外单层贴壁培养的大脑皮层神经干细胞（NSCs）分化成星形胶质细胞和神经元的影响。方法（1）体外分离、培养胎鼠大脑皮层原代NSCs，采用细胞免疫荧光染色检测P2代神经球和吹散成单细胞的NSCs中巢蛋白、Sox2的表达；（21取P2代神经球吹散成单细胞，接种于圆玻片上培养过夜，次日更换诱导分化培养基，分别继续培养ld、3d、5d，采用细胞免疫荧光染色检测细胞神经胶质纤维酸性蛋白（GFAPl、Tuj1的表达，分析神经元突起的平均数量、平均最长长度和平均分枝水平；（31取接种于12孔细胞培养板上的NSCs分化样品，采用实时荧光定量PCR检测NSCs不同分化时间点巢蛋白、GFAP、TujlmRNA的表达。结果（11细胞免疫荧光染色检测显示神经球、单层贴壁培养细胞几乎均为巢蛋白和Sox2双阳性细胞，说明培养的细胞几乎全部是NSCs。（21分化3d组、分化5d组NSCs中GFAP’细胞比例高于分化ld组，分化5d组NSCs中Tuil’细胞比例高于分化1d组、分化3d组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；分化3d组、分化5d组所分化神经元突起的平均数量、平均分枝水平均高于分化1d组，差异有统计学意义（氏0．051；分化1d组、分化3d组、分化5d组所分化神经元突起的平均最长长度依次增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；（3）与分化1d组、分化3d组比较，分化5d组NSCs中巢蛋白mRNA的表达降低，GFAP、TujlmRNA的表达增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论随着分化时间的增加，体外单层贴壁培养的NSCs分化出的星形胶质细胞和神经元的数量增多，细胞形态变复杂，神经元突起也越来越成熟，巢蛋白mRNA的表达降低，GFAP和Tuj1 mRNA的表达上升。
- 张凤兰杨璐军法志强肖志成
- 关键词：神经干细胞细胞分化星形胶质细胞神经元
- Notch信号通路介导少突胶质细胞成熟及其在脊髓损伤中的作用与机制
- 王廷华肖志成刘佳邹宇习杨彦彬张荣平熊柳林李劲涛王芳刘苏李力燕钱保江李云张明
- 研究内容：该项目主要研究F3/Contactin-Notch信号在少突胶质细胞发育、成熟中的作用及干细胞源性少突胶质前体细胞等多种细胞移植对脊髓损伤修复的影响及作用机制。 发现点：(1)发现并阐明F3/Contactin...
- 关键词：
- 关键词：脊髓损伤修复细胞移植治疗
- 胎鼠不同脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异被引量：1
- 2017年
- 背景:目前,小鼠神经干细胞的体外培养技术已被众多科研平台熟练掌握,但是各科研平台在培养脑源性神经干细胞时所使用的脑组织有很大差异。胎龄14 d(E14)小鼠脑组织被广泛用于培养胎鼠神经干细胞,而对于此时胎鼠不同脑组织中所含神经干细胞的详细比例及其间有无差异,目前研究较少。目的:比较E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异,为后期优化分离高纯度神经干细胞提供直接量化数据和前期研究基础。方法:分离E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织,加入胰酶消化成单细胞,贴壁培养3.0-4.0 h,然后通过细胞免疫荧光实验,用DAPI标记总细胞,神经干细胞特异性抗原Nestin标记神经干细胞,神经元特异性抗原Tuj1标记神经元,统计分析Nestin^+/DAPI和Tuj1^+/DAPI所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中Nestin和Tuj1 mR NA的表达水平。结果与结论:(1)细胞免疫荧光结果显示,E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中均有大量Nestin^+和Tuj1^+细胞存在;小鼠前脑组织中Nestin^+细胞所占比例最高,明显高于全脑(P<0.01)和大脑皮质(P<0.05);而前脑组织中Tuj1^+细胞比例明显低于全脑(P<0.05)和大脑皮质(P<0.001)。该结果表明,与全脑和大脑皮质相比,前脑组织中神经干细胞所占比例最高,神经元所占比例最低;(2)Real time PCR结果显示,E14小鼠前脑组织中Nestin mR NA表达水平最高,明显高于全脑组织(P<0.05),略高于大脑皮质(P>0.05),说明前脑组织中有较多神经干细胞存在;而Tuj1 mR NA的表达水平明显低于全脑组织(P<0.05)和大脑皮质组织(P<0.05),说明前脑组织中有较少神经元存在;(3)综合以上结果,与全脑和大脑皮质相比,分离、消化E14小鼠前脑组织所获得的神经干细胞比例最高,是后期培养优质神经干细胞的重要前提。
- 张凤兰杨璐军肖志成
- 关键词：神经干细胞大脑皮质前脑干细胞胎鼠全脑神经元
- 淀粉样前体蛋白在神经发生中的作用与阿尔茨海默病关系的研究进展被引量：1
- 2017年
- 阿尔茨海默病,俗称老年痴呆,由德国外科医生Alzheimer首次发现,是一种进行性发展、致死性神经系统退行性疾病。该病是目前最常见的一种失智症(俗称痴呆症,Dementia),但这种失智不同于正常老化。迄今为止AD具体的发病机制仍未明确、也没有精准的早期筛查和诊断手段及有效控制病情的治疗方法。近年来大量研究证实成年哺乳动物的中枢神经系统终身存在着神经发生。这为脑损伤和神经系统变性疾病的治疗带来了希望。文章将对成年中枢神经系统神经发生的过程及参与AD病程的关键分子APP在神经发生方面的最新发现进行综述,以期为本领域或相关研究提供借鉴或参考。
- 朱红梅张凤兰肖志成陈芳
- 关键词：淀粉样前体蛋白神经发生阿尔茨海默病
- 高血压与认知功能障碍的研究进展被引量：11
- 2015年
- 伴随着不断发展和加速的人口老龄化进程,高血压、认知功能障碍这两大问题成为了严重影响老年人生活质量及健康的问题。近年来,与高血压相关的老年脑功能的损害逐渐成为研究热点,即轻度认知功能损害到痴呆的序贯性变化[1-4]。认知功能障碍严重影响高血压患者的生活质量,同时也是家庭及社会的沉重负担。本文就高血压与老年人认知功能的关系、可能机制方面做一综述。1认知功能障碍的流行病学特点2009年全球对痴呆诊治的花费为4200亿美元,
- 戴海龙光雪峰肖志成
- 关键词：老年人生活质量舒张压水平序贯性脑血流老年人血压肾并发症
- 双环己酮草酰二腙诱导小鼠髓鞘脱失的雌雄差异被引量：1
- 2016年
- 目的比较双环己酮草酰二腙诱导雌雄小鼠髓鞘脱失的差异。方法取雌雄小鼠各10只分别为雌、雄鼠组,均喂养含有0.2%双环己酮草酰二腙的饲料6周建立脱髓鞘模型。用转杆测试仪检测两组小鼠的运动平衡与协调能力,用LFB-PAS染色法观察两组小鼠胼胝体髓鞘脱失情况,用免疫荧光染色法检测两组小鼠脑组织切片髓鞘碱性蛋白(MBP)荧光强度,用Western blot法检测两组小鼠脑组织匀浆MBP水平。结果雌鼠组小鼠运动时间(117.60±18.48)s、掉落次数(3.2±0.8)次、髓鞘脱失程度评分(2.20±0.27)分、脑组织切片MBP荧光强度65.20±6.46、脑组织匀浆MBP水平0.44±0.06,雄鼠组分别为(90.80±8.70)s、(4.6±0.9)次、(1.70±0.27)分、47.31±5.79、0.27±0.05。与雌鼠组相比,雄鼠组运动时间较短,掉落次数较多,髓鞘评分较低,脑组织切片MBP荧光强度较低,脑组织匀浆MBP水平较低,P均<0.05。结论在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘小鼠模型中,雄鼠更容易脱髓鞘。
- 王娓娓鲍天昊杨飏张红苗王淑芬肖志成韩剑虹
- 关键词：多发性硬化性别髓鞘脱失
- BDNF转染神经干细胞可降低β-淀粉样蛋白对神经元的毒性被引量：2
- 2015年
- 目的探讨神经干细胞（NSCs）转染脑源性神经生长因子（BDNF）后对β-淀粉样蛋白（Aβ）毒性作用的抵抗能力及机制。方法用脂质体介导法将BDNF基因转染到C57小鼠NSCs内．经荧光显微镜及ELISA检测转基因NSCs及其分化细胞基因表达情况。体外培养小鼠神经元，将其分成3组：a组为神经元组，b组为神经元与NSCs共培养组，c组为神经元与BDNF转基因NSCs共培养组；每组设2平行组。培养3d后，向其中一平行组加入AB。蛋白，作为d、e、f组。通过ELISA和Western blotting检验记录24h和48h后神经元生存率以及各组Aβ、总tau蛋白、磷酸化tau蛋白水平。结果BDNF转基因干细胞及其子代细胞均有BDNF表达并持续1．5周左右。以a组细胞存活率为参照．24h后d-f组细胞平均存活率分别是51．86％±0．03％、73．68％±0．04％、85．34％±0．01％：48h后d-f组细胞平均存活率分别是38．76％±0．01％、59．65％±0．04％、75．6l％±0．07％；其中d、e组细胞存活率明显低于其他各组，差异有统计意义（P〈0．05）。a-c组Aβ蛋白未能检测到，d-f组Aβ蛋白水平较高，组间差异不具有统计学意义（p〉0．05）。各组细胞总tau蛋白水平差异不具有统计学意义（P〉0．05）。各组磷酸化tau蛋白水平差异有统计学意义（P〈0．05），其中d、e组磷酸化tau蛋白水平显著高于其他各组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BDNF转基因NSCs可以持续表达BDNF基因产物，降低Aβ对神经元的毒性作用，同时通过减少细胞内磷酸化tau蛋白的水平提高细胞存活率。
- 陈宇新杨璐军张凤兰钟慧霖孙海涛肖志成姜晓丹
- 关键词：Β-淀粉样蛋白TAU蛋白脑源性神经生长因子神经干细胞
