吕佰瑞
- 作品数：30 被引量：40H指数：4
- 供职机构：邯郸市中心医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金河北省卫生厅科研基金宜昌市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人PD-L1胞外区基因的克隆、原核表达及抗体制备
- 2010年
- 目的克隆人PD-L1胞外区基因并进行原核表达及相应蛋白的抗体制备,为进一步研究PD-1/PD-L1通路及针对该通路进行疾病治疗和药物筛选奠定基础。方法用PCR方法扩增编码人PD-L1胞外区的基因序列,克隆到原核表达载体pET28a(+)中并进行表达,用His抗体为一抗进行Western blotting鉴定并验证结合活性。用纯化的hPD-L1胞外区蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和流式法检测抗体滴度及其特异性。结果原核表达质粒pET28a(+)-hPD-L1成功构建,并可在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导高效表达,得到的hPD-L1胞外区蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确。用纯化蛋白免疫日本大耳白兔,制备的多克隆抗体具有较强的免疫结合活性,抗体滴度可达105。结论鉴定和纯化了原核表达的hPD-L1蛋白,制备的相应多克隆抗体能够检测真核细胞表达的hPD-L1蛋白,为进一步研究PD-1/PD-L1生物学活性奠定了实验基础。
- 李斌刘朝奇王见之史继静覃晓琳吕佰瑞王梦瑶韩琴
- 关键词：基因表达抗体
- 人DC-SIGN重组蛋白的表达、抗体制备及其应用
- 目的:为建立人 DC-SIGN双抗体夹心 ELISA方法,制备抗 DC-SIGN兔源多克隆抗体和鼠源单克隆抗体。以制备的多克隆抗体和单克隆抗体为基本检测试剂,进行检测 DC-SIGN的双抗体夹心 ELISA方法。 方法...
- 吕佰瑞
- 关键词：医学免疫学抗体制备蛋白表达
- 文献传递
- 细辛对紫杉醇诱导的大鼠神经病理性疼痛的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:研究细辛对紫杉醇诱导的神经病理性疼痛的作用,并观察其对紫杉醇抗肿瘤作用的影响,评价细辛防治化疗痛的应用价值。方法:用von Frey细丝测试大鼠机械性痛阈值;用辐射热测痛仪检测大鼠热痛阈值;用MTT法测定肺癌细胞A549的存活率,测定不同浓度细辛对紫杉醇的肺癌细胞A549生长抑制率的影响。结果:紫杉醇于给药第5天后,明显降低大鼠机械刺激痛阈值,但对大鼠热刺痛阈值无明显影响,而细辛则显著提高模型大鼠的机械刺激痛阈值与对照组比较(P<0.05)。同时,不同浓度的细辛均没有降低紫杉醇的肺癌细胞A549生长抑制率。结论:细辛对紫杉醇诱导的大鼠机械性痛觉过敏有抑制作用,且不降低其抑制肺癌细胞生长的作用,对化疗痛的防治具有积极意义。
- 郑卫红刘朝奇吕佰瑞
- 关键词：细辛紫杉醇
- HIV-1P24蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 目的制备HIV-1P24蛋白及单克隆抗体,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HIV感染。方法聚合酶链反应(PCR)扩增p24基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经E.coli表达并纯化HIV-1P24蛋白。以纯化P24蛋白抗原免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备能产生P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用Wes ternblot、ELISA技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定,建立检测P24蛋白含量的ELISA竞争法。结果原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达P24蛋白,从杂交瘤细胞中选取能稳定分泌P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用ELISA竞争法检测HIV-1阳性的血清中P24蛋白含量与病毒载量显著相关。结论 P24蛋白及特异性单克隆抗体成功制备,并建立了检测P24蛋白含量的ELISA竞争法。
- 汪龚泽刘朝奇杨建林覃晓琳吕佰瑞姚佳红
- 关键词：免疫缺陷病毒质粒酶联免疫吸附测定
- HIV-1Nef调节内皮细胞黏附分子ICAM-1的表达被引量：4
- 2010年
- 目的研究HIV-1的调节基因Nef对ECV304细胞ICAM-1表达的影响,从而为分析HIV-1感染引起内皮细胞生物学活性的变化,以及为阐明Nef参与HIV-1致病的分子机制奠定基础。方法应用本实验室已经建立保存的HIV-1Nef基因在内皮细胞的稳定表达细胞株ECV304-Nef和其阴性对照细胞株ECV304 pcDNA 3.1(+),通过RT-PCR、实时定量PCR(real-time PCR)、Western blot、FCM和细胞黏附试验分析ECV304-Nef细胞ICAM-1的表达水平。结果 RT-PCR、real-time PCR结果显示ECV304-Nef细胞ICAM-1 mRNA表达水平明显升高,为对照组的(4.3±0.2)倍;Western blot结果示ECV304-Nef细胞I-CAM-1蛋白的表达水平高于对照组;FCM分析显示ECV304-Nef细胞和对照组细胞ICAM-1阳性细胞百分率分别为(35.3±2.2)%和(12.5±0.8)%(P<0.01),两组间ICAM-1表达有显著差异。细胞黏附实验观察到ECV304-Nef细胞黏附的Jurkat细胞数明显多于对照组,荧光仪定量分析结果显示ECV304-Nef细胞黏附的Jurkat细胞的荧光强度值显著高与对照组(P<0.05)。结论本实验证实了HIV-1Nef基因可以上调血管内皮细胞细胞黏附分子ICAM-1的表达。
- 杨凡刘朝奇覃晓琳吕佰瑞周永芹韩钰
- 关键词：HIV-1NEFICAM-1血管内皮细胞
- 临床护理干预控制糖尿病患者血糖及并发症的临床效果观察被引量：4
- 2017年
- 目的观察临床护理干预控制糖尿病患者的血糖及并发症的效果，总结临床护理经验。方法将196例糖尿病患者随机分成2组，分别给与常规护理和护理干预，比较对2组糖尿病患者的血糖和并发症的差异。结果观察组通过应用护理干预后，其糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后血糖均明显低于对照组，其并发症发生率也显著低于对照组，2组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在糖尿病患者中正确应用护理干预活动，对糖尿病患者的血糖和并发症进行质量控制，可以明显降低患者血糖水平，控制患者的并发症，保证护理安全，提高护理质量。
- 李丽吕佰瑞赵剑平
- 关键词：临床护理干预糖尿病血糖并发症
- PD-L1高表达细胞对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
- ＜正＞PD-L1（Ligand of programmed death-1）作为免疫抑制性受体PD-1（Programmed death 1）的配体分子被发现广泛表达于多数肿瘤组织,并认为可能是肿瘤逃避免疫杀伤效应的机制...
- 王见之刘朝奇覃晓琳吕佰瑞汪龚泽
- 文献传递
- PET／CT联合VEGF在乳腺癌淋巴结转移诊断中的价值被引量：1
- 2015年
- 目的观察PET／CT联合血管内皮生长因子（VEGF）的表达检测对乳腺癌淋巴结转移的诊断价值。方法2013年6月至2014年3月87例乳腺癌患者，术前行PET／CT扫描，术后病理检查判断淋巴结是否转移。采用免疫组化方法检测VEGF在癌组织中的表达。分析PET／CT和VEGF对淋巴结转移的预测作用，并比较其灵敏度、特异度和准确性等。结果对淋巴结转移的诊断，PET／CT的灵敏度为75．6％，特异度为36．2％，准确性为72．1％。乳腺癌组织中VEGF的表达阳性率为78．2％，其对淋巴结转移的诊断灵敏度为73．2％，特异度为41．5％，准确性为69．7％。当PET／CT联合VEGF诊断时，其灵敏度为96．4％，特异度为45．6％，准确性为79.3％。结论PET／CT检查联合VEGF表达检测能提高乳腺癌淋巴结转移诊断的特异性和准确性，优于PET／CT或VEGF单独应用，如能同时对癌组织进行VEGF检测，可能会提高准确性。
- 尹培赵剑平刘春海吕佰瑞
- 关键词：PET/CT血管内皮生长因子乳腺癌
- 非小细胞肺癌骨转移与透明质酸和骨形态发生蛋白的相关性研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨分析透明质酸（HA）与骨形态发生蛋白（BMP）及非小细胞肺癌骨转移三者间的相关性。方法选取2013年3月-2014年6月期间我院59例非小细胞肺癌骨转移患者与59例无转移患者,分为转移组和无转移组。测量两组患者的血HA值（ng/m L）、校正尿HA值（ng/m L）、血校正尿HA值（ng/m L）及BMP值,进行统计学分析与比较。结果转移组的血HA值（51.98±4.32）ng/m L高于未转移组患者（31.21±4.21）ng/m L,转移组的校正尿HA值（190.23±4.23）ng/m L高于未转移组患者（90.12±3.89）ng/m L,转移组的血校正尿HA值（0.42±0.18）ng/m L高于未转移组患者（0.31±0.21）ng/m L,转移组中BMP的阳性表达率（100%）高于未转移组（23.73%）;P〈P〈0.05,经比较均具有统计学差异。结论 HA与BMP及非小细胞肺癌骨转移三者间具有一定的相关性,有助于非小细胞肺癌骨转移的临床诊断和预后结果评估,可进一步研究探讨。
- 柴鹏尹培吕佰瑞杨荣秉高书涛
- 关键词：透明质酸骨形态发生蛋白非小细胞肺癌骨转移
- PET/CT显像诊断胸膜转移瘤的临床价值
- 尹培张灿刘春海霍红旗柴鹏游志鑫赵剑平高书涛杨荣秉吕佰瑞王海东
