张凤兰
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：昆明医科大学分子临床医学研究院云南省干细胞和再生医学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究被引量：3
- 2017年
- 目的详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells,NSCs)所占比例,为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18d)和大脑皮层(胎龄14、16和18 d)组织,消化成单细胞悬液,贴壁培养3~4 h,细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin,统计分析各组中NSCs所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄(12.5、14、16和18 d)小鼠大脑皮层中的表达水平。结果细胞免疫荧光结果显示,分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高,为53.42%±1.57%;胎龄18 d组NSCs所占比例最低,为25.96%±1.31%,而胎龄14 d组和16 d组位于二者之间。在分离培养的不同胎龄小鼠大脑皮层组织中,胎龄14 d组NSCs所占比例最高,为33.65%±0.29%;胎龄18d组比例最低,为25.29%±0.28%,胎龄16 d组位于二者之间(26.82%±0.30%)。实时荧光定量PCR结果显示,当把胎龄12.5 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA表达水平设定为1,胎龄14 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA的相对表达量为0.83±0.04,胎龄16 d组为0.77±0.05,胎龄18 d组为0.44±0.05。因此,随着小鼠胎龄增加,小鼠大脑皮层中的Nestin mRNA的表达水平逐渐下降。结论在小鼠大脑发育过程中,随着胎龄增加,分离培养的小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞比例逐渐降低。
- 张凤兰杨璐军朱红梅张南炀沙学芳朱柯颖肖志成
- 关键词：小鼠不同胎龄神经干细胞全脑大脑皮层
- TAG1/APP通过调控miR-218-5p抑制胚胎神经干细胞分化为神经元及机制研究
- [目的]目前,阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）是全球医疗保健的研究热点,但是其致病原因仍不清楚。研究表明淀粉样前体蛋白（Amyloid precursor protein,APP）的 C 末端...
- 张凤兰
- 关键词：阿尔兹海默病APPAICD胚胎神经干细胞神经元
- 胎鼠不同脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异被引量：1
- 2017年
- 背景:目前,小鼠神经干细胞的体外培养技术已被众多科研平台熟练掌握,但是各科研平台在培养脑源性神经干细胞时所使用的脑组织有很大差异。胎龄14 d(E14)小鼠脑组织被广泛用于培养胎鼠神经干细胞,而对于此时胎鼠不同脑组织中所含神经干细胞的详细比例及其间有无差异,目前研究较少。目的:比较E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异,为后期优化分离高纯度神经干细胞提供直接量化数据和前期研究基础。方法:分离E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织,加入胰酶消化成单细胞,贴壁培养3.0-4.0 h,然后通过细胞免疫荧光实验,用DAPI标记总细胞,神经干细胞特异性抗原Nestin标记神经干细胞,神经元特异性抗原Tuj1标记神经元,统计分析Nestin^+/DAPI和Tuj1^+/DAPI所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中Nestin和Tuj1 mR NA的表达水平。结果与结论:(1)细胞免疫荧光结果显示,E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中均有大量Nestin^+和Tuj1^+细胞存在;小鼠前脑组织中Nestin^+细胞所占比例最高,明显高于全脑(P<0.01)和大脑皮质(P<0.05);而前脑组织中Tuj1^+细胞比例明显低于全脑(P<0.05)和大脑皮质(P<0.001)。该结果表明,与全脑和大脑皮质相比,前脑组织中神经干细胞所占比例最高,神经元所占比例最低;(2)Real time PCR结果显示,E14小鼠前脑组织中Nestin mR NA表达水平最高,明显高于全脑组织(P<0.05),略高于大脑皮质(P>0.05),说明前脑组织中有较多神经干细胞存在;而Tuj1 mR NA的表达水平明显低于全脑组织(P<0.05)和大脑皮质组织(P<0.05),说明前脑组织中有较少神经元存在;(3)综合以上结果,与全脑和大脑皮质相比,分离、消化E14小鼠前脑组织所获得的神经干细胞比例最高,是后期培养优质神经干细胞的重要前提。
- 张凤兰杨璐军肖志成
- 关键词：神经干细胞大脑皮质前脑干细胞胎鼠全脑神经元
- 淀粉样前体蛋白在神经发生中的作用与阿尔茨海默病关系的研究进展被引量：1
- 2017年
- 阿尔茨海默病,俗称老年痴呆,由德国外科医生Alzheimer首次发现,是一种进行性发展、致死性神经系统退行性疾病。该病是目前最常见的一种失智症(俗称痴呆症,Dementia),但这种失智不同于正常老化。迄今为止AD具体的发病机制仍未明确、也没有精准的早期筛查和诊断手段及有效控制病情的治疗方法。近年来大量研究证实成年哺乳动物的中枢神经系统终身存在着神经发生。这为脑损伤和神经系统变性疾病的治疗带来了希望。文章将对成年中枢神经系统神经发生的过程及参与AD病程的关键分子APP在神经发生方面的最新发现进行综述,以期为本领域或相关研究提供借鉴或参考。
- 朱红梅张凤兰肖志成陈芳
- 关键词：淀粉样前体蛋白神经发生阿尔茨海默病
- BDNF转染神经干细胞可降低β-淀粉样蛋白对神经元的毒性被引量：2
- 2015年
- 目的探讨神经干细胞（NSCs）转染脑源性神经生长因子（BDNF）后对β-淀粉样蛋白（Aβ）毒性作用的抵抗能力及机制。方法用脂质体介导法将BDNF基因转染到C57小鼠NSCs内．经荧光显微镜及ELISA检测转基因NSCs及其分化细胞基因表达情况。体外培养小鼠神经元，将其分成3组：a组为神经元组，b组为神经元与NSCs共培养组，c组为神经元与BDNF转基因NSCs共培养组；每组设2平行组。培养3d后，向其中一平行组加入AB。蛋白，作为d、e、f组。通过ELISA和Western blotting检验记录24h和48h后神经元生存率以及各组Aβ、总tau蛋白、磷酸化tau蛋白水平。结果BDNF转基因干细胞及其子代细胞均有BDNF表达并持续1．5周左右。以a组细胞存活率为参照．24h后d-f组细胞平均存活率分别是51．86％±0．03％、73．68％±0．04％、85．34％±0．01％：48h后d-f组细胞平均存活率分别是38．76％±0．01％、59．65％±0．04％、75．6l％±0．07％；其中d、e组细胞存活率明显低于其他各组，差异有统计意义（P〈0．05）。a-c组Aβ蛋白未能检测到，d-f组Aβ蛋白水平较高，组间差异不具有统计学意义（p〉0．05）。各组细胞总tau蛋白水平差异不具有统计学意义（P〉0．05）。各组磷酸化tau蛋白水平差异有统计学意义（P〈0．05），其中d、e组磷酸化tau蛋白水平显著高于其他各组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BDNF转基因NSCs可以持续表达BDNF基因产物，降低Aβ对神经元的毒性作用，同时通过减少细胞内磷酸化tau蛋白的水平提高细胞存活率。
- 陈宇新杨璐军张凤兰钟慧霖孙海涛肖志成姜晓丹
- 关键词：Β-淀粉样蛋白TAU蛋白脑源性神经生长因子神经干细胞
- 慢性病患者生命质量测定量表体系之骨关节炎量表QLICD-OA的研制与初步应用
- 目的采用“共性模块+特异模块”的模式开发适合我国人群的骨关节炎患者的生命质量量表(QLICD-OA),并对量表进行考评。结合传统临床客观指标分析骨关节炎患者生命质量的影响因素 方法提出QLICD-OA的理论框架、条目池、...
- 张凤兰
- 关键词：生命质量骨关节炎量表反应度
- 文献传递
